国家自然科学基金(39993430)
- 作品数：64 被引量：314H指数：10
- 相关作者：李幼平郭礼和沈振亚惠国桢冯书堂更多>>
- 相关机构：苏州大学中国科学院上海生命科学研究院四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划四川省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 利用siRNA抑制NF-κB p65蛋白表达对EOMA细胞中TF表达影响
- 2012年
- 目的探讨针对小鼠EOMA细胞核冈子KB（NF—KB）的小干扰RNA（siRNA）对细胞c}t组织因子（TF）表达的抑制作用。方法设计并化学合成针对小鼠NF—KBp65的siRNA，按照实验分组分别转染小鼠EOMA细胞，转染24h后，在相应细胞中加入肿瘤坏死因子α（TNF-α，终浓度为20mg／L），于此后6h分别提取各组细胞总蛋白及RNA，检测细胞内NF—KBp65蛋白表达和TF的mRNA水平。结果TNF-α．刺激6h后，与空白对照组相比，阴性对照组、scramblesiRNA组细胞内NF—KBp65蛋白表达和TFmRNA水半增加，而siRNA组则明娃受到抑制；TNF组、TNF＋scramblesiRNA组细胞内NF—KBp65蛋门表达和TF mRNA水平明显增加，TNF＋siRNA组细胞内NF—KBp65蛋白表达和TFmRNA水平较卒白对照组有所增加，但明显低下TNF纽、TNF＋scramblesiRNA组（P〈0．01）。结论利用siRNA抑制NF—KBp65蛋白表达可以有效地抑制NF—KB下游靶慕因TF的表达。
- 周晓彤沈振亚余云生叶文学黄浩岳滕小梅
- 关键词：小干扰RNA血管内皮细胞核因子-KB
- 猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究被引量：1
- 2004年
- 从五指山猪(WSZP)近交系第8～13代培育群中,先后选用21头5～10月龄青年母猪,分别于授精后25～30d采集胎儿106个,进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM+F10(1∶1)为基础培养液,按添加或不添加生长因子,将培养液分为A、B、C3种,并以STO细胞作饲养层,在38℃、5.0%CO2和湿润的气相中进行培养建系。结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株,其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存。并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究。研究发现:不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响,不同培养液对EG细胞建系效果不同,STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一。EG细胞系的初步建立,为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能。
- 冯书堂董晓刘立新牟玉莲况玲陈红平张莉张勇张青峰
- 关键词：胚龄培养液嵌合体囊胚
- NF-κB p65 siRNA对延迟性排斥反应的抑制作用
- 2013年
- 目的探讨核因子kappa B(NF-κB)p65的小干扰RNA(siRNA)对延迟性排斥反应的抑制作用。方法血管内皮细胞(EOMA)分为7组:A组(空白对照),B组(阴性对照),C组(TNF-α处理),D组(siRNA处理),E组(scramble siRNA处理),F组(TNF-α+siRNA处理),G组(TNF-α+scramble siRNA处理)。用阳离子脂质体LipofectamineTM2000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65siRNA转染入相应的EOMA细胞,24h后在C组、F组和G组中加入TNF-α(终浓度为20ng/ml)。于TNF-α加入后的6h提取各组细胞总RNA,RT-PCR法测定EOMA细胞内E选择素(E-selectin)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、白细胞介素1α(IL-1α)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)水平。结果 F组EOMA细胞内E-selectin、ICAM-1、IL-1α和VCAM-1表达明显高于A组,的明显低于C组和G组(P<0.01)。结论特异性siRNA抑制NF-κB p65表达可以有效抑制延迟性排斥反应。
- 周晓彤沈振亚余云生叶文学黄浩岳滕小梅
- 关键词：异种移植小干扰RNA核因子ΚBP65血管内皮细胞
- 从健康人外周血中建立异种抗原特异性的T细胞系初探被引量：4
- 2000年
