国家自然科学基金(30370634)
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 相关作者：李延青袁俊华杨晓云王敏张燕更多>>
- 相关机构：山东大学山东省立医院山东中医药大学附属医院更多>>
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- 结直肠癌组织中葡糖醛酸转移酶2B同工酶和肝细胞核因子的表达研究
- 2008年
- 背景与目的:检测葡糖醛酸转移酶2B家族(UDP-glucuronosyltransferase 2B,UGT2B)4种同工酶及肝细胞核因子(hepatic nuclear factor1α,HNF1α)在结直肠癌组织中的表达,探讨其在结直肠癌变中的意义。材料与方法:选择32例结直肠癌组织、癌旁组织并选择14例正常人群结直肠黏膜为对照组,用RT-PCR方法检测UGT2B中4种同工酶及肝细胞核因子HNF1α mRNA的表达。分别用Western blot方法检测UGT2B7蛋白,免疫组织化学方法检测HNF1α蛋白在结直肠癌组织、癌旁组织及正常结直肠粘黏膜内的表达。结果:UGT2B同工酶在结直肠黏膜内呈多态性表达。UGT2B10表达丰度及阳性表达率较低,而结直肠癌组织、癌旁组织中UGT2B4 mRNA水平与对照组相比无明显改变(P>0.05),UGT2B7、UGT2B15 mRNA表达水平与对照组相比降低(P<0.05);结直肠癌组织、癌旁组织UGT2B7蛋白荧光强度、蛋白灰度值比值低于正常结肠黏膜(P<0.05)。HNF1α mRNA及其蛋白的表达与对照组相比均无明显改变(P均>0.05)。结论:UGT2B同工酶表达降低可能是结直肠癌变的机制之一。UGT基因的上游调控因子HNF1α mRNA水平、蛋白水平表达无明显改变,可能与机体内更加复杂的调控机制有关。
- 张燕李延青张尚忠杨晓云袁俊华郭玉婷卢雪峰
- 关键词：结直肠癌肝细胞核因子
- Modulation of NRF2 and UGT1A expression by epigallocatechin-3-gallate in colon cancer cells and BALB/c mice被引量：3
- 2009年
- 背景格林茶与减少的癌症风险是在人的食谱和流行病学的数据相互关联绿色茶消费的 flavonoids 的重要来源。在有效集中给它的复杂性质，我们放了以前在我们的研究议程上对几根癌症房间线在它的 anti-proliferative 活动报导了进一步检验它的 chemopreventive 潜力的机制的 epigallocatechin-3-gallate (EGCG ) 。方法 RNA 干扰(RNAi ) 表示向量 pSilencer 3.1-H1 被用来构造 recombinant 2 联系了的原子因素 erythroid 因素 2 (Nrf2 ) 指向 RNAi plasmids。EGCG (5 g/ml ) 在 transfection 前后被增加进房间的文化液体。RT-PCR 并且西方的弄污被用来检测 uridine 5'-diphosphate-glucuronosyltransferase (UGT ) 的表示在房间的 1A。四十只男 BALB/c 老鼠被分到四个组：与改变 EGCG 的剂量对待的正常未曝光的控制和三个组。四个星期以后，老鼠被牺牲，并且他们的冒号纸巾经由 RT-PCR 和西方的弄污分析受到 mRNA 和 Nrf2 和 UGT1A 的蛋白质表示。结果 EGCG 起来调整 Nrf2 的表示并且在房间增加了 UGTIA 的水平。由在鼠标， mRNA 和蛋白质的 EGCG 的 UGT1A 表示的正式就职 Nrf2 和 UGT1A 铺平的经由大部分稀释的 RNA 干预的 Nrf2 活动的封锁由 RT-PCR 检测了，西方的弄污增加了(两 P < 0.05 与控制相比) 。Nrf2 表示的这增加也与增加的 UGT1A 表情有积极关联。结论 EGCG 调停了它的效果部分地由导致 NRF2 表明小径和增加的 UGT1A 表示。两个作为一个可能的 chemopreventive 代理人在 EGCG 的潜在的使用在在 vivostudies 的 vitroand 表明了 NRF2 和 UGT1A 表示的角色并且为癌症治疗支持了 EGCG 的进一步的学习。
- ZHANG Zhi-mianYANG Xiao-yunYUAN Jun-huaSUN Zi-yuanLI Yan-qing
- 关键词：没食子酸儿茶素
- 葡萄糖醛酸转移酶1A基因的组织差异性表达及多态调节被引量：4
- 2006年
