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Micro RNA profiles and potential regulatory pattern during the early stage of spermatogenesis in mice被引量：6: 2015年; Spermatogenesis is a complicated and poorly understood process that relies on the precise regulation of the self-renewal and differentiation of spermatogonia. In many organisms, micro RNAs(mi RNAs) are involved in multiple developmental processes as critical regulators of transcriptional and post-transcriptional gene silencing. This study investigated the expression pattern of mi RNAs in type B spermatogonia cells(BSc) and primary spermatocytes(PSc) of mice, using a high-throughput small RNA sequencing system. The results revealed that the expression levels of Let-7 family mi RNAs were remarkably high in both cell types. Furthermore, the expression levels of mi R-21, mi R-140-3p, mi R-103, mi R-30 a, mi R-101 b and mi R-99 b were decreased during the transformation from BSc to PSc. These mi RNAs target vital genes that participate in apoptosis, cell proliferation and differentiation, junction assembly and cell cycle regulation. These results highlight the indispensable role of mi RNAs in spermatogenesis.; LUO MengMengHAO LiLiHU FenDONG YaNanGOU LiXiaZHANG WenDianWANG XinZHAO YuHuiJIA MengChunHU SongNianZHANG XiuJun; 关键词：精子发生转录后基因沉默

高质量抗体揭示Rad1蛋白在细胞中新的潜在活动机理（英文）: 2016年; 一组在进化上(从酵母到人)保守的基因Rad9、Rad1和Hus1在细胞周期监控点调控和DNA损伤修复中发挥重要作用.这三个蛋白可以形成环形异源三聚体,即9-1-1蛋白复合体.9-1-1复合体被认为是Rad9、Rad1和Hus1行使功能的主要形式.到目前为止,没有一个好的抗Rad1的抗体,严重阻碍了对Rad1和9-1-1复合体的研究.在本研究中,我们成功地制备了一株小鼠抗Rad1蛋白的单克隆抗体.这个抗体能够有效地检测小鼠和人的内源Rad1蛋白,可以用于酶联免疫吸附、蛋白质免疫印迹、免疫共沉淀和免疫荧光等实验.利用该抗体,我们发现在DNA损伤剂羟基脲(HU)的诱导下,小鼠Rad1蛋白在Rad9+/+小鼠胚胎干细胞中表达明显增加,而在Rad9-/-的小鼠胚胎干细胞中没有观察到该现象,这表明Rad9对Rad1的蛋白表达有调控作用.此外,内源的Rad1蛋白主要分布在细胞质中,在HU处理后并没有迁移进入细胞核的现象,这与先前广泛被人们所接受的在DNA损伤压力下Rad1和Hus1能够迁移进入细胞核并与Rad9形成9-1-1蛋白复合体的说法相矛盾.综合看来,Rad1和9-1-1蛋白复合体的分子作用机制比预期的要复杂,我们成功制备的Rad1单克隆抗体将成为研究Rad1以及9-1-1蛋白复合体的强有力的工具.; 王海凤安莉莉孙爽陈川叶琛杭海英张秀军

人类组织中TRAF3IP3基因表达的检测及转染胚肾HEK293细胞后的亚细胞定位被引量：1: 2013年; 目的克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。方法采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾HEK 293细胞,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的亚细胞定位。结果实时定量PCR证实TRAF3IP3基因在被检测的11种组织中均有表达,其中在淋巴结、脾、骨髓、胃和睾丸中的表达水平较高;成功克隆了TRAF3IP3基因ORF区并构建成为荧光定位质粒,激光共聚焦显微镜观察证实TRAF3IP3蛋白主要定位于核膜,在核周呈颗粒状分布。结论 TRAF3IP3基因在淋巴细胞富集的器官呈高表达,可能参与免疫系统的发育、成熟及调控,其表达产物在细胞内主要定位于核膜及核周胞浆。; 王洋王沂余源刘青毛焕熊艳杰张秀军; 关键词：组织表达谱亚细胞定位

