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利用修饰的T7 RNA聚合酶基因建立一种植物耦联表达系统被引量：2: 2002年; 通过基因修饰,在T7 RNA聚合酶基因的5＇端添加了SV40大T抗原的核定位信号编码序列.利用CaMV35S启动子和修饰的T7 RNA聚合酶基因构建了植物表达载体pBBT7.同时,利用T7启动子和β-葡糖醛酸酶基因（gusA）构建了另一个植物表达裁体pBTG.通过农杆菌介导法将上述两个植物表达载体共转化烟草,共转化植株表现出较强的β-葡糖醛酸酶（β-glucuronidase,GUS）活性.上述结果表明T7 RNA聚合酶-T7启动子耦联表达系统在植物中是有效的,说明已成功构建了一种植物耦联表达系统.; 陈峰路子显常团结徐鸿林吴茜肖桂芳朱祯; 关键词：基因修饰核定位信号 T7启动子基因表达植物基因工程

一种简单有效的T7 RNA聚合酶调控的植物基因表达系统被引量：6: 2002年; T7 RNA聚合酶在原核系统的基因表达与调控中起重要作用。将T7 RNA聚合酶基因的5’端与来自SV40大T抗原基因的核定位信号编码序列融合在一起,利用rolC启动子控制修饰的T7 RNA聚合酶基因,与Φ10启动子控制的β-葡萄糖醛酸酶基因串联在一起,构建了植物表达载体,通过基因枪介导法转化了烟草叶片。结果表明,这一表达系统能够增加β-葡萄糖醛酸酶基因的瞬时表达,这为提高外源基因在转基因植物中的高效表达提供了新的工具。; 路子显魏晓丽伍晓丽常团结朱祯; 关键词：T7 基因调控

植物碱性亮氨酸拉链(bZIP)蛋白的研究进展(二)——DNA结合特性、基因表达、功能及应用被引量：8: 2002年; 植物碱性亮氨酸拉链 (bZIP)蛋白在高等植物基因表达与调控中起重要作用。本文介绍了植物bZIP蛋白与DNA结合特性 ,探讨了它们的基因表达和功能。; 路子显常团结刘翔朱祯; 关键词：BZIP DNA结合基因表达植物

有效去除农杆菌和籼稻转化系统优化被引量：19: 2003年; 为了提高根农杆菌籼稻转化效率 ,将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck和潮霉素磷酸转移酶基因hpt分别置于紧密相连的 2个T -DNA上 ,构建载体 pCDMARUSCK -HPT ,电激法将表达载体转化农杆菌LBA4 40 4获得工程菌。比较了提门叮和国产噻孢霉素对工程菌LBA4 40 4的抑制效果 ,试验得出提门叮在 5 0 0mg/L以内比噻孢霉素能更有效地去除水稻细胞中的农杆菌 ,而且低浓度条件下 (2 5 0mg/L)就能有效地抑制工程菌LBA4 40 4 ,并且有利于水稻转化细胞成功地再生植株。确立了工程菌LBA4 40 4菌液浓度OD值 0 8,浸染时间 5min为明恢 86合适的转化参数。在此基础上 ,采用优化的农杆菌介导法转化杂交籼稻优良恢复系明恢 86 ,获得转基因植株 12 7个克隆 ,转化效率 4 5 %。; 曾千春李旭刚马炳田陈松彪徐鸿林孟昆魏晓丽朱祯; 关键词：籼稻农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因

