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T细胞的扩增及其信号转导分子ZAP-70的检测: 2010年; 目的检测γδT细胞信号转导分子ζ链相关蛋白-70（ζ-chainassociated protein70，ZAP．70）。方法分离获取健康人PBMC，用结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb．Ag）刺激PBMC，通过流式细胞仪检测总T细胞和丫6T细胞CD69分子的动态表达；Mtb-Ag活化俩T细胞增殖培养，10d后收集细胞，用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδT细胞；westernblot方法检测γδT细胞内的ZAP．70分子。结果总T细胞和γδT细胞均在活化刺激24h时表达CD69分子达高峰，但总T细胞仅为16％，γδT细胞可达75．2％；新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4．9％，Mtb-Ag刺激培养10d后升为69．2％，免疫磁珠阳性分选后达99-3％；检测到Y6T细胞内的ZAP-70分子。结论Mtb-Ag可特异性激活俩T细胞，用Mtb-Ag刺激γδT细胞活化增殖培养，可获得大量的γδT细胞；成功地检测到细胞内ZAP-70分子，这为Y6T细胞内其它分子的检测分析奠定方法学基础，也为进一步检测γδT细胞活化信号转导过程中ZAP-70分子的激活及作用奠定基础。; 孙文化彭亮王宏侯彦强; 关键词：ΓΔT细胞 ZAP-70

细胞外基质蛋白1基因及蛋白在乳腺癌组织中的表达及其意义: 2010年; 目的在基因和蛋白水平探讨细胞外基质蛋白1(ECM1)在乳腺癌中的表达及意义,并比较两种检测方法的应用价值。方法应用实时荧光定量PCR基因检测方法和免疫组织化学法分别检测乳腺组织(正常组织和癌组织)中ECM1基因(mRNA)和蛋白的表达,并比较正常乳腺组织和乳腺癌组织之间的ECM1表达差异。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析评估应用价值。结果乳腺癌组织中ECM1在基因和蛋白水平表达均明显高于正常组织(P<0.01),两者均有较好的诊断价值[实时荧光定量PCR基因检测曲线下面积(AUC)为0.834±0.038,免疫组织化学检测AUC为0.773±0.048]。结论 ECM1在乳腺癌组织中过表达,具有潜在的作为乳腺癌肿瘤标记物的应用价值。; 侯彦强李梅彭亮曹辉王宏孙文化; 关键词：乳腺肿瘤细胞外基质蛋白质类聚合酶链反应

T细胞的扩增及其信号转导分子ZAP-70的检测: 2010年; 目的检测Y6T细胞信号转导分子ξ链相关蛋白-70（ξ-chain associated protein70，ZAP-70）。方法分离获取健康人PBMC，用结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb-Ag）刺激PBMC，通过流式细胞仪检测总T细胞和Y6T细胞CD69分子的动态表达；Mtb-Ag活化γδT细胞增殖培养，10d后收集细胞，用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδT细胞；western blot方法检测俩T细胞内的ZAP-70分子。结果总T细胞和γδT细胞均在活化刺激24h时表达CD69分子达高峰，但总T细胞仅为16％，γδT细胞可达75．2％；新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4．9％，Mtb-Ag刺激培养10d后升为69．2％，免疫磁珠阳性分选后达99．3％；检测γδT细胞内的ZAP-70分子。结论Mtb—Ag可特异性激活γδT细胞，用Mtb-Ag刺激γδT细胞活化增殖培养，可获得大量的γδT细胞；成功地检测到细胞内ZAP-70分子，这为γδT细胞内其它分子的检测分析奠定方法学基础，也为进一步检测γδT细胞活化信号转导过程中ZAP-70分子的激活及作用奠定基础。; 孙文化彭亮王宏侯彦强; 关键词：ΓΔT细胞 ZAP-70

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上海市松江区科技攻关项目(08SJGG40)