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广东省科技计划工业攻关项目(20088030301151)
作品数:
1
被引量:12
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杜江
李秋平
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王斌
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2013
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血管内皮生长因子基因转染骨髓间充质干细胞对支气管肺发育不良大鼠肺发育的影响
被引量:12
2013年
目的研究血管内皮生长因子(VEGF)基因转染骨髓问充质干细胞(MSCs)移植对支气管肺发育不良大鼠肺泡结构和肺部微血管的作用。方法采用密度梯度离心法分离sD大鼠骨髓MSCs,贴壁培养传代并鉴定,应用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF164,然后转染至MSCs。将新生SD大鼠置于950mI/L氧箱中14d后,随机分为转染组(MSCs/VEGF组)、对照组(MSCs组)、空白组(无血清培养基组),每组10只,分别于气管内注入1×10^5个转染VEGF的MSCs、单纯MSCs和等量无血清培养基。分别于移植后1、4周取大鼠肺组织行HE染色观察肺组织结构和放射状肺泡计数(RAC),免疫组织化学染色法评价VEGF蛋白表达和新生血管密度情况,Western blot方法检测肺组织中VEGF164蛋白表达情况。结果免疫组织化学结果显示移植后1、4周转染组大鼠肺组织RAC、VEGF蛋白表达、再生血管密度较对照组和空白组均明显增加(P均〈0.05)。Westernblot检测结果显示移植后1、4周转染组VEGFl64蛋白表达较对照组和空白组均明显增加(P均〈0.05)。结论VEGF基因转染MSCs移植能显著促进肺泡发育以及微血管再生,VEGF与新生大鼠肺发育有密切关系。
王斌
刘茹
陈春芳
钟春霞
杜江
李秋平
关键词:
血管内皮细胞生长因子
骨髓间充质干细胞
基因治疗
支气管肺发育不良
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