湖北省科技攻关计划(2007AA301B44)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 相关作者：周建华郝燕陈美江警予朱国琴更多>>
- 相关机构：华中科技大学武汉市中心医院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多球壳菌素诱导系膜细胞凋亡及对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响被引量：7
- 2008年
- 目的观察多球壳菌素(ISP-1)对体外培养的正常大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的促凋亡作用,研究ISP-1对细胞周期调节蛋白基因表达谱和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法体外培养大鼠GMC,加入100μmol/L ISP-1干预,分别于作用6、12、24、48 h后以流式细胞术检测GMC凋亡,Hoechst33258/PI染色观察凋亡细胞形态变化,琼脂糖DNA凝胶电泳法观察凋亡细胞核小体DNA的断裂现象,并通过SuperArray Real-Time PCR细胞周期基因芯片测定ISP-1对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响,Western blotting法观察Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果ISP-1可显著诱导GMC凋亡,并呈一定的时间依赖性,作用48 h后细胞凋亡最显著,Hoechst33258/PI荧光染色法可见亮蓝色的凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡梯度的出现;PCR细胞周期基因芯片检测结果发现ISP-1可显著上调GMC Rad51、Atm、Brcal、Caspase3、cyclinA2、cyclinC、chek1、cyclinB1、cyclinB2、cyclinD2、cyclinF、Cdc25a和P27等一些与DNA损伤、凋亡和细胞周期调节蛋白相关的基因的表达;Western blotting发现ISP-1可显著上调GMC Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。结论ISP-1可时间依赖性诱导体外培养的正常大鼠GMC凋亡,其机制与影响细胞周期调节蛋白及凋亡相关基因的表达有关。
- 陈美江警予郝燕周建华
- 关键词：凋亡细胞周期调节蛋白
- FTY720对肾大部切除大鼠肾小球硬化及细胞周期调节蛋白表达的影响
- 2007年
- 目的观察 FTY720对肾大部切除大鼠肾小球硬化的作用,探讨其作用机制。方法采用。肾大部切除制作肾小球硬化模型,分模型组和 FTY720治疗组,设假手术组为正常对照组,每组8只。检测各组术前及术后第2、4、8、12周大鼠24h 尿蛋白,术前及术后8周、12周检测血尿素氮和肌酐以及残肾组织病理改变,并应用免疫组化方法检测Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)的表达水平及细胞周期调控蛋白 p21、p27、细胞周期素 E(cyelinE,CE)的表达。结果模型组术后2周24h尿蛋白升高至(8.07±1.61)mg/d,以后逐渐增高,12周达(28.6±12.21)mg/d,治疗组24h 尿蛋白量在术后4周为(9.90±1.49)mg/d,12周时为(11.35±2.09)mg/d,较模型组减低(P<0.01)。与假手术组相比,模型组8周血肌酐升高达(61.08±4.28)μmol/L,12周时为(130.20±23.90)μ5mol/L,升高更明显(P<0.05);治疗组血肌酐则未见明显升高,12周时为(80.19±7.11)μmol/L,较模型组显著减低(P<0.05);各组血尿素氮与肌酐变化相似。肾脏病理和免疫组化染色显示,FTY720能明显减轻大鼠硬化程度,抑制肾小球内细胞外基质 Col-Ⅳ、FN 的表达。细胞周期调控蛋白研究结果表明 FTY720能升高肾小球 p27表达,降低 p21及 CE 表达。治疗组 p21和 CE 表达明显低于模型组,但仍稍高于假手术组,p27明显高于模型组,与正常组无明显区别。结论 FTY720能显著降低肾大部切除大鼠的24 h 尿蛋白量,防止。肾小球硬化,其作用与调控细胞周期调节蛋白的表达,减少Col-Ⅳ、FN 聚积有关。
- 朱国琴周建华谢敏郝燕
- 关键词：肾小球硬化症病灶性
