江苏省自然科学基金(BK2009101)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘锦波龚爱华张志坚熊御云邱晶更多>>
- 相关机构：江苏大学常州市第一人民医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 嗅鞘细胞上清液对抗过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的线粒体机制被引量：2
- 2012年
- 目的:研究嗅鞘细胞上清液(olfactory ensheathing cell conditioned medium,OECCM)对星形胶质细胞的保护作用及其线粒体机制。方法:先用500μmol/L H2O2损伤星形胶质细胞20 min;再以50%的OECCM继续培养细胞24 h。MTT法检测星形胶质细胞的活性,Hoechst 33342染色法和蛋白质印迹法检测细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3的表达;用JC-1染色法检测线粒体的膜电位。结果:OECCM能减少H2O2诱导的细胞凋亡,减少caspase-3的表达,并且使线粒体膜电位增高。结论:OECCM可以对抗500μmol/L H2O2诱导的星形胶质细胞凋亡,其机制可能与稳定线粒体膜电位有关。
- 邱晶高静熊御云刘锦波
- 关键词：嗅鞘细胞星形胶质细胞线粒体
- 后肢缺血预处理对大鼠脊髓损伤后热休克蛋白70表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的 研究后肢缺血预处理对热休克蛋白70在脊髓损伤后表达的影响.方法 SD大鼠随机（随机数字法）分为3组（20只/组）：假手术组大鼠予椎板切除,损伤组大鼠脊髓受到撞击伤（5 g×10 cm）,缺血预处理组在大鼠受到损伤前8 h对下肢进行缺血预处理.损伤通过改良Allen法进行,双下肢痉挛和摆尾为成功标志.缺血预处理通过驱血带阻断下肢血流10 min放开10 min.两侧下肢交替进行,每侧进行3次.在损伤24 h和48 h后,用RT-PCR、免疫组织化学和原位杂交技术,观察HSP70 mRNA及蛋白的变化.各组数据用SPSS 15.0统计软件包进行方差分析（one-way ANOVA）.结果 假手术组大鼠脊髓组织中检测到很弱的HSP70 mRNA表达.损伤和预处理组HSP70表达增强,阳性细胞较多,以中央灰质阳性神经元分布较密集.两个时间点mRNA表达水平预处理组（22.18±3.69,14.15±4.18）高于损伤组（13.97±4.46,8.73±3.55）,差异具有统计学意义（F=16.06,P=0.005和F=7.43,P=0.028）;两个时间点蛋白表达预处理组（16.71±4.02,9.85±2.20）高于损伤组（14.85±3.73,8.78±2.05）差异有统计学意义（F=90.13,P=0.032和F=34.70,P=0.036）.结论 下肢缺血预处理能增加损伤脊髓HSP70的转录和表达,增加神经保护作用.
- 刘锦波龚爱华张志坚
- 关键词：脊髓损伤热休克蛋白70原位分子杂交RT-PCR
- 嗅鞘细胞条件培养液对PC12细胞神经丝蛋白、突触蛋白、突触素蛋白表达的影响
- 2010年
- 目的:观察嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)条件培养液对PC12细胞神经丝蛋白(neurofilament protein,NF)、突触蛋白(synapsin)和突触素蛋白(synaptophysin)表达的影响,探讨嗅鞘细胞条件培养液促神经细胞分化生长的作用机制。方法:原代培养并纯化OECs,收集培养上清制备成嗅鞘细胞培养液(OEC culture medium,OECCM),与PC12细胞培养24、48、72h,观察细胞形态学变化;通过免疫荧光法检测PC12细胞NF的表达及分布;蛋白质印迹法检测NF、突触蛋白和突触素的相对含量。结果:OECCM培养的PC12细胞长有突起,并随着培养时间的延长,细胞形态酷似神经元;免疫荧光染色显示NF起初在核周分布,OECCM作用后NF的分布范围逐渐增加,其分布面积与β-tubulin分布面积的比值显著增高(P<0.05)。蛋白质印迹法显示OECCM组NF、突触蛋白(synapsin)和突触素蛋白(synaptophysin)的表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:嗅鞘细胞能分泌一些促PC12细胞分化的因子,这些因子能促进PC12细胞NF骨架的组装,并诱导神经元功能蛋白的表达,使该细胞在结构和功能上向神经元分化。
- 张俊刘锦波张志坚龚爱华刘志元
- 关键词：嗅鞘细胞条件培养液PC12细胞神经丝蛋白SYNAPSINSYNAPTOPHYSIN
