国家自然科学基金(39770349)
- 作品数：7 被引量：52H指数：5
- 相关作者：侯凡凡张训蒋建平彭卫华王力更多>>
- 相关机构：中国人民解放军第一军医大学南方医科大学南方医院第一军医大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 改良的胶原酶滑膜细胞分离培养法被引量：14
- 2000年
- 目的 探讨一种改良的滑膜细胞培养法。方法 修剪、收集关节滑膜层，依次以胶原酶、0.2%胰蛋白酶、0.2%胰蛋白酶-0.02%EDTANa2消化，100目筛网过滤，D-hanks液洗网后培养，行显微镜、电镜、ABC法免疫组化鉴定。结果 培养的细胞具有成纤维细胞样形态和特征，免疫组化染色示vimentin阳性、CD68阴性，纯度达98%以上，符合B型滑膜细胞特点。结论 改良的胶原酶消化法是一种有效的滑膜细胞培养方法。
- 彭卫华侯凡凡蒋建平张训
- 关键词：细胞培养滑膜细胞胶原酶
- 肝素对血液透析病人单核细胞表面晚期糖基化终产物受体的影响被引量：13
- 2002年
- 目的 研究肝素对慢性肾衰竭长期血液透析 (血透 )病人单核细胞表面晚期糖基化终产物 (AGE)受体的影响 ,探讨血透病人体内AGE潴留的机制。方法 用核素 [12 5I]标记AGE修饰的人血清白蛋白 (AGE HSA)。用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞。用放射性配体 受体结合法观察肝素和低分子量肝素对血透病人及正常人单核细胞表面AGE受体的影响。结果 采用常规持续肝素输注法进行抗凝的血透病人 ,在透析后 15min ,单核细胞与12 5I AGE HSA的结合被抑制 2 7%,作用持续 6h ,透析后 2 4h结合率恢复至透析前水平 ;用低分子量肝素抗凝的病人 ,透析中及透析后单核细胞与12 5I AGE HSA的结合无明显变化。体外实验显示 ,肝素抑制AGE与其单核细胞表面AGE受体的结合 ,这种作用呈剂量依赖性 ;低分子量肝素对AGE受体不具有封闭作用。结论 肝素可以阻断AGE与其单核细胞表面AGE受体的结合 ,从而干扰体内AGE的清除 ,可能是造成血透病人体内AGE潴留的原因之一。
- 任昊侯凡凡张训
- 关键词：肝素糖基化终产物受体血液透析
- 比较肝素和低分子量肝素对人单核细胞表面AGE受体的影响
- 2001年
- 用放射性受体 配体结合分析法 ,观察肝素和低分子量肝素对正常人和慢性肾功能衰竭血液透析患者单核细胞表面晚期糖基化终产物 (AGE)受体的影响。结果表明 ,肝素对正常人和慢性肾功能衰竭血液透析患者单核细胞表面的AGE受体均有封闭作用 ,且这种封闭作用具有剂量依赖性 ;低分子量肝素对AGE受体无封闭作用。提示肝素可以干扰AGE的清除和降解 。
- 任昊侯凡凡张训
- 关键词：肝素低分子量肝素单核细胞糖基化终产物
- 单核细胞在含内毒素的微环境中分化时表型与功能的改变被引量：5
- 2000年
- 目的 观察单核细胞在含内毒素 (LPS)的微环境中分化成巨噬细胞时 ,其表型与功能的变化。方法 以含LPS的介质体外培养纯化的正常人循环单核细胞 ,在其分化为巨噬细胞的不同阶段观察形态、超微结构、细胞表面HLA DR、补体 3受体 (C3R)和甘露糖受体 (MR)的表达以及细胞分泌超氧离子 (O-2 )、白细胞介素 1β(IL 1β)和肿瘤坏死因子α(TNF α)的变化。结果 与在自身血清中分化的巨噬细胞相比 ,(1)在含LPS介质中发育的巨噬细胞体积较小 ,但具有正常巨噬细胞的超微结构特征 ;(2 )在分化早期 (第 1天 ) ,其HLA DR的表达明显上调 ,而在成熟阶段 (第 5天 )表达下调。LPS对C3R和MR的表达无明显作用 ;(3)在含LPS介质中分化的巨噬细胞 ,其在佛波醇肉豆蔻乙酸盐刺激下生成O-2 的能力得以保持。自发分泌IL 1β和TNF α的水平明显高于在血清中分化的巨噬细胞。结论 在含LPS微环境中分化的巨噬细胞具有与正常单核细胞衍生的巨噬细胞所不同的功能特征 ,表现为MHCⅡ类抗原的表达降低 ,促炎症介质的生成增加。
