广东省中医药管理局基金(104081)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤中p53和Caspase-3活性的变化被引量：5
- 2009年
- 目的:研究马兜铃酸(AA)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)毒性作用中p53和Caspase-3活性的改变,对其在AA肾毒性作用中的意义进行探讨.方法:用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验测AA对HK-2的直接毒性作用,相差显微镜观察细胞形态学改变,Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态的改变,流式细胞技术测细胞凋亡百分率,RT-PCR法测p53mRNA的表达水平,分光光度法测细胞Caspase-3活性改变.结果:AA浓度为80,160mg/L时,LDH释放率显著增高(P<0.01);10mg/LAA可诱导HK-2细胞凋亡百分率显著增高,AA为40mg/L时,细胞凋亡形态改变最明显和细胞凋亡比例最高(P<0.01);各组HK-2细胞p53mRNA表达水平有统计学差异;40mg/LAA诱导HK-2细胞凋亡时,细胞内Caspase-3活性显著升高(与正常组比较,P<0.01).结论:AA能诱导HK-2细胞凋亡,其凋亡途径可能是非p53依赖途径;凋亡过程中存在Caspase-3酶的激活.
- 许勇芝陈丽萍刘华锋陶静莉唐德燊
- 关键词：马兜铃酸肾小管上皮细胞P53CASPASE-3
- 地塞米松对马兜铃酸诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨地塞米松(DXT)对马兜铃酸(aristolochic acid,AA)诱导的人近端肾小管上皮细胞凋亡的影响及其可能机制。方法:应用不同浓度DXT处理经AA诱导的近端肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)48h;应用Hoechst33258染色法和流式细胞技术检测HK-2细胞凋亡百分率;应用RT-PCR法测细胞Caspase-3 mRNA的表达;应用分光光度法测细胞Caspase-3酶活性。结果:40μg/mlAA可显著促进HK-2细胞凋亡,DXT可显著降低AA诱导的HK-2细胞凋亡百分率,并呈剂量依赖趋势;各组细胞Caspase-3mRNA表达水平无统计学差异;40μg/mlAA可显著升高HK-2细胞Caspase-3酶活性;而100MDXT组细胞Caspase-3酶活性较单纯40μg/mlAA刺激显著降低,而其他浓度DXT组细胞Caspase-3活性与单纯AA比较无统计学差异。结论:DXT对AA所致HK-2细胞凋亡有一定的保护作用,其机制可能是抑制细胞凋亡过程中Capease-3酶的激活。
- 许勇芝陈丽萍陶静莉姚翠微唐德燊刘华锋
- 关键词：马兜铃酸肾小管上皮细胞凋亡地塞米松
- 骨形态发生蛋白-7对马兜铃酸诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)对马兜铃酸(Aristolchic acid,AA)诱导的肾小管上皮细胞转分化的拮抗作用,以期为马兜铃酸肾病(Aristolchic acid nephropathy,AAN)寻找治疗新措施。方法应用不同浓度BMP-7(75ng/mL、150ng/mL、300ng/mL)处理经AA(10μg/mL)诱导转分化的体外培养人近端肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),然后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blotting技术分别检测α-SMA mRNA及蛋白的表达水平。结果BMP-7呈剂量依赖方式逆转AA诱导的HK-2细胞α-SMA基因及蛋白的表达。结论BMP-7可以通过抑制马兜铃酸诱导的人肾小管上皮细胞转分化从而可能成为AAN的防治潜在新药。
- 许勇芝黄浩刘华锋陶静莉梁东陈孝文
- 关键词：马兜铃酸肾病骨形态发生蛋白-7肾小管上皮细胞转分化
- 不同浓度马兜铃酸对肾小管上皮细胞的毒性作用以及骨形成蛋白-7的抗凋亡作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨不同浓度马兜铃酸(AA)对肾小管上皮细胞(RTECs)毒性作用的差异,以及BMP-7对AA所诱导RTECs凋亡的保护作用。方法 (1)用浓度分别为5、10、20、40、80、160μg/mL AA刺激体外培养人近端肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),应用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测不同浓度AA对HK-2细胞的直接毒性作用,相差显微镜观察细胞形态学改变,用Hoechst 33258染色法观察不同浓度AA诱导的HK-2细胞凋亡核形态的改变,计算细胞凋亡率;(2)用300 ng/mL BMP-7处理经AA(20和40μg/mL)诱导的HK-2细胞48 h,然后Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-3蛋白酶活性。结果当AA浓度达到80μg/mL时,细胞LDH释放率明显升高(P<0.001);而AA浓度为10μg/mL时,细胞凋亡率开始明显升高(P<0.001),AA浓度为40μg/mL时,细胞凋亡率最高;BMP-7处理后,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白酶活性明显下降(P<0.01)。结论大剂量AA致RTECs坏死,中小剂量AA致RTECs凋亡;BMP-7可减轻AA诱导的RTECs凋亡,其作用可能部分通过抑制Caspase-3酶活性而实现。
- 余晓霞李胜陶静莉刘华锋
- 关键词：马兜铃酸BMP-7肾小管上皮细胞凋亡
