国家自然科学基金(20802057) 作品数:21 被引量:131 H指数:8 相关作者: 牛卫宁 钦传光 王莉衡 曹珊珊 左晓佳 更多>> 相关机构: 西北工业大学 西安文理学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省科技攻关计划 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 理学 环境科学与工程 更多>>
氨基树脂固定化S-腺苷蛋氨酸(SAM)合成酶制备sAM及光亲和标记探针 S-腺苷蛋氨酸(SAM)是生物体内核酸和蛋白质甲基化的甲基供体,被广泛地用于肝炎、抑郁症以及关节炎等疾病的治疗。酵母发酵法是目前工业化生产SAM的主要途径,但存在底物转化率低、生产周期长、纯化工艺复杂等问题;体外酶促转化... 牛卫宁 曹珊珊 羊梦林 许乐 钦传光关键词:氨基树脂 重组大肠杆菌 文献传递 聚乙二醇对溶菌酶热变性过程影响的DSC研究 2010年 以聚乙二醇(PEG)作为拥挤试剂,研究了其对溶菌酶热变性过程的影响。采用差示扫描量热法测定溶菌酶在不同实验条件下的热变性曲线,分析变性温度Tm与变性焓ΔH的变化。结果表明,变性温度Tm随着PEG质量浓度的增加而降低,且基本呈线性关系;在同一质量浓度下,Tm与PEG的分子质量成正比关系。整个实验中变性焓ΔH基本为一定值,维持在(515.95±28.75)kJ.mol-1之间。添加聚乙二醇作为拥挤试剂,可影响溶菌酶热变性过程。 王莉衡 钦传光关键词:溶菌酶 聚乙二醇 热变性 DSC 基于偶氮苯光开关的分子元器件设计与合成 分子元器件是以分子开关为基础的一个分子系统,当这个系统受到外部刺激(如光)时,其会出现机械运动,导致开关的构象和环境发生变化.作为元器件的分子基本条件是存在两种不同且稳定的异构形式,当有外界刺激时会相互转化.设计分子开关... 钦传光关键词:偶氮苯 分子开关 分子器件 关于开发能源植物问题的思考 被引量:2 2010年 伴随着能源危机和环境污染的日益严重,能源植物以其安全、环保、可再生和低成本性等特点应运而生,它是解决全球能源危机和环境污染的有效手段。简要论述了能源植物的概念、特点、开发利用现状及几种适用于生物能源开发的植物种类。 王莉衡关键词:能源植物 能源危机 生物能源 紫色杆菌素类似物的全固相合成方法及其抗真菌活性研究 脂肪酰环酯肽类化合物在自然界中普遍存在,尤其广泛存在于各类微生物的次生代谢产物中.天然脂肪酰环酯肽类化合物大多具有广泛的生物活性、独特的结构和作用机制,为药物设计提供了可贵的分子模型,为药物的研究开发提供了重要的先导化合... 刘慧芳 殷明志 连博 申媛媛 钦传光关键词:固相合成 固定化E.Coli JM109(pBR322-MAT)细胞催化合成S-腺苷蛋氨酸 被引量:9 2009年 通过PCR从大肠杆菌(E.Coli-K12)基因组DNA中扩增出甲硫氨酸腺苷转移酶(MAT)基因,构建了能高效表达MAT的重组大肠杆菌E.ColiJM109(pBR322-MAT)。选择海藻酸钙(CA)凝胶包埋固定化重组大肠杆菌,研究发现最佳ρ(CA)为20g/L的水溶液,最适细胞包埋量为0.15 g(湿细胞)/mL(凝胶),连续反应5批次后固定化细胞酶活力为初始最高酶活力的91%。对于固定化细胞催化合成SAM,在最佳条件下底物ATP的转化率超过95%。 牛卫宁 左晓佳 尚晓娅 丁焰 钦传光关键词:固定化细胞 S-腺苷蛋氨酸 重组细胞 全细胞催化 基于偶氮苯光开关的分子元器件设计与合成 分子元器件是以分子开关为基础的一个分子系统,当这个系统受到外部刺激(如光)时,其会出现机械运动,导致开关的构象和环境发生变化.作为元器件的分子基本条件是存在两种不同且稳定的异构形式,当有外界刺激时会相互转化.设计分子开关... 钦传光关键词:偶氮苯 分子开关 分子器件 S-腺苷甲硫氨酸合成酶的组成型表达、产物纯化及鉴定 被引量:6 2010年 将大肠杆菌(E.coliK12)S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)基因克隆至质粒pBR322中,获得的重组质粒pBR322-SAMS转入大肠杆菌JM109菌株,构建了能高效组成型表达SAMS的重组菌E.coliJM109(pBR322-SAMS)。将重组大肠杆菌破碎后上清液经20%~40%硫酸铵分级盐析、Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水层析和Q-Sepharose Fast Flow离子交换层析,即可得到纯度提高5倍,比活为48.7μ/mg的SAMS,三步纯化的总回收率为62%,纯度达到92%。SAMS表达量为1176μ/L,占到菌体可溶性总蛋白的20%。重组酶的最适反应pH为8.5,4℃下在pH7.5的缓冲液中保温10h酶活性几乎不改变。重组酶反应的最适温度为55℃,酶活性稳定的温度范围为20~35℃。重组酶的KmL-Met为0.22mmol/L,VmaxL-Met为1.07mmol/(L.h),KmATP为0.52mmol/L,VmaxATP为1.05mmol/(L.h)。 田林奇 牛卫宁 左晓佳 钦传光关键词:S-腺苷甲硫氨酸合成酶 大肠杆菌 组成型表达 纯化 酶学性质 植物内生菌的研究进展 被引量:23 2011年 植物内生菌是一种新型的微生物资源,具有重大的研究意义和潜在的应用价值,近年来成为微生物资源研究的热点之一。对植物内生菌的研究进展和生物学作用进行了综述,以期更好地了解和研究植物内生菌。 王莉衡关键词:植物 内生菌 生物多样性 人胱硫醚β合酶I278T突变体的表达、纯化及鉴定 2014年 目的探讨在大肠埃希菌中重组表达和纯化人胱硫醚β合酶CBS(I278T)突变体。方法采用重叠延伸聚合酶链反应(PCR)定点突变技术构建突变质粒pGEX4T-1-CBS(I278T),在含有3%乙醇的培养基中诱导表达,亲和层析纯化得到突变CBS(I278T)蛋白,测定纯化蛋白的活性、紫外可见吸收光谱、蛋白粒径及Zeta电位。结果成功构建了质粒pGEX4T-1-CBS(I278T)。CBS(I278T)蛋白产率、比活性及酶活性回收率分别为2.3mg/L、21.4U/mg、22.6%。终浓度为1mmol/L的S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet)对突变CBS(I278T)蛋白没有激活作用。紫外可见吸收光谱分析显示纯化的突变CBS(I278T)存在429nm和550nm的血红素结合蛋白特征吸收峰。蛋白平均粒径为7.5~10.1nm,主要以四聚体形式存在,Zeta电位为-16.3mV。结论成功建立了在大肠埃希菌中表达、纯化及鉴定突变CBS(I278T)的方法。 牛卫宁 许乐 羊梦林 曹珊珊关键词:胱硫醚Β合酶 突变 粒径 ZETA电位