- 目的从mRNA、蛋白质及细胞水平分析尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)1A 基因的组织差异性表达及多态调节。方法采用逆转录聚合酶链反应分析结直肠癌组40例、正常人群肠道黏膜20例、正常肝组织10例的UGT 1A mRNA表达;免疫印迹检测各组UGT 1A蛋白表达;高效液相色谱法测定各组UGT 1A酶的催化活性。结果①结直肠癌组织中UGT 1A mRNA表达量明显低于其周围正常黏膜,而后者低于正常人群肠黏膜组织,正常人群结直肠黏膜中UGT1A mRNA表达量总体低于肝组织,P<0．01。结直肠癌组、正常人群结直肠黏膜组织呈现个体差异表达,而肝组织的表达较均质。②癌组织、癌周正常黏膜及正常人群肠道黏膜中UGT 1A各同工酶的表达例数均不相同。③UGT 1A蛋白表达在癌组织显著低于癌周正常组织,后者又低于正常人肠黏膜(P<0．01),各组蛋白表达量亦各不相同。而肝组织呈均质表达。④癌组织的UGT1A酶活性低于癌周正常黏膜,而后者的微粒体酶活性低于正常人群肠黏膜微粒体蛋白, P<0．01。结论①UGT 1A基因位点呈组织差异性表达。②结直肠黏膜上皮UGT 1A基因位点在转录水平及功能水平均存在多态调节,不同个体对致癌物的易感性不同可能是这种差异表达的结果。
- 王敏李延青陈建刘福国刘焕涛许晓群袁孟彪
- 关键词：结直肠癌葡萄糖醛酸转移酶基因多态性
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对结肠肿瘤生长与转移的作用
- 2010年
- 目的观察不同浓度表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate, EGCG）对结肠肿瘤原位生长与转移的作用。方法将40只BALB／C裸鼠均分为对照组和低、中、高剂量组。除对照组外，其他3组分别给予低、中或高浓度EGCG（分别为5、10和20mg·kg^-1·d^-1），观察对结肠原位种植肿瘤的生长和转移的影响。HE染色观察肝、肺组织病理学改变；免疫组化检测结肠肿瘤组织中核因子E2p45相关因子2（NF—E2-related factor 2,Nrf2）基因的蛋白表达水平；RT—PCR检测Nrf2、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（UGT）1A、UGT1A8和UGT1A10基因的mRNA表达水平。结果低、中、高剂量EGCG组裸鼠肿瘤的平均重量为（152±63）、（76±42）和（18±10）mg，与对照组[（564±130）mg]比较差异有统计学意义（P值均〈0．05）。3组的肿瘤抑制率分别是73．0％、86．5％和96．8％。EGCG对肿瘤生长的抑制率与EGCG的刹量呈正相关（P值均〈0．05）。不同剂量EGCG组Nrf2基因的蛋白表达水平明显高于对照组（P〈0．05），且有核转录现象。不同剂量EGCG组Nrf2、UGT1A、UGT1A8和UGT1A10基因的mRNA表达水平明显高于对照组（P〈0．05）。结论不同浓度的EGCG能预防裸鼠HT29结肠原位肿瘤的局部生长和远处转移，且有剂量依赖效应。这种作用可能通过诱导Nrf2、UGT1A、UGT1A8和UGTIA10基因的表达起作用。
- 袁俊华姜虹杨晓云李延青
- 关键词：结肠肿瘤表没食子儿茶素没食子酸酯葡萄糖醛酸转移酶
- Nrf2在EGCG诱导结肠肿瘤组织UGT1A及其同工酶表达中的作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨核因子E2p45相关因子2(Nrf2)在表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠原位种植肿瘤中诱导尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)及其同工酶表达中的作用机制。方法运用RNAi技术建立Nrf2基因低表达的结肠癌细胞系HT-29,常规培养至对数生长期,在BALB/cA裸小鼠中建立皮下肿瘤模型,用皮下肿瘤构建裸鼠结肠原位肿瘤模型。分别用低、中、高剂量EGCG作用4周,实验结束后,剥离结肠原位肿瘤组织,用免疫组化检测其中Nrf2蛋白表达和RT-PCR法检测Nrf2、UGT1A、UGT1A8和UGT1A10基因的mRNA表达水平。结果与对照组比较,不同剂量EGCG组的动物体质量、对肿瘤生长的抑制率和Nrf2的蛋白水平均无显著性差异,Nrf2、UGT1A、UGT1A8和UGT1A10的mRNA水平无显著性差异。结论 Nrf2在EGCG诱导裸鼠结肠原位种植肿瘤UGT1A及其同工酶的表达中发挥着重要作用。
- 袁俊华李延青杨晓云
