国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-20-4-4)
- 作品数:34 被引量:172H指数:7
- 相关作者:陈由强叶冰莹薛婷张积森何文锦更多>>
- 相关机构:福建师范大学中华人民共和国农业部教育部更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 产肌醇酿酒酵母基因工程菌的构建被引量:4
- 2016年
- 【目的】过表达酿酒酵母肌醇合成关键酶基因INO1,促进肌醇合成,构建能够分泌肌醇的基因工程菌株。【方法】构建r DNA介导的INO1基因多拷贝整合表达载体p URIH,电转化酿酒酵母Y01菌株,构建工程菌株YI2-1和YI2-2,荧光定量PCR方法分析INO1基因表达量。敲除Kan MX抗性基因,HPLC检测重组菌发酵液中肌醇含量。【结果】获得INO1基因过表达菌株YI2-1和YI2-2,YI2-1的INO1基因表达量是出发菌Y01的16.235倍。敲除Kan MX抗性基因的菌株命名为YI2-1△KP,初步检测YI2-1△KP产肌醇量为627 mg/L。【结论】r DNA介导的INO1基因多拷贝整合表达载体p URIH能够有效地过表达目的基因;过表达菌株合成的肌醇不仅能满足自身的需要,而且能够向胞外分泌,具有潜在的工业应用价值。
- 黄贞杰陈由强陈丽霞陈淑增王容贞陈文标
- 关键词:肌醇过表达SC基因工程菌酿酒酵母
- 固定化酵母R36酒精发酵工艺研究被引量:2
- 2013年
- 对固定化酵母酒精发酵工艺进行研究,结果表明,最佳发酵条件为初始糖度28°Bx,固定化酵母接种量15mL,发酵温度36℃。在此条件下发酵52h发酵醪酒精度达到12.8%vol,糖的利用率90.27%,发酵效率达到86.7%。
- 叶世超薛婷何文锦叶冰莹许旭萍包伟霞陈由强
- 关键词:固定化酵母酒精发酵工艺
- 甘蔗不同组织丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因家族的表达分析被引量:1
- 2013年
- 本研究通过光合参数和荧光定量PCR的测定来分析甘蔗不同组织丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因家族的表达。研究结果表明,乙烯利对九月龄甘蔗光合作用影响不大,对光合产物的积累和转化,糖代谢的信号调控的影响微弱;通过分析STK基因家族在甘蔗各组织中的组织表达差异时发现,多数基因是在鞘和嫩叶、嫩茎中表达量较高,且STK2、STK7在茎中表达量高,STK3在老叶中表达量高,STK5的嫩叶表达量高。
- 叶冰莹薛婷陈玲张积森陈由强
- 关键词:甘蔗蛋白激酶光合作用荧光定量PCR
- 微生物法生产肌醇研究进展被引量:11
- 2015年
- 肌醇是一种具有旋光性及生物活性的环状糖醇,具有许多重要的生理活性,广泛应用于医药、食品及饲料等行业。利用微生物法生产肌醇具有很好的应用前景。文中介绍了肌醇的功能,综述了肌醇的微生物酶解法和发酵法生产的研究进展,并对其前景进行了展望。
- 黄贞杰陈由强
- 关键词:肌醇发酵酿酒酵母
- 分子生物学实验教学改革与实践
- 2015年
- 分子生物学是一门实践性和创新性很强的学科。本文根据分子生物学实验的特点,对教学内容、教学模式、开设综合创新性实验及考核方式等方面进行了探索与改革,旨在提高分子生物学实验教学质量,强化学生实验技能、分析问题和独立解决问题的能力。
- 薛婷陈由强
- 关键词:分子生物学实验教学改革
- 一株纤维素降解真菌的筛选及鉴定被引量:33
- 2013年
- 【目的】分离筛选高效降解纤维素的真菌菌株,并研究其产酶能力。【方法】利用刚果红染色法从甘蔗地土壤中分离纤维素降解真菌,再通过测定滤纸的降解率及发酵酶活复筛。【结果】综合考虑水解圈,水解圈和菌株直径的比值(HC值),滤纸的降解率和复筛酶活,对试验真菌降解纤维素的能力进行综合评价,筛选到具有较强纤维素降解能力的真菌菌株SJ1,经形态学观察及分子生物学鉴定,该菌属于草酸青霉。其滤纸酶活、内切葡聚糖酶酶活(CMC酶活)、β-葡聚糖苷酶酶活和外切葡聚糖酶酶活(CBH酶活)分别为25.15、740.42、58.03和2.442 U/mL。【结论】菌株SJ1是一株十分具有研究开发潜力的纤维素酶生产菌株。
- 许玉林郑月霞叶冰莹张积森陈由强
- ScINO1基因克隆及酵母多基因多拷贝整合表达载体的构建被引量:6
- 2012年
- 利用PCR技术,以酿酒酵母S288c的基因组DNA为模板,扩增酿酒酵母肌醇-1-磷酸合成酶基因(ScINO1)包含1 602bp的开放读码框,克隆后经PCR和酶切反应进行了鉴定,测序结果与GenBank上已登录的ScINO1序列完全一致.对PUG6载体进行改造,构建了rDNA介导的多拷贝整合表达载体pURH,并将ScINO1基因连入载体pURH,获得ScINO1基因超表达载体pURIH.为下一步的微生物发酵法产肌醇和获得能够耐高乙醇的酵母工程菌株的研究奠定基础.