- 目的 :为了探讨异种器官移植中T细胞参与的免疫排斥机理 ,从健康人外周血中试行建立识别猪淋巴细胞抗原特异性的T细胞系方法研究。方法 :通过照光致弱的猪外周血单个核细胞反复刺激人的T淋巴细胞 ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞。结果 :获得 2株为TCRαβ+CD3+CD8+细胞 ,另 1株为TCRαβ+CD3+CD4+细胞。结论 :健康人外周血中有识别异种抗原特异性的T细胞系 。
- 谢晋李宁丽张冬青沈佰华周光炎
- 关键词：异种移植T细胞系
- 骨髓基质细胞成年大鼠脑内移植被引量：6
- 2003年
- 目的 研究骨髓基质细胞脑内移植后的分布和移行 ,为细胞移植治疗疾病奠定基础。方法 常规培养大鼠骨髓基质细胞 ,应用免疫组织学方法对细胞进行鉴定 ,Hoechst332 5 8标记细胞 ,立体定向移植到大鼠的纹状体 ,经过一段时间后处死大鼠 ,脑组织切片 ,直接在荧光显微镜下检查存活的细胞。结果 细胞移植到大鼠脑内能够长时间存活 ,移植细胞与宿主细胞有很好的相容性 ,宿主脑组织的结构无破坏 ,移植细胞能够移行一段距离 ,说明脑内存在的信号诱导细胞向一定的方向迁徙。结论 骨髓基质细胞脑内移植后 ,能够与宿主脑组织整合在一起 ,无细胞过度增生和胶质瘢痕形成 ,这种细胞可能成为中枢神经系统自体移植的细胞来源。
- 杨立业刘相名惠国桢费俭郭礼和
- 关键词：骨髓基质细胞成年大鼠免疫组织学细胞鉴定
- 中国内江猪胰腺组织异种抗原的研究被引量：1
- 2000年
- 为获取临床猪→人异种胰腺移植的基础资料 ,分别采用植物凝集素 BSIB4、健康人血清、人类血型抗原 A、B、H物质单克隆抗体免疫组化法检测 1 0头内江猪胰腺组织中异种移植抗原的表达。结果显示 :内江猪胰腺组织中血管内皮、导管上皮细胞表达α- Gal;部分胰岛细胞、胰腺外分泌细胞和所有导管上皮细胞均表达人类血型 A抗原。结论 :人体内存在抗内江猪胰腺组织部分细胞的天然抗体 ;
- 步宏陈蕴颖李幼平程惊秋李涛
- 关键词：胰腺组织
- 异种胸腺修饰和全身照射在猪-猴心脏移植模型中对抗体产生的影响被引量：1
- 2003年
- 为观察胸腺修饰和全身照射预处理受体对猕猴抗猪抗体产生的影响,将受体中国猕猴随机分成空白组(A组)、全身照射组(B组)、照射+胸腺注射组(C组),用流式细胞仪法监测猕猴外周血细胞表面IgM、IgG阳性细胞的百分比在预处理前后及移植后的变化。结果表明:全身照射后,IgM类天然抗体阳性细胞的百分比水平较空白组踢显下降(P<0.01),而IgG类天然抗体阳性细胞的百分比水平无明显变化;在移植后,照射+胸腺注射组的IgM类诱生抗体阳性细胞的百分比水平及IgG类诱生抗体阳性细胞的百分比水平较空白组及全身照射组上升延缓。提示异种胸腺修饰能抑制IgM及IgG类诱生异种抗体的产生。
- 张治沈振亚瞿冀琛何建明倪斌余云生叶文学孟自力滕晓梅
- 关键词：胸腺修饰异种移植
- 中国内江猪与中国人肝微粒体酶的比较研究
- 2009年
- 目的比较中国内江猪与中国人肝微粒体酶的差异,以期从药物代谢角度评价内江猪作为异种移植供体的可能性。方法通过Ca2+沉淀法分离肝微粒体,测定4月龄中国内江猪和中国正常成人肝微粒体中细胞色素P450(CYP450)、b5(CYb5)的含量及氨基比林N-脱甲基酶(ADM)的活性。结果4月龄中国内江猪肝CYP450为(0.473±0.109)nmol/mg蛋白,CYb5为(0.403±0.107)nmol/mg蛋白,ADM的活性为(1.662±0.083)nmol/(mg蛋白.min);均与中国正常人〔分别为(0.349±0.089)nmol/mg蛋白,(0.275±0.083)nmol/mg蛋白,(1.269±0.215)nmol/(mg蛋白.min)〕存在差异(P<0.05),分别高出正常人35.5%、46.5%、31.0%。结论中国内江猪肝脏中CYP450、CYb5含量及ADM活性较中国正常人高,药物的代谢可能较正常成人快,因此,中国内江猪肝脏代替人的肝脏代谢药物是可行的。
- 熊文碧蔡绍辉包定元李幼平何秋明孙爱民熊小林
- 关键词：内江猪中国人肝微粒体酶CYP450
- 异种移植中的免疫学问题及对策被引量：3
- 2002年
- 随着临床同种异体移植的深入开展 ,人类供者器官来源与临床需求之间的缺口日益扩大 ,许多研究者逐渐把目标转向了利用动物器官的异种移植。因其具有诸多优点 ,猪成为了移植界公认的替代人类器官的最佳来源。本文将对近年来国外有关异种移植免疫学问题的可能机制及对策的文献作一综述以供参考。
- 吴群
- 关键词：异种移植移植免疫学排斥反应器官功能衰竭
- 豚鼠到大鼠异种心脏移植模型的改进
- 2008年
- 目的探讨豚鼠到大鼠异种腹腔心脏移植模型建立的技巧。方法改进了供受体的麻醉、供心的摘取、受体腹腔血管的准备、心肌保护及血管吻合技术,建立66例豚鼠到大鼠异种腹腔心脏移植模型。结果豚鼠到大鼠异种腹腔心脏移植的成功率达90.91%,缩短了手术时间。结论通过技术的提高,提高了豚鼠到大鼠异种心脏移植的成功率。
- 仲宁沈振亚叶文学胡江文丁琦闫效坤张胜超
- 关键词：异种心脏移植动物模型
