安徽省科技厅攻关项目(8010302179)
- 作品数：8 被引量：36H指数：4
- 相关作者：王明丽陈敬贤甘霖赵俊庄晓亮更多>>
- 相关机构：安徽医科大学哥伦比亚大学安徽医学高等专科学校更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省科技厅攻关项目安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- VP4基因鉴定非EV71非CoxA16手足口病病原体漏检的研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨肠道病毒VP4基因通用引物PCR诊断非肠道病毒71型(EV71)非柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)手足口病(HFMD)病毒方案的准确性。方法通过肠道病毒VP4基因通用引物PCR鉴定阜阳地区非EV71非CoxA16HFMD病毒时,显示两例病毒分离株为Sabin-1(命名为Fy-01和Fy-02株)。分别采用引物EVP4/Q8和VP1特异性引物对Fy-01和Fy-02分离株进行鉴定。结果采用VP4基因PCR扩增产物测序证实,两例病毒分离株为Sabin-1,而采用EVP4/Q8引物PCR扩增Fy-01分离株却存在异常的扩增条带,PCR扩增产物测序结果为柯萨奇病毒A组10型(CoxA10);将VP4基因PCR产物制备成克隆载体挑选多个单克隆测序结果显示,Fy-01分离株既存在Sabin-1 VP4基因,又存在CoxA10 VP4基因,证实为两种毒株混合感染。结论临床诊断为非EV71非CoxA16 HFMD的病例,如病原学诊断仅采用VP4基因PCR产物测序,特别是针对多种肠道病毒混合感染引起的HFMD,其结果并不完全可靠。
- 木朝宇庄晓亮赵俊陈敬贤王明丽
- 关键词：手足口病VP4基因
- HCMV急性间质性肺炎小鼠模型的建立被引量：4
- 2014年
- 目的建立人巨细胞病毒（HCMV）急性间质性肺炎的小鼠模型。方法用5．5×105PFU的HCMVADl69株尾静脉注射6～8周SPF级BALB／c小鼠作为实验组，同时设立正常细胞作为对照组，分别于接种后第5天和第30天处死小鼠，无菌取小鼠肺组织，通过病毒分离、PCR检测病毒特定保守基因、免疫组化、Westernblot和HE染色的方法，观察检测小鼠肺组织中HCMV及其组织病理变化。结果在感染后第5天和第30天实验组小鼠的肺组织中分离出了HC—MV病毒；PCR检测到HCMV特异性早晚期基因IE和UL55DNA；Westernblot、免疫组化检测到HCMV特异性早晚期蛋白IE和gB；HE染色证实肺组织有明显急性间质性肺炎的病理改变；对照组对应结果全为阴性。结论通过尾静脉注射HCMVADl69株病毒，在感染后第5天成功构建了HCMV急性间质性肺炎小鼠模型，该模型的建立有利于该种疾病的发病机制研究及相关抗病毒疫苗和药物的研发。
- 庄晓亮木朝宇俞俊岭张文昌甘霖陈敬贤王明丽
- 关键词：人巨细胞病毒小鼠模型间质性肺炎
- 高血压患者人巨细胞病毒感染率及其血浆中和抗体水平分析被引量：6
- 2014年
- 目的了解自然状态下,高血压患者群体人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的感染率及血浆特异性HCMV中和抗体水平,初步探讨HCMV感染与高血压的关系。方法于2013年1月至4月在安徽省第二人民医院募集51名诊断为高血压患者的血标本,同时募集性别和年龄类似的50名体检正常者的血标本作为对照。采用间接免疫荧光染色快速微量中和试验检测血浆标本中HCMV特异性中和抗体,采用常规间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆HCMV特异性IgG和IgM,采用巢式PCR法检测HCMV UL93DNA。结果高血压患者组HCMV UL93DNA、HCMV IgG和IgM的阳性率分别为72.55%、70.59%和3.92%,正常对照组分别为56.00%、50.00%和2.00%,高血压患者组中HCMV DNA和HCMV IgG的阳性率高于正常对照组(P<0.05),而HCMV IgM的阳性率在两组间的差异无统计学意义。高血压患者组血浆HCMV中和抗体的平均几何滴度为38.56±20.42,正常对照组为60.12±25.38,两组差异有统计学意义(P=0.032 6)。结论高血压患者HCMV的感染率高于正常对照,但特异性中和抗体水平明显降低。提示高血压患者的HCMV体液免疫状态低下,表明高血压与HCMV感染存在相关性。
- 曹元应甘霖赵俊张俊玲陈敬贤房功思江丹王明丽
- 关键词：高血压巨细胞病毒感染病毒抗体
- 合肥地区人巨细胞病毒先天性感染的基因型分析被引量：1
- 2011年
- 目的了解合肥地区人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染率,分析HCMV先天性感染病毒糖蛋白B(gB)基因型别。方法采用巢式PCR检测160例新生儿脐血白细胞中的HCMV gB基因,利用限制性核酸内切酶RsaⅠ和HinfⅠ分别对HCMV gB基因进行限制性片段长度多态性分析,进行DNA测序,构建进化树。结果 160例新生儿脐带血白细胞中有40例HCMV gB阳性基因;阳性基因均为gB2型,未见其他型别。结论 160例新生儿脐带血中,HCMV先天性感染率为25.0%,且基因型别均为gB2型,同时发现该基因型已有变异,提示该病毒流行株有较高频率株内基因重组发生。
