国家质检总局科技计划项目(2011IK02)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：汪琳张灿赵胤泽邢佑尚栢亚铎更多>>
- 相关机构：北京出入境检验检疫局沈阳农业大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 非洲马瘟病毒、西尼罗病毒和马冠状病毒的基因芯片检测技术研究被引量：4
- 2012年
- 为探索建立马病病毒基因芯片检测方法,采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(ASHV)核酸序列,通过分子克隆技术获得西尼罗病毒(WNV)和马冠状病毒(ECV)的特异基因片段。用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻片上,制备成检测芯片。以拼接、克隆的核酸序列为模板通过多重不对称RT-PCR进行特异性扩增和荧光标记后滴加到芯片上进行杂交,对杂交结果进行扫描检测和计算机软件分析。结果显示,制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述3种病毒,ECV质粒样品、WNV质粒样品检测灵敏度为102拷贝;AHSV质粒样品检测灵敏度为104拷贝。其他病毒材料未出现荧光信号,验证了本方法的特异性。证明基因芯片技术可快速、准确和灵敏地同时进行多种病毒的检测。
- 赵胤泽汪琳邢佑尚张灿
- 关键词：非洲马瘟病毒基因芯片
- 禽流感免疫噬菌体抗体库构建及ELISA检测方法的建立
- 2012年
- 本研究应用噬菌体抗体库技术筛选禽流感亚型病毒Fab抗体,并建立相应ELISA检测方法。用禽流感亚型混合疫苗免疫小鼠,取其脾脏提取总RNA用于扩增免疫球蛋白轻链和重链基因,克隆至噬菌粒pComb3,然后转化入感受态细胞XL1-Blue中,以1012 CFU辅助噬菌体VCSM13进行感染后,获得Fab抗体库容量为8×107 CFU。以H5N1病毒为抗原进行4轮亲和筛选,获得特异性结合的克隆,利用获得的特异性克隆进行ELISA检测方法的建立。
- 邢佑尚汪琳张灿赵胤泽栢亚铎吴亚琼李玉欣
- 关键词：禽流感病毒噬菌体抗体库
