上海市科学技术发展基金(023112027)
- 作品数：9 被引量：68H指数：5
- 相关作者：李建粤米东吕英海毛万霞闫其涛更多>>
- 相关机构：上海师范大学山东科技大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 植物基因分离的图位克隆技术被引量：22
- 2005年
- 传统的基因功能克隆、表型克隆方法具有基因表达产物不清楚,难以进行相关基因分离等缺点。目前,图位克隆技术日渐成熟,已成为分离基因的有效方法,并在分离不同的植物基因中得到了广泛的应用。本文简要介绍图位克隆技术原理,并详细阐述图位克隆操作的4个重要技术环节:筛选与目的基因紧密连锁的分子标记、目的基因的定位、构建高质量容易操作的大片段基因组文库和目的基因的筛选和鉴定。本文还概述了近年来利用图位克隆技术分离植物基因的研究成果以及最新研究进展,并对图位技术的应用前景作出展望:在不久的将来,在比较基因组学中统一遗传系统理论的指导下,在具有高多态性水平的以PCR为基础的分子标记日趋饱和的背景下,应用图位克隆技术在植物基因克隆研究中必将取得更加辉煌的成果。
- 闫其涛逯慧毛万霞李建粤
- 关键词：基因分离基因表达产物基因组文库功能克隆克隆方法行相关
- 导入反义蜡质基因改良水稻稻米的食味品质和营养品质被引量：13
- 2007年
- 经PCR、Southernblot和稻米GUS检测,蜡质基因反义片段与gus构成的融合基因已整合到8株水稻基因组中,并能正确表达。通过稻米GUS染色追踪分析获得转反义蜡质基因纯合后代。将转基因植株的稻米送农业部稻米及制品质量监督检验测试中心进行糙米蛋白质含量和直链淀粉含量测定。结果显示:(1)在转反义蜡质基因纯合的超2-10粳稻后代中,大多数单株糙米在直链淀粉含量降低的同时,蛋白质含量有不同程度提高,糙米蛋白质含量和直链淀粉含量呈显著负相关关系;(2)对照糙米直链淀粉平均含量和糙米蛋白质平均含量分别为13.4%和9.5%。在转基因植株中,稻米直链淀粉含量最低的为11.4%,而蛋白质含量也相对最高,为13.5%。本试验结果表明在水稻中导入反义蜡质基因不仅能够降低水稻稻米的直链淀粉含量,还有可能提高水稻稻米的蛋白质含量。
- 李建粤毛万霞范士靖吕英海
- 关键词：水稻反义蜡质基因直链淀粉含量蛋白质含量
- 大豆球蛋白研究以及在改良稻米营养品质中的应用被引量：4
- 2005年
- 11S大豆球蛋白是大豆贮藏蛋白的重要成分,目前已发现6种有功能的大豆球蛋白,G1、G2、G3、G4、G5和G7,编码这些大豆球蛋白的基因家族分别是Gy1、Gy2、Gy3、Gy4、Gy5和Gy7.本文在简要介绍大豆球蛋白组分、结构及基因家族后,采用生物信息学方法分析比较了不同种类大豆球蛋白基因之间的序列同源性,并对不同大豆球蛋白基因的遗传距离作了分析;重点比较分析不同大豆球蛋白的氨基酸序列和组成,以及不同酸性肽和碱性肽中重要氨基酸的含量,提出了利用大豆球蛋白基因进行水稻营养品质改良研究的新思路和新策略.
- 李建粤米东张伟闫其涛
- 关键词：大豆球蛋白基因家族同源性
- 总蛋白含量不同的水稻品种谷蛋白含量分析及Gt1启动子序列比较被引量：3
- 2005年
- 选取3种总蛋白含量差异较大的水稻为材料,在分析其谷蛋白含量的基础上,克隆它们的Gt1启动子,并采用vectorNTI软件对这3个Gt1启动子序列进行比较.结果显示,在不同总蛋白和谷蛋白含量的水稻品种中,Gt1谷蛋白基因启动子是有差异的.
