国家科技重大专项(2008ZX10301)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：刘珊珊孙长江赵娅娅韩文瑜姚翠梅更多>>
- 相关机构：吉林大学南方医科大学温州医学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌RD1区T细胞表位分布情况预测及分析被引量：1
- 2011年
- [目的]对结核分枝杆菌RD1区T细胞表位分布情况进行预测和分析。[方法]利用NetMHC server生物信息学软件,以和HLA-Ⅱ和HLAⅠ-类分子结合能力为指标,分别对结核分枝杆菌RD1区9个编码蛋白进行T细胞抗原表位预测。[结果]通过预测,共获得和HLA-Ⅱ类分子结合的抗原表位1 580个和HLA-Ⅰ类分子结合的抗原表位336个。[结论]预测获得的T细胞抗原表位将对结核病特异性检测及新的结核疫苗研发起到借鉴作用。
- 姚翠梅孙长江张智勇赵娅娅刘珊珊刘宏韩文瑜
- 关键词：SERVER
- 用于时间分辨荧光免疫分析的结核分枝杆菌培养滤液蛋白10参照品的制备
- 2011年
- 目的通过基因工程技术制备结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP10)、链亲和素(SA)/CFP10融合蛋白(包括SA-CFP10、CFP10-SA),筛选灵敏度最高、稳定性最好者作为时间分辨荧光免疫分析法检测(TRFIA)的参考标准品。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组为模板,扩增CFP10基因,将其克隆到pET24b、pET24b-SA、pET21a-SA三种载体中,转化到大肠杆菌Rosetta中进行表达,表达产物经镍离子亲和层析(Ni-NTA)柱纯化,透析法复性。三种重组蛋白用双抗体夹心法TRFIA从灵敏度、稳定性两方面进行评价。结果成功构建了pET24b-CFP10、pET24b-SA-CFP10和pET21a-CFP10-SA三种表达载体,重组蛋白CFP10主要为可溶形式表达,融合蛋白CFP10-SA、SA-CFP10均以包涵体形式存在,Ni-NTA柱纯化后透析复性,纯度均可达90%以上。三种重组蛋白经双抗体夹心TRFIA,CFP10-SA灵敏度最高(0.02μg/L),稳定性最好。结论得到了灵敏度高、稳定性好的TRFIA检测CFP10的参照品CFP10-SA融合蛋白,为研制该结核分支杆菌时间分辨荧光诊断试剂盒,并应用于临床打下了基础。
- 郭芳芳邹立林吴英松胡志明李金龙吕建新高基民
- 关键词：结核分枝杆菌时间分辨荧光分析法