- 黄贞杰陈玲张积森叶冰莹陈由强陈如凯
- 关键词:多拷贝整合酿酒酵母
- 高温大曲中产耐热性蛋白酶芽孢杆菌的筛选和鉴定被引量:22
- 2012年
- 从高温大曲样品中通过分离纯化,在牛奶琼脂平板上初筛得到产耐热性蛋白酶的菌株,然后液体发酵培养测定蛋白酶酶活挑选出产酶较强的菌株A1。在经过菌株形态特征、生化鉴定、16SrDNA分子生物学鉴定为芽孢杆菌属苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。选择三个主要影响因子葡萄糖、酵母浸出粉和pH,运用响应面法优化发酵培养基,最佳产酶培养基为pH为8.4,葡萄糖添加量为1.092%,酵母浸出粉添加量为0.902%,最佳酶活力为142.81u/mL。测定蛋白酶酶作用的最适温度是61℃,且在55~70℃之间有较高的酶活力,60℃相对酶活为97.63%。
- 马校卫颜林春汤二将龚丽琼黄祖新
- 关键词:高温大曲苏云金芽孢杆菌蛋白酶响应面法
- 甘蔗丝氨酸/苏氨酸激酶基因的克隆及序列分析被引量:1
- 2012年
- 以福农28甘蔗品种为实验材料,电子克隆设计引物,克隆得到了甘蔗丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,STK)基因的cDNA片段。采用RACE技术克隆获得了甘蔗叶STK基因cDNA的5'及3'端序列,长度分别为750和1000bp。5'、3'端序列与中间片段重叠延伸后总片段长为1133 bp,其中5'UTR为54 bp,3'UTR为254 bp,包含完整的ORF为825 bp,共编码274个氨基酸。开放阅读框架查询器(Open Reading Frame Finder)确定其为丝氨酸/苏氨酸激酶,通过预测(//cn.expasy.org/tools)该蛋白质分子质量为29.9052 ku,理论等电点为6.36。将其基因序列与NCBI中其他植物的STK进行比对,与高粱、玉米、水稻、短柄草和大麦的相似性分别为97%、94%、89%、89%和88%。
- 陈玲叶冰莹黄贞杰张积森陈由强陈如凯
- 关键词:甘蔗丝氨酸苏氨酸激酶电子克隆
- 甘蔗SPS基因家族成员表达与糖分积累关系解析被引量:5
- 2014年
- 以甘蔗高糖品种福农95-1702和低糖品种ROC-5为材料,分析SPS I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ在高、低糖这两个品种的幼叶、第三功能叶和不同蔗茎的表达,测定甘蔗糖分积累早期、中期和后期的糖分含量。结果显示,在功能叶和茎第二节中,三个阶段SPS家族成员在高糖品种的含量整体趋势高于低糖品种,结合蔗糖积累特点分析表明其可能在蔗糖合成中扮演着重要的角色。与正三叶相反,在幼叶中,三个阶段SPS家族成员在高糖品种的表达量整体趋势低于低糖品种,表明其可能与嫩叶的生长等其他生理性状相关,在成熟茎中,随着蔗糖积累时间的增加,高糖品种中的优势表达基因减少,而低糖品种中的优势表达基因增加,这可能与低糖品种中、后期大量积累蔗糖相关。
- 陈兰平陈由强方静平宋喜梅叶冰莹陈如凯张积森
- 关键词:甘蔗蔗糖磷酸合成酶家族成员基因表达实时荧光PCR