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上海市普陀区卫生系统自主创新科研基金(PTKW09-B02)
作品数:
3
被引量:13
H指数:3
相关作者:
王旋
李冬
万海英
杨凡
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李冬
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姜翠敏
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1篇
2013
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阻断巨噬细胞NFκB-p65通路对香烟促进非小细胞肺癌NCI-H520细胞株增殖的影响
被引量:3
2012年
研究香烟对非小细胞性肺癌(NSCLC)NCI-H520细胞株增殖的影响以及巨噬细胞在此过程中的作用。方法 采用“Transwell? Inserts”细胞培养室培养系统共培养人原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的人单核巨噬细胞株U937细胞和NCI-H520细胞。应用免疫印迹法和凝胶电泳迁移实验检测NF?B通路的激活;应用NF?B -p65 shRNA干扰质粒抑制U937细胞p65 表达;利用BrdU ELISA分析香烟抽提物(CSE)对NCI-H520细胞的促增殖效应;ELISA分析炎症细胞因子TNF?和IL-6的释放。结果 共培养及香烟刺激增强了人巨噬细胞的NF?B -p65的入核,以及同靶基因结合的活力。与对照组相比, NCI-H520细胞经不同浓度CSE单独处理,并没有发现肺癌细胞增殖明显加快(p〉0.05);而经过与人原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的U937细胞共培养4天,不仅发现巨噬细胞明显促进NCI-H520细胞的增殖(p〈0.01),而且观察到CSE的刺激显著增强这一效应(p〈0.01)。NF?B -p65shRNA干扰质粒明显抑制了U937细胞的NF?B -p65表达,抑制了NF?B通路的激活,减弱了CSE对NCI-H520细胞增殖的影响(p〈0.01),同时也抑制了炎性因子IL-6和TNF?释放(p〈0.01)。结论 香烟通过巨噬细胞的中介促进NCI-H520细胞的增殖。采用RNA干扰技术阻断巨噬细胞的NF?B通路显著地抑制香烟促进的肺癌细胞的增殖,削弱香烟引起的巨噬细胞的炎症因子释放可能是其作用机制。
李冬
王旋
周宏
万海英
关键词:
巨噬细胞
NF-ΚB
抗菌肽LL-37在巨噬细胞促卵巢癌细胞增殖中的作用
被引量:8
2013年
目的研究抗菌肽LL-37在巨噬细胞促进卵巢癌细胞增殖中的重要作用。方法采用Transwell插入式细胞培养皿共培养人巨噬细胞和卵巢癌细胞株SKOV3、3AO和HO-8910。采用溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)-酶联免疫吸附试验(ELISA)法和细胞计数法检测巨噬细胞对卵巢癌细胞增殖能力的影响。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blot法检测巨噬细胞和SKOV3细胞中LL.37mRNA和蛋白的表达。应用LL-37中和抗体抑制LL-37的功能活性,观察LL-37在巨噬细胞促进卵巢癌细胞增殖中的作用e结果细胞计数法检测结果显示,SKOV3细胞与巨噬细胞以1:0.5的比例共培养4d后,SKOV3细胞的数量从(6.0±0.5)×10^4个增加为(11.8±1.3)×10^4个,差异有统计学意义(P〈0.05),并且随着共培养的巨噬细胞比例的增加,SKOV3细胞的数量也随之升高(P〈0.05)。与巨噬细胞共培养后,3AO和HO-8910细胞的数量变化趋势与SKOV3细胞相似。BrdU—ELISA法检测的结果与细胞计数法一致。RT-PCR和Westem blot法检测结果显示,在与卵巢癌SKOV3细胞共培养后,巨噬细胞中LL-37 mRNA和蛋白的表达均上调,且随着时间的延长其表达增加,但其在SKOV3细胞中的表达并未增强。BrdU—ELISA法检测的结果显示,经LL-37处理后,HO-8910和3AO细胞的增殖能力明显增加;但加入LL-37中和抗体后,可明显抑制巨噬细胞对SKOV3、3AO和HO-8910细胞的增殖促进作用,这3株细胞的吸光度分别从2.95±0.11降至1.45±0.04,3.39±0.36降至1.32±0.09,3.93±0.17降至1.68±0.23(均P〈0.05)。结论在与卵巢癌细胞相互作用的条件下,巨噬细胞通过增强抗菌肽LL-37的表达和分泌促进了卵巢癌细胞的增殖。LL-37在巨噬细胞促进卵巢癌的发展中扮演重要角色。
李冬
王旋
戴燕
杨凡
万海英
关键词:
LL-37
巨噬细胞
卵巢肿瘤
肿瘤细胞系
细胞增殖
尿多酸肽对人非小细胞肺癌细胞生长与凋亡的影响
被引量:3
2012年
目的:初步探讨尿多酸肽(CDA-2)体外诱导非小细胞肺癌细胞凋亡作用及其可能的分子机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)试验检测CDA-2对正常人呼吸道上皮细胞HBE细胞及肺癌细胞系A549和H157细胞增殖的抑制效应;采用流式细胞仪检测细胞凋亡;采用Western印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达。结果:CDA-2显著抑制A549和H157细胞增殖,且具有浓度依赖性,其对正常人呼吸道上皮HBE细胞无影响。流式细胞DNA分布宽度检测显示,CDA-2处理组A549细胞亚G1期凋亡峰明显高于对照组(P<0.01);而HBE细胞给药前后比较无统计学意义(P>0.05);流式细胞仪An-nexinV和PI检测结果显示,CDA-2处理组A549细胞凋亡率和死亡率均明显高于对照组(P<0.01),而HBE细胞给药前后比较无统计学意义(P>0.05)。Western印迹分析显示,CDA-2处理组A549细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达强而快速的下调而促凋亡蛋白Bax表达显著上调,Bcl-2/Bax蛋白比率下降。结论:CDA-2可抑制非小细胞肺癌A549和H157细胞增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能是改变Bcl-2/Bax比率,通过线粒体途径诱导肺癌细胞凋亡。
王旋
李冬
姜翠敏
关键词:
尿多酸肽
非小细胞肺癌
凋亡
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