- 关键词：EGCGNRF2尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶结直肠肿瘤
- 核因子E2p45相关因子2基因在茶多酚调节结肠癌细胞尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A及其同工酶表达中的作用被引量：13
- 2006年
- 目的 探讨核因子E2p45相关因子2（Nrf2）基因在茶多酚中的主要化学物质epigallocatechin gallate（EGCG）诱导结肠癌细胞尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGT）1A及其同工酶UGT1A8、UGTIA10表达中的调节作用。方法EGCG分别作用Caco-2及HT-29结肠癌细胞12h，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测基因表达水平的变化，免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜观察细胞内Nrf2蛋白定位的改变。此外，利用RNA干扰技术抑制细胞内Nrf2基因的表达，观察阻断前后EGCG对基因表达水平影响的改变。结果（1）Caco-2及HT-29结肠癌细胞系、结肠癌及癌旁组织中UGTlA、1A8、1A10基因表达水平存在差异。（2）EGCG作用Caco-2及HT-29细胞后Nrf2、UGTlA、1A8、1A10表达升高1．8～9．2倍（均P〈0．05），免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜检测到Nrf2蛋白向细胞核内聚集。（3）酶切分析和测序证实成功构建了RNA干扰真核表达载体pSilence-Nrf2-A、B、C、D及随机序列对照pSilence-CON。（4）pSilence-Nrf2-B质粒转染可显著抑制Nrf2基因的表达，在caco-2及HT-29细胞中抑制率分别为81．46％±1．68％及84．72％±2．08％（实验重复3次）；稳定筛选建立的Nrf2低表达的细胞系Caco-2-siNrf2、HT-29-siNrf2，不仅基础UGT1A酶的表达水平降低，而且EGCG作用后酶诱导表达的作用消失。结论Nrf2基因参与了EGCG诱导UGT1A及其同工酶表达的过程并在其中起关键作用，为进一步论证EGCG在结肠癌化学预防中的作用及其可能的机制提供了新的论据。
- 杨晓云赵维萍李延青孙子渊张燕郭玉婷袁俊华朱强王敏
- 关键词：葡萄糖醛酸转移酶基因NRF2
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对结肠癌前期病变的预防作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对2氨基-3-甲基咪唑[4，5-f]喹啉（IQ）诱导的裸鼠结肠癌前期病变畸变隐窝病灶（ACF）形成的预防作用及其机制。方法60只雄性BALB／cA裸鼠分为正常对照组、模型组和低、中、高剂量预防组，分别予玉米油、IQ、5mg·kg^-1·d^-1 EGCG＋IQ、10mg·kg^-1·d^-1 EGCG＋IQ、20mg·kg^-1·d^-1 EGCG＋IQ处理。监测实验动物体重。6周后处死裸鼠。取结肠组织行H—E观察病理改变。亚甲蓝染色计数变性隐窝（AC）和ACF。免疫组化染色检测核因子E2p45相关因子2（Nrf2）蛋白表达水平。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测大肠组织Nrf2、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGT）1A10的mRNA表达水平。结果模型组裸鼠体重较高剂量预防组明显下降[（21．70±0．13）g比（24．37±0．07）g，P〈0.01]。高剂量预防组与模型组比较，结肠上皮细胞不典型增生程度下降；总ACF数和总变性隐窝（AC）数明显下降（18．00±7．51比64．20±45．18，P〈0．05；63．90±18．56比168．80±35．34，P〈0．01），Nrf2蛋白水平明显升高（0．3114±0．0037比0．1660±0．0021，P〈0．01），Nrf2及其下游代谢酶UGT1A10的mRNA水平明显升高（P值均〈0．01）。结论EGCG通过降低结肠黏膜ACF数目，对IQ诱导的结肠癌起到预防作用，此作用可能由激活Nrf2／uGT1A10信号途径实现。
- 袁俊华李延青杨晓云
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯异喹啉结肠肿瘤