- 丁婷婷陈敬贤王明丽
- 关键词：基因型
- 我国不同基因型水痘-带状疱疹病毒流行毒株gE基因序列分析被引量：4
- 2013年
- 为进一步了解我国不同地区流行的水痘—带状疱疹病毒(VZV)病毒株的基因型分布和分析代表性病毒株gE基因序列。于2010年12月至2011年6月期间,收集来自北京市、长春市、拉萨市和乌鲁木齐市4个地区水痘和带状疱疹患者的疱疹液拭子和皮肤痂片,共计18份。用单个核苷酸多态性(SNP)谱的方法确定病毒株的基因型。然后采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增gE基因的全长片段,并进行测序分析。SNP分析显示18个病毒株的基因型共为4种,其中有7株属于clade2遗传支,1株属于clade3遗传支,4株为clade5遗传支。另有6株病毒兼有不同遗传支的特征,按照目前国际通用的分型方法不能归属于任何明确的遗传支。对不同病毒株gE基因序列分析,除了发现3个国外已有报道的1个同义突变(T660C)和2个反义突变(C119T、C1606A),还发现了3个新的反义突变(C56T、C1109T和C917A)和4个同义突变(C54T、T1075C、T816C和G279A)。首次在我国新疆自治区发现了clade5遗传支的VZV,在长春市还发现了目前尚未能分型的6株病毒。对部分病毒株gE基因序列分析,在gE的e1和c1抗原表位的编码区内中检出1个新型反义突变(C917A),需要进一步研究该突变对该病毒免疫原性和致病性的影响。
- 江龙凤甘霖李珊山冯艳艳姜薇段亚平陈敬贤王明丽
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒基因型
- HCMV IE2蛋白调控功能研究新进展被引量：2
- 2013年
- 人巨细胞病毒（huma ncytomegalovirus，HCMV）属于β疱疹病毒亚科，是人类疱疹病毒中最大的一组病毒。在人群中，HCMV感染相当普遍，大多数感染呈临床隐性感染或潜伏感染；但在新生儿、免疫抑制或免疫功能低下的人群中则可引起临床显性感染，出现明显症状，甚至发生致死性疾病。
- 贾淑芳毛有胜计晓王明丽
- 关键词：E2蛋白HCMV感染人类疱疹病毒免疫功能低下致死性疾病
- 水痘-带状疱疹病毒的基因分型与分子进化被引量：4
- 2012年
- 水痘-带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)又称人类疱疹病毒3型,属疱疹病毒科,与单纯疱疹病毒HSV-1、HSV-2一起归入α亚科。人类是其唯一的自然宿主,对其普遍易感。VZV引起的原发感染表现为水痘,并在宿主的感觉神经节内潜伏,再激活时可引起带状疱疹。近年来VZV分子流行病学的研究涉及流行病学、病毒学、生物信息学等相关领域,通过监测、研究VZV的基因变异,区分疫苗株或野生株引起的感染,探讨世界范围内各VZV病毒株的系统发育关系和各遗传支之间的分子进化史。现将近年来有关VZV不同的地理分布和遗传支进化的研究状况综述如下。
- 江龙凤甘霖陈敬贤王明丽
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒进化基因型
- 阜阳市手足口病柯萨奇病毒A10型VP4区基因特征分析被引量：11
- 2013年
- 目的分析2011-2012年阜阳市手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患儿咽拭子标本分离的柯萨奇病毒A10型(coxsackievirus A10,CoxA10)VP4区的基因特征,初步了解该病毒的变异情况。方法对49份HFMD患儿的咽拭子标本进行病毒分离,出现人肠道病毒(human enterovirus,HEV)特征性病毒致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)后提取病毒RNA,用VP4区分型引物进行半巢式反转录-PCR,再通过测序和GenBank Blast比对确定病毒型别,并对其VP4区进行序列进化分析。结果 49份咽拭子标本有16份出现了特征性CPE,病毒分离阳性率32.7%。其中三株经鉴定为CoxA10,阳性率18.8%。它们的VP4区核苷酸序列同源性为95%～99%,与GenBank中参考毒株VP4区核苷酸序列同源性为77%～97%。其中与中国株HQOO5431同源性为96%～97%,与中国株JN639887同源性为96%～97%,与中国株FJ598089同源性为95%～96%,与日本株AB282808同源性为85%～86%,与日本株AB162743同源性为87%～89%,与CoxA10原型株Kowalik(AF081300)同源性为77%～78%。进化分析表明这三株分离株与Kowalik株聚成一簇,均属于CoxA10,与日本各地分离的CoxA10的病毒核苷酸差异较大,但与我国本土分离株自成一簇。结论 2011-2012年阜阳地区手足口病病原体CoxA10 VP4与中国地区分离株在进化上密切相关,其序列未发生明显变异。
- 赵蕾陈敬贤王明丽
- 关键词：手足口病柯萨奇病毒感染序列同源性
