陕西省科学技术研究发展计划项目(2005K02-G4-1)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：赵晓娥马保华陈玉林于秋丽胡林勇更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目农业部农业结构调整重大技术研究专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 山羊腺垂体细胞的分离培养与鉴定被引量：2
- 2010年
- 【目的】探讨山羊腺垂体细胞的分离和培养方法,为其体外分泌特性研究奠定基础。【方法】采集山羊腺垂体,分别用胰蛋白酶、胶原酶、胰蛋白酶和胶原酶混合、胰蛋白酶和透明质酸酶混合对其进行消化,所获细胞培养后采用免疫细胞化学法进行鉴定,评价细胞消化结果和腺垂体细胞的生长特性。【结果】山羊腺垂体组织在37℃条件下,以1 g/LⅣ型胶原酶和1 g/L透明质酸酶混合消化2.5～3 h,消化效果较好;所得细胞在培养24 h开始贴壁,72 h后细胞主要呈多角形或梭形,连接成片,培养6 d左右细胞即可铺满培养器皿的细胞生长面。免疫细胞化学鉴定结果显示,FSH阳性细胞胞质呈蓝色,PRL阳性细胞胞质呈蓝褐色;放射免疫分析法测定表明,分离、培养的腺垂体细胞具有激素分泌活性。【结论】采用筛选的消化和分离方法可获得山羊腺垂体细胞,所获腺垂体细胞体外培养体系,可用于体外研究腺垂体细胞的功能和内分泌调控作用。
- 尹慧勇赵晓娥马保华
- 关键词：免疫细胞化学放射免疫分析山羊
- 间接ELISA法检测羊促乳素抗体方法的建立被引量：7
- 2009年
- 【目的】建立促乳素单克隆抗体制备中筛选阳性分泌细胞的间接ELISA检测方法。【方法】用促乳素纯品与Freund佐剂免疫6--8周龄雌性BALB／c小鼠，初次免疫采用抗原与完全Freund佐剂，每2周免疫1次，从第2次开始采用抗原与不完全Freund佐剂，免疫4次后尾静脉采血，收集血清制备阳性对照抗体，以未免疫的BALB／c小鼠血清为阴性对照，筛选间接ELISA法检测促乳素抗体的最佳反应条件，并对单克隆抗体制备中的阳性细胞进行筛选。【结果】间接ELISA法的最佳反应条件：血清稀释倍数为1：200，抗原包被质量浓度为100ng／mL，封闭液为1％牛血清白蛋白，酶标抗体的工作浓度为1：10000，酶标抗体作用时间为37℃90min，底物作用时间37℃30min。用该方法检测融合的杂交瘤细胞，最终获得OD450为0．875和0．460的阳性细胞株。
- 于秋丽赵晓娥胡林勇陈玉林马保华
- 关键词：促乳素抗体间接ELISA法
- 溴隐亭与孕激素配合促性腺激素诱导泌乳绵羊发情机理的研究被引量：4
- 2008年
- 【目的】比较不同方法诱导泌乳期母羊发情的效果,同时通过测定血清中激素变化规律研究诱导发情机理。【方法】将35只泌乳60 d的小尾寒羊随机分为5组(n=7),第Ⅰ和第Ⅱ组分别放置含有5 mg和2.5 mg溴隐亭的炔诺酮阴道缓慢释放装置(NRID),第Ⅲ组放置NRID后的第3,4天各口服溴隐亭2.5 mg,第Ⅳ组仅放置NRID,以上4组在去除NRID时配合促性腺激素处理,第Ⅴ组为对照组。在处理的0,3,6,9,13,15,17 d早晨8:00采血,分离血清,放射免疫分析法测定血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、促乳素(PRL)、孕激素(P4)、雌激素(E2)的浓度。【结果】第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组诱导泌乳母羊发情率分别为100%,71.4%,57.1%和57.1%。第Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组发情羊血清中FSH浓度有缓慢升高的趋势,15 d时FSH浓度高于对照组;第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组发情羊血清中PRL浓度迅速下降;第15天时,第Ⅰ组和第Ⅱ组发情羊血清中E2浓度迅速升高到95.34和117.55 pg/mL,显著高于同组13 d以前的E2浓度,其余3组发情羊血清中E2浓度在发情期间无明显变化;第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组发情羊血清中P4浓度在发情时显著降低,达到基础水平;各组发情羊血清中LH浓度在试验期间无规律变化。【结论】使用溴隐亭和孕激素并配合注射促性腺激素能有效诱导泌乳期小尾寒羊发情,溴隐亭以阴道缓释给药的方式较好。
- 李运生于秋丽赵晓娥王岚峰胡林勇陈玉林马保华
- 关键词：泌乳期生殖激素溴隐亭绵羊