- 米东李海权李建粤陈立琼
- 关键词：水稻克隆
- 水稻蜡质基因及其利用研究进展被引量：9
- 2005年
- 简要介绍了水稻蜡质基因的等位基因位点及其表达特性,并从蜡质基因第1内含子核苷酸和蜡质基因剪切方式以及蜡质基因相关的顺式作用元件与反式作用因子等方面阐述了水稻蜡质基因表达调控.还概述了水稻蜡质基因的分子标记辅助选育方面的研究.从近年来的报道显示,利用反义RNA技术抑制水稻内源蜡质蛋白的表达是目前蜡质基因应用研究的主要方向.关于蜡质基因的研究,在其它作物中也都有报道.
- 吕英海李建粤
- 关键词：水稻蜡质基因基因表达调控分子标记基因工程反义蜡质基因
- 水稻Gt1启动子引导大豆球蛋白Gy7基因表达载体构建
- ＜正＞水稻是世界上近一半人口的主粮,它的营养品质一直是人们最关注的问题之一。目前常规水稻栽培品种稻米总蛋白质含量都较低,而且往往缺乏一些重要氨基酸。据报道,赖氨酸是水稻等各种禾谷类作物的第一限制性氨基酸。大豆球蛋白是大豆...
- 顾婷玉米东李海权张伟逯慧石少华李建粤
- 关键词：表达载体构建
- 文献传递
- 水稻白化突变体遗传、超微结构及电泳分析被引量：8
- 2005年
- 在转入含反义蜡质基因T-DNA水稻后代中获得白化突变体。本试验从遗传分析、电镜观察和电泳分析对该白化突变体进行研究。结果显示,该白化突变体是由于在转基因组培操作过程中由核基因突变产生的,能够稳定遗传,属于单基因位点隐性突变;超微结构观察显示,白化苗具有前质体,但没有叶绿体;SDS-PAGE分析,三叶期白化苗比绿苗缺少3条条带,分子量分别约为112.36 KD、18.08 KD和9.65 KD。本研究为进一步开展导致该白化突变体的功能基因分析奠定了基础。
- 杨丽君张伟李建粤张慧绮
- 关键词：水稻SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳分析白化苗SDS-PAGE分析反义蜡质基因
- 花特异表达启动子的克隆及花色调节基因Lc表达载体的构建被引量：5
- 2004年
- 克隆了矮牵牛花特异表达基因CHSA启动子,并定向插入到已含有花色调节基因Lc的质粒pBI121中,取代原有的CaMV35S启动子.所构建的新表达栽体可用于花色改良研究.
- 刘佳王忠李建粤
- 关键词：克隆
- 水稻26kDa球蛋白基因启动子克隆及序列分析被引量：1
- 2005年
- 以水稻品种日本晴基因组总DNA为模板,采用PCR扩增获得约900bp大小的DNA片段,回收该片段并与pUCm-T载体连接,转化感受态大肠杆菌。进行PCR检测和酶切鉴定,选取阳性克隆进行测序分析。测序结果显示,该片段含904个核苷酸对;采用vectorNTI软件将本试验中克隆的序列与Genbank(AY427575)公布的日本晴球蛋白基因启动子序列比对,有9个核苷酸差异,同源性为99%,证实本试验中克隆的DNA序列为水稻球蛋白基因启动子;在重要功能区段上,两者核苷酸序列完全一致。本研究认为造成长期不在一个环境中种植的同一水稻品种球蛋白基因启动子序列差异的原因之一,可能是核苷酸中性突变。水稻球蛋白基因启动子的成功克隆,为今后开展水稻等重要农作物转基因研究奠定基础。
- 吕英海米东李建粤丁瑶
- 关键词：SATIVA克隆
- 重要谷类种子贮藏蛋白的特性及改良研究被引量：8
- 2004年
- 在成熟谷类种子中,总蛋白约为种子干重的7%～16%,其中大部分为贮藏蛋白.这些贮藏蛋白对于人类和牲畜所需要的营养质量以及在食品加工中都有重要的影响.本文对一些重要谷类种子贮藏蛋白的组成特性以及利用基因工程技术提高谷类种子蛋白质含量和质量进行了全面综述.此外,还简要介绍了在利用基因工程改良谷物种子品质中可能产生的食品安全性问题、如何增加外源基因的表达量和全面提高谷类种子蛋白质含量以及解决的办法.
- 阎其涛李建粤米东刘佳
- 关键词：贮藏蛋白基因工程营养品质谷类
