重庆市自然科学基金(2007BB5238)
- 作品数：3 被引量：9H指数：3
- 相关作者：廖璞马永鹏左帜健尹一兵何敏更多>>
- 相关机构：重庆市第三人民医院第三军医大学西南医院重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 盐酸小檗碱影响表皮葡萄球菌形成生物被膜差异蛋白的筛选被引量：3
- 2011年
- 目的寻找盐酸小檗碱抑制表皮葡萄球菌生物被膜形成前后表达差异的蛋白质分子,并对这些差异蛋白进行功能分类。方法首先构建表皮葡萄球菌生物被膜阳性模型,采用快速银染法鉴定盐酸小檗碱作用前后,表皮葡萄球菌生物被膜形成情况;然后应用CRA平板法检测药物作用前后,表皮葡萄球菌产生多糖-胞间多糖黏附素(PIA)的能力;分别提取药物作用前后细菌总蛋白,采用改良双向电泳技术进行分离,并对差异蛋白点进行HPLC-CHIP/MS鉴定。结果在合适的培养条件下,表皮葡萄球菌生物被膜形成阳性;药物处理后,生物被膜减少或消失,且PIA生成能力减弱,表皮葡萄球菌生物被膜模型构建成功。通过电泳分离,在药物处理组共分离蛋白点(764±12.40)个,在非药物处理对照组共分离蛋白点数(836±9.23)个,经比对共得到23个差异表达的蛋白分子,其中13个仅在药物处理组表达升高,有10个仅在非药物处理对照组表达升高;对这些差异蛋白进行功能鉴定发现,这些蛋白参与了细菌的生长、繁殖和代谢等多个环节,细菌代谢17.24%、信号通路16.09%、氧化磷酸13.79%、细菌骨架17.82%、蛋白合成13.22%、蛋白降解4.60%、转录调节12.64%、其他4.60%。结论盐酸小檗碱可以有效减弱表皮葡萄球菌生物被膜的形成,分离得到的差异表达蛋白分子为后续细菌耐药机制的研究奠定基础。
- 廖璞马永鹏吴清
- 关键词：表皮葡萄球菌生物被膜盐酸小檗碱双向凝胶电泳耐药性
- 盐酸小檗碱对表皮葡萄球菌生物被膜形成及相关基因表达的抑制作用被引量：5
- 2009年
- 目的通过检测盐酸小檗碱单用或联合抗菌药物对表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,Se.)形成生物被膜及所需基因的抑制作用。方法体外构建表皮葡萄球菌生物被膜模型,盐酸小檗碱单用或联合万古霉素、环丙沙星、红霉素分别干预生物被膜的形成,采用CRA平板法检测药物对Se.生物被膜的抑制作用,荧光定量RT-PCR方法检测药物作用前后表皮葡萄球菌icaA基因和agr基因的表达变化。结果盐酸小檗碱对icaA基因和agr基因的影响作用不及万古霉素、环丙沙星、红霉素;当不同浓度的盐酸小檗碱分别与万古霉素、环丙沙星、红霉素联用时,随着盐酸小檗碱的浓度增加,联合用药对icaA基因和agr基因的抑制作用逐渐减弱。结论中药单体(盐酸小檗碱)对Se.形成生物被膜及所需关键基因的表达有一定的抑制作用,但抑制作用不及抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素),并且不能与抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素)联合用药,它们之间存在拮抗作用。
- 何敏廖璞尹一兵左帜健
- 关键词：表皮葡萄球菌生物被膜盐酸小檗碱抗生素
- 盐酸小檗碱对表皮葡萄球菌生物被膜形成抑制的研究被引量：5
- 2011年
- 目的研究盐酸小檗碱对表皮葡萄球菌形成生物被膜所需基因的抑制作用和生物被膜形成前后蛋白质分子的表达差异。方法构建表皮葡萄球菌生物被膜阳性模型,用快速银染法鉴定盐酸小檗碱作用前后表皮葡萄球菌生物被膜形成情况;以1 000μg/mL盐酸小檗碱、3 mg/mL万古霉素、环丙沙星和红霉素分别处理生物被膜模型,采用real-time PCR方法检测药物作用前后表皮葡萄球菌icaA基因和agr基因的表达变化;用改良双向电泳技术对500μg/mL盐酸小檗碱作用前后细菌的总蛋白进行分离。结果在合适的培养条件下,表皮葡萄球菌生物被膜形成阳性,表皮葡萄球菌生物被膜模型构建成功。盐酸小檗碱对icaA基因和agr基因表达存在抑制作用,与未经药物处理组比较,P均<0.05;其中对agr基因的抑制作用不及万古霉素、环丙沙星及红霉素(P均<0.05),各药物处理组对icaA基因抑制作用无统计学意义。通过电泳分离,共得到23个差异表达的蛋白质分子,其中13个仅在药物处理组表达升高,有10个仅在非药物处理对照组表达升高。结论中药单体盐酸小檗碱对表皮葡萄球菌形成生物被膜关键基因的表达具有弱的抑制作用,通过二维电泳分离得到的差异表达蛋白分子为后续细菌耐药机制的研究奠定基础。
- 廖璞马永鹏
- 关键词：盐酸小檗碱表皮葡萄球菌生物被膜荧光定量RT-PCR二维凝胶电泳