- 侯凡凡张训陈平雁
- 关键词：单核-巨噬细胞脂多糖内毒素微环境分化
- 我国一个中心透析相关性淀粉样变的发生率和危险因素分析被引量：8
- 2001年
- 目的 了解长期血液透析（ＨＤ）患者透析相关性淀粉样变（ＤＲＡ）的发病率和相关因素。方法 应用高分辨率超声诊断仪对７０例规律ＨＤ患者进行肩关节检查，测定旋转袖（ＲＣ）的最大厚度并观察关节周围有无增强回声（ＥＰ）。以ＲＣ＞０．８ｃｍ和（或）有ＥＰ为诊断ＤＲＡ的阳性标准。同时采用ＥＬＩＳＡ和放射免疫法测定血清晚期糖基化终产物（ＡＧＥ）、β２微球蛋白（β２－ｍ）和甲状旁腺激素（ＰＴＨ）水平。结果 ４２／７０例（６０％）在超声检查下提示有肩关节病变，其阳性率随透析龄延长而增加。右侧肩关节发生率高于左侧。合并肩关节病变组的血清ＡＧＥ水平明显高于无病变组（Ｐ＜０．０５），但两组间血清β２－ｍ和ＰＴＨ水平差异无显著性意义。结论 尽管导致慢性肾衰的病因和年龄分布与国外有很大不同，本组ＤＲＡ的发生率仍高达６０％。ＤＲＡ的发生率与透析时间的长短及血清ＡＧＥ水平明显相关。
- 林跃萍侯凡凡杨燕刘志强
- 关键词：血液透析糖基化终产物Β2微球蛋白淀粉样变发生率
- 晚期糖基化终产物修饰的β_2微球蛋白对人滑膜细胞黏附、伸展和增殖的影响被引量：1
- 2000年
- 目的探讨晚期糖基化终产物（ＡＧＥ）修饰的β２微球蛋白（ＡＧＥ－β２ｍ）对人滑膜细胞黏附、伸展、增殖功能的影响。方法分离、培养正常人关节Ｂ型滑膜细胞，使其与ＡＧＥ－β２ｍ或正常基质成份包被的固相表面接触。用同位素标记细胞计数法比较滑膜细胞的黏附功能，染色法比较细胞伸展功能，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和直接细胞计数比较细胞增殖功能。结果滑膜细胞贴附于ＡＧＫ－β２ｍ、β２ｍ和ＡＧＥ－胶原蛋白时其黏附能力较之与纤维连接蛋白、Ｉ型胶原等正常基质成份接触时明显降低。伸展现象延迟，细胞增殖功能受抑。结论与ＡＧＥ－β２ｍ等非正常基质成份的接触将影响人类Ｂ型关节滑膜细胞的功能，这可能是透析相关性淀粉样变（ＤＲＡ）时关节病变的原因之一。
- 彭卫华侯凡凡张训蒋建平刘志强王力
- 关键词：Β2微球蛋白滑膜细胞淀粉样变
- ELISA法检测人血清晚期糖基化终产物及在血液透析病人的应用被引量：12
- 2000年
- 用牛血清AGE(BSA AGE)作为包被抗原 ,采用对氧化糖基化产物———Nε 羧甲基赖氨酸 (CML)特异的抗体 (抗KLH AGE)作为检测抗体 ,建立竞争ELISA检测系统。将该法和荧光分光光度法所测AGE水平进行比较 ,并对 117例长期血液透析 (HD)病人的血清AGE水平进行定量观察。结果显示 :ELISA法检测血清AGE的最低检测限为 0 .1μg/ml,平均批内变异系数 (CV)为 2 .2 % ,批间CV为 9.0 % ,回收率为 97%～ 10 7%。用该法测定的 117例血透病人血清AGE水平中位数为 0 .5 μg/ml,而年龄匹配的正常人中仅有 9.4%的血清AGE含量>0 .1μg/ml。同时用ELISA法和荧光分光光度法检测 44例病人血清AGE ,两种方法所得结果相关非常显著 (P<0 .0 1)。上述结果表明 ,竞争ELISA法测定人血清AGE水平 ,具有方法简便、准确、特异性高和成本低的优点 ,符合临床使用要求 ,可作为反映病人氧化糖基化损伤的一种检测方法。
- 刘志强侯凡凡王力舒友梅
- 关键词：血液透析肾功能衰竭糖基化终产物