菊芋类金属硫蛋白基因htMT2的克隆及其表达特征分析(英文)被引量：3: 2002年; 从菊芋 (HelianthustuberosusL .)块茎cDNA文库中得到了一个新的植物类金属硫蛋白基因htMT2的cDNA序列 ,全长 5 0 9bp ,包括 2 4 0bp的开放阅读框、6 2bp的 5′端非翻译区、2 0 7bp的 3′端非翻译区。通过PCR获得了 2个htMT2编码区的部分基因组片段htMTG_1及htMTG_2 ,长度分别为 986bp和 982bp。分析表明两个基因组片段均包含 3个外显子及 2个内含子 ,编码一个由 79个氨基酸残基组成的多肽 ,与从htMT2推测的多肽完全一致 ,该多肽具有植物类金属硫蛋白的典型结构特征 ,N端及C端结构域富含Cys ,分别具有 8个和 7个Cys残基 ,上述两个结构域被一个无Cys的中间区分开。Southern杂交结果表明 ,htMT2在菊芋基因组中以小基因家族的形式存在。Northern杂交结果表明htMT2在叶片、叶柄、茎及块茎中均有表达 ,在茎中有较高水平的表达 ,但在根中未检测到杂交信号。经Cu2 + 处理后 ,htMT2在茎中的表达量显著降低。与其他 2型金属硫蛋白的序列同源性比较及htMT2对金属离子处理的反应均表明 ,htMT2是一种新的植物类金属硫蛋白基因。; 常团结陈蕾路子显陈宛新刘翔朱祯; 关键词：菊芋克隆 CDNA序列基因表达内含子

Establishment of a coupled expression system mediated by modified T7 RNA poly-merase gene被引量：1: 2002年; A coupled expression system for plants was established in this study. The 5’-terminal of T7 RNA poly-merase gene was modified by addition of the coding sequence of nuclear location signal from SV40 large T antigen. Plant expression vector pBBT7 was constructed with the modified T7 RNA polymerase gene under the control of CaMV35S promoter. Another expression vector pBTG contained cassette of gusA controlled by T7 promoter. The two vectors were co-transformed into tobacco via the Agrobecte-rium -mediated method. Results of GUS activity indicated that the co-transformed plant with pBBT7 and pBTG showed a high level of GUS activity. The results demonstrated that the coupled expression system of T7 polymerase and T7 promoter was workable in plants.; Feng ChenZixian LuTuanjie ChangHonglin XuQian WuGuifang XiaoZhen Zhu; 关键词：MODIFIED T7 RNA POLYMERASE GENE T7 GUS

植物碱性亮氨酸拉链(bZIP)蛋白的研究进展(一)——结构、分类、分布和同源性分析被引量：40: 2001年; 植物碱性亮氨酸拉链 (bZIP)蛋白在高等植物中广泛存在 ,对基因表达与调控起重要作用。本文简要介绍了植物bZIP蛋白的结构之后 ,概述了植物bZIP蛋白的分类和分布。最后 ,以模式植物、主要农作物及蔬菜等为例 ,对它们的同源性进行了详细的描述和分析。; 路子显常团结刘翔朱祯; 关键词：同源性分析植物

水稻EPSP合酶cDNA克隆、序列分析及其拷贝数测定(英文)被引量：2: 2002年; 根据本室分离的水稻EPSP合酶基因的基因组序列设计一对引物 ,利用RT_PCR方法首次从水稻 (Oryzasati vaL .subsp .indica)叶片的RNA中扩增获得了水稻编码EPSP合酶的全长为 15 85bp的cDNA片段 ,它含有一个完整的开放读码框 ,编码 5 11个氨基酸 ,包括 44 4个氨基酸组成的成熟肽序列以及N端的 6 7个氨基酸组成的叶绿体转运肽序列。成熟肽氨基酸序列对比表明 ,除真菌来源的EPSP合酶变异较大外 ,其他来源的EPSP合酶同源性较高 ,均在 5 1%以上。而叶绿体转运肽氨基酸序列同源性较低。Southern杂交表明水稻EPSP合酶基因在水稻基因组中以单拷贝形式存在。RT_PCR分析表明 ,水稻EPSP合酶基因在根、未成熟种子和叶片中均有转录表达。; 徐军望魏晓丽李旭刚陈蕾冯德江朱祯; 关键词：水稻 EPSP合酶 CDNA序列拷贝数

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国家自然科学基金(39880023)