湖北省自然科学基金(2008CDB359) 作品数:7 被引量:34 H指数:4 相关作者: 闫云君 刘云 徐莉 杨江科 王志成 更多>> 相关机构: 华中科技大学 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 更多>> 相关领域: 化学工程 生物学 轻工技术与工程 石油与天然气工程 更多>>
猪板油直接萃取制备生物柴油的研究 被引量:2 2009年 研究了猪油原位萃取-酶法转化制生物柴油。考察了溶剂用量、萃取时间、萃取温度等对油脂得率的影响,探讨了以Novozyme 435酶为催化剂直接转化猪油生物柴油。结果表明,萃取猪油的较优参数为:乙酸甲酯为萃取剂,乙酸甲酯用量(mL)与猪板油质量(g)比为8∶1,萃取时间3 h,萃取温度50℃;以Novozyme 435脂肪酶转化猪油制备生物柴油,得率为95.12%,当Novozyme 435酶和Lipozyme TLIM酶混合比为1∶1时,生物柴油转化率最高,达97.12%。 王志成 胡芳 韦富香 刘云 闫云君关键词:生物柴油 乙酸甲酯 猪油 脂肪酶 PS脂肪酶催化乌桕梓油制备生物柴油工艺优化 被引量:4 2009年 采用响应面法对固定化洋葱假单胞菌脂肪酶催化乌桕梓油制备生物柴油的工艺参数进行了优化.通过SAS 9.0软件分析,确定了最佳工艺参数:醇油摩尔比4∶1,脂肪酶用量2.7%(质量分数),反应温度41℃,含水量7%(质量分数),转速200 r/min,反应时间12 h.在此最佳工艺条件下,生物柴油得率为96.22%,与回归模型预测值(97.07%)非常接近.回归系数为0.981 9,说明该回归模型可准确预测乌桕梓油生物柴油得率. 李琴 刘云 闫云君关键词:生物柴油 响应面法 复合酶法制备乌桕梓油生物柴油工艺优化 被引量:6 2010年 采用响应面法对复合酶Novozym435和Lipozyme TLIM催化乌桕梓油制备生物柴油的工艺条件进行了优化。通过SAS 9.0软件分析,获得最优工艺参数为:复合酶加入量Novozym 4352.52%、Lipozyme TLIM1.68%(基于油质量),反应温度40℃,叔丁醇加入量41%(基于油体积),分子筛加入量5.5%(基于油质量),醇油摩尔比5.05∶1。在此条件下,生物柴油的转化率高达98.72%,与回归模型预测的最优条件下生物柴油转化率97.69%非常接近。 邹晓霞 杨江科 刘云 徐莉 汪小锋 闫云君关键词:生物柴油 克雷伯菌HQ-3厌氧发酵产氢培养基的优化 被引量:1 2010年 运用Plackett-Burman设计实验结合SAS数据分析对基于克雷伯菌HQ-3(Klebsiellasp.HQ-3)产氢培养基的主效因素进行筛选,确定产氢培养基的主效因素,利用最陡爬坡实验确定主效因素的响应面中心值,用响应面法和Matlab7.0对厌氧发酵的产氢培养基的主效因子进行了优化.得到的优化的产氢培养基(YH培养基)为:Na2HPO4.12H2O,15.0g/L;KH2PO4,7.7g/L;MgSO4.7H2O,3.7g/L;葡萄糖,21.4g/L;蛋白胨,18.1g/L;酵母膏,8.0g/L;pH=8.3.利用优化的培养基进行厌氧发酵产氢验证,得到最大产氢量为826.3mL/L,与预测值806.0mL/L基本相符.并且优化培养基较初始培养基产氢量621.2mL/L,提高了33%.在最优发酵条件下,对发酵液相产物乙醇、甲酸、乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸进行测定,发现乙醇、甲酸、乙酸含量占总液相产物的93%,确定其发酵类型为混合酸途径. 徐莉 刘合钦 刘云 闫云君关键词:厌氧发酵 PLACKETT-BURMAN 响应面法 洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的基因改造及其在毕赤酵母中组成型和诱导型的表达 被引量:10 2010年 【目的】克隆洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)脂肪酶基因,实现其在毕赤酵母中快速、安全和稳定性的大量表达。【方法】首先设计引物扩增B.cepacia脂肪酶基因,然后应用生物信息学方法分析B.cepacia和毕赤酵母整体密码子使用情况、脂肪酶基因信号肽及密码子偏好性。在此基础上,运用overlap PCR对脂肪酶基因中低使用频率密码子进行改造并同时降低基因的G+C含量,获得优化的脂肪酶基因。再分别把原始和优化的脂肪酶基因导入载体pGAPZα和pPIC9K中,获得组成型表达载体pGAPlipW、pGAPlipO和诱导型表达载体pPIClipW、pPIClipO。分别将所得4种载体转入GS115中,得到一系列工程菌。经发酵和NTA树脂纯化后,对脂肪酶的酶学性质进行了初步研究。【结果】4种工程菌的脂肪酶活力分别为pPIClipW37.8U/mL,pPIClipO129.5U/mL,pGAPlipW40.2U/mL和pGAPlipO184.3U/mL。改造后脂肪酶活力比原始脂肪酶提高了4.6倍。酶学性质研究表明,脂肪酶在60℃时活力最高,在40℃-65℃范围内非常稳定;脂肪酶最适pH值为9.0,在pH6.0-pH10.0范围均表现很好的稳定性。【结论】通过overlap PCR改造后的脂肪酶显著提高了其在毕赤酵母中的表达效率,且GAP启动子比AOX1启动子更适合于B.cepacia脂肪酶的表达。大量表达的重组脂肪酶的性质与野生脂肪酶的性质相同,符合生产要求。 贾彬 刘文山 杨江科 叶才伟 徐莉 闫云君关键词:洋葱伯克霍尔德菌 OVERLAP GAP启动子 响应面法优化固定化洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶回收工艺的研究 被引量:2 2009年 酶法制备生物柴油工艺引起了越来越多的关注。本文以脂肪酶回收前后脂肪酸甲酯得率之比作为检测指标,采用响应面法对自行制备的固定化洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的回收工艺参数进行了优化,并利用软件SAS 9.0对实验数据进行分析。确定的最佳回收条件:回收溶剂用量20.4 mL,回收温度40.2℃,回收时间20 m in。此条件下,验证试验脂肪酶回收率最大可达98.26%,与回归模型预测最优条件下脂肪酶回收率99.59%非常接近,且使用30次后,其回收效率依然接近100%。R2=96.63%显示该回归模型在分析脂肪酶回收率方面具有极高的准确性和可信度。 李琴 张立伟 闫云君关键词:生物柴油 响应面法 基于响应面的酶法酯交换制备乌桕脂油类可可脂 被引量:9 2010年 在无溶剂状态下,研究Lipozyme TLIM催化乌桕脂油酯交换反应制取类可可脂。采用三因素五水平响应面法优化工艺参数,获得最优工艺条件为:酶用量9wt.%,反应温度52.5℃,反应时间3h。在最优条件下,类可可脂得率为(85.111±0.475)%。高温气相色谱和红外光谱分析表明类可可脂中甘油三酯组成和结构与天然可可脂类似。 胡芳 韦富香 王志成 刘云 闫云君关键词:类可可脂 脂肪酶 酯交换反应 响应面法