小鼠精子发生早期microRNA的表达谱和调控模式--miRNA在小鼠精子发生中的作用被引量：1: 2014年; 精子发生是一个依赖于精原干细胞自我更新和精原细胞分化的精确而又复杂的调控过程,目前对这一过程知之甚少.mi RNA作为转录和转录后基因沉默的关键调节子,参与很多生物的多种发育过程.本研究采用高通量小RNA测序系统研究了mi RNA在小鼠B型精原细胞(BSc)和初级精母细胞(PSc)中的表达谱.结果显示,在这2种细胞类型中let-7mi RNA家族的表达水平都相当高.并且在BSc向PSc的转化过程中,mi R-21,mi R-140-3p,mi R-103,mi R-30a,mi R-101b和mi R-99b的表达水平明显降低.这些mi RNA参与调控与细胞凋亡、细胞增殖和分化、连接组装和细胞周期调控相关的诸多基因的表达.上述结果表明,mi RNAs在精子发生过程中发挥着不可替代的作用.; 罗萌萌郝丽丽胡芬董亚楠苟丽霞张温典王鑫赵宇慧贾孟春胡松年张秀军; 关键词：精子发生转录后调控黏着斑细胞骨架 WNT信号通路

人类新基因TMEM174在肾癌组织中的表达及意义: 目的探讨新基因TMEM 174在恶性肾癌和癌旁肾组织及正常组织中的表达及其意义。方法利用RNA原位杂交组织芯片检测肾癌和癌旁组织及正常组织中新基因TMEM174在mRNA水平的表达,共检查208例标本,其中肾癌、肾炎...; 张秀军; 关键词：肾癌组织芯片; 文献传递

人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达被引量：1: 2013年; 目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot法鉴定TRAF3IP3基因的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,成功构建了TRAF3IP3真核表达质粒,荧光显微镜观察可见转染了重组质粒的HEK293细胞有绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot结果证实TRAF3IP3蛋白高水平表达。结论成功构建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表达质粒,为TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基础。; 王沂张秀军刘青余源慈雅丽王洋; 关键词：真核表达转染 HEK293细胞

精子发生过程中基因表达转录水平的调控被引量：8: 2011年; 哺乳动物精子发生于睾丸的生精小管,是一个高度复杂的细胞分裂和分化过程,涉及到错综复杂的基因表达调控过程,包括转录和转录后水平的调控,其中任何一个环节出错都可能导致雄性不育。因此,揭示精子发生过程中的分子调控机理,对发现新的男性避孕方法及治疗不育症有重要意义。文章重点综述了近年有关雄激素及其受体、雌激素及其受体、转录因子和染色质相关因子在精子发生转录水平调控的研究进展。; 张秀军刘美玲贾孟春; 关键词：精子发生转录调控转录因子

芒针针刺配合西药克龄蒙治疗卵巢早衰的临床观察被引量：14: 2015年; 目的分析芒针针刺配合西药克龄蒙治疗卵巢早衰的临床疗效。方法该院妇产科2004年6月—2014年7月所收治的96例卵巢早衰患者作为临床研究的对象,采用随机数字法将96例患者随机分为对照组和观察组二组,每组48例。观察组患者给予芒针针刺穴位配合西药克龄蒙治疗,对照组给予单纯西药克龄蒙治疗。分析治疗前后二组患者各项观察指标改善情况。结果经过6个月的治疗,对照组患者治疗有效率为66.7%,观察组患者治疗有效率为93.8%,观察组治疗效果明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);二组治疗后在子宫内膜厚度、阴道清洁度比较区分明显(P<0.05、P<0.01),差异有统计学意义。结论芒针针刺配合西药克龄蒙治疗卵巢早衰优于单纯西药疗法。; 董彩英姜学霞李秀梅张秀军; 关键词：卵巢早衰子宫内膜厚度阴道清洁度

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国家自然科学基金(81072093)

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