云南省自然科学基金(2002C0029Q)
- 作品数：3 被引量：23H指数：3
- 相关作者：邢来君郑树松蒋海玉张美华李劲峰更多>>
- 相关机构：云南大学南开大学云南省农业科学院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 农杆菌介导法将深黄被孢霉△~6-脂肪酸脱氢酶基因(D6D)导入油菜的研究被引量：6
- 2006年
- △6-脂肪酸脱氢酶基因可将亚油酸转化为γ-亚麻酸。我们将克隆的深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(D6D)插入植物表达载体pBI121,构建了重组质粒pBI121-D6DMI。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导途径,将深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因导入了甘蓝型油菜恢复系,经过诱导分化获得抗卡那霉素的再生植株。PCR检测及Souther杂交结果表明,外源基因△6-脂肪酸脱氢酶基因已整合到油菜再生植株的基因组中。
- 李劲峰郑树松张崎蒋海玉邢来君张美华
- 关键词：△^6-脂肪酸脱氢酶基因Γ-亚麻酸甘蓝型油菜深黄被孢霉
- 少根根霉Δ_-~6脂肪酸脱氢酶基因在毕赤酵母中的表达(英文)被引量：12
- 2005年
- Δ6- 脂肪酸脱氢酶是一种膜整合蛋白,也是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶。在前期工作中,通过RT PCR和RACE技术,从少根根霉NK300037中克隆到一个潜在编码Δ6- 脂肪酸脱氢酶的序列,序列和功能分析结果表明该序列具有一个长度为1377bp、编码由458个氨基酸组成、大小为52kD的新的Δ6- 脂肪酸脱氢酶基因。把少根根霉Δ6- 脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)亚克隆到表达载体pPIC3.5K,构建重组表达载体pPICRAD6,并转化到毕赤酵母菌株GS115进行表达。提取酵母细胞总脂肪酸和进行甲酯化,经气相色谱和气相色谱质谱连用分析表明,目的基因的编码产物能将C16∶1、C17∶1、C18∶1、亚油酸和α- 亚麻酸在Δ6和7位间特异性脱氢而引入一个新的双键,生成更高不饱和的脂肪酸,该催化反应没有链长特异性,只有键位特异性。此外,按Kozak序列特点,改变目的基因转译起始密码子周边序列结构,并把改变后序列导入毕赤酵母GS115中进行功能表达分析,结果表明在毕赤酵母中这种改变同样能提高目的基因的表达水平。综合所有分析结果表明,巴斯德毕赤酵母更适合用来综合分析Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的功能。
- 张琦李明春孙颖陈有为张飚邢来君
- 关键词：少根根霉Γ-亚麻酸巴斯德毕赤酵母
- 油菜无菌苗最佳生长条件的探讨被引量：6
- 2006年
- 以甘蓝型油幕种子作为试验材料，对无菌苗培养前的种子消毒荆种类厦不同消毒时间、浓度等的消毒效果进行了比较研究；对影响无菌苗生长的培养基配方、pH值厦生长时间等因素进行了探讨。结果表明：油幕无菌苗的最佳生长条件为：70％酒精表面消毒1～2min后，用15％H202消毒35min，无菌水冲洗3～5次，无菌水浸泡种4～15h，接种至1／2MS培养基＋20g／L蔗糖＋7．5g／L琼脂，pH值为5．8，25℃，生长4～6d即可作为转基因用无菌苗。
- 李劲峰郑树松蒋海玉张美华符明联
- 关键词：油菜无菌苗消毒时间种子消毒培养基配方MS培养基
