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江苏省自然科学基金(BK2004009)
作品数:
4
被引量:12
H指数:3
相关作者:
孙凌云
黄静
冯学兵
李荣良
王丹丹
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相关机构:
南京中医药大学
南京大学医学院附属鼓楼医院
东南大学
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发文基金:
江苏省自然科学基金
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相关领域:
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医药卫生
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系统性红斑狼...
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红斑狼疮患者
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抗体
机构
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南京大学医学...
3篇
南京中医药大...
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东南大学
作者
4篇
李荣良
4篇
冯学兵
4篇
黄静
4篇
孙凌云
1篇
周涛
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王丹丹
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朱丽娜
传媒
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中华风湿病学...
1篇
中华内科杂志
1篇
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年份
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2010
1篇
2009
共
4
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系统性红斑狼疮患者OAZ通路基因表达研究
被引量:7
2009年
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)Olf1/EBF相关锌指蛋白(OAZ)通路上的OAZ、BMP6、BMP4、Id3、Smad6、EHZF6个相关基因在SLE发病中的作用。方法收集SLE患者和正常对照骨髓前体细胞(各5例),提取RNA,逆转录为cDNA,加入相应的引物、SYBR Green I在ABI Prism 7500型高通量荧光定量仪上进行实时荧光定量PCR,采用看家基因酸性核糖体磷蛋白大亚基(RPLP0)进行标化,观察各基因的表达量与SLE疾病活动相关指标关系。同时收集30例SLE患者和20名正常人外周血细胞,对上述结果进行验证。结果SLE患者骨髓前体细胞OAZ、Id3基因的mRNA表达水平(△Ct分别为10.6±0.5、5.8±3.2)较正常对照组(△Ct分别为16.5±0.9、10.4±2.6)显著增高,且表达水平高于外周血细胞;BMP6、BMPd基因表达水平虽较正常对照有高表达趋势,但差异无统计意义。SLE患者外周血细胞OAZ、Id3、BMP4、BMP6 mRNA基因表达(△Ct分别为14.1±2.7、7.5±1.8、7.6±3.3、5.2±2.2)均显著高于正常(△Ct分别为16.1±2.2、9.5±1.7、9.7±0.3、6.4±1.2)。骨髓前体细胞OAZ、BMP6、BMP4、Id3的表达水平△Ct值与SLEDAI积分、肾脏损伤指数、抗双链DNA(dsDNA)抗体、RNA相关抗体水平呈负相关;与补体C3呈正相关。结论OAZ通路相关基因与SLE疾病相关,可能参与了SLE的病理过程,需要进行结构与功能相关性的研究以进一步明确。
李荣良
黄静
孙凌云
冯学兵
关键词:
系统性红斑狼疮
基因表达
锌指蛋白
小干扰RNA阻断Olf-1/EBF相关锌指蛋白信号通路对狼疮抗核抗体产生的影响
被引量:4
2010年
目的运用RNA干扰(RNAi)技术研究OIf-1/EBF相关锌指蛋白(OAZ)对其信号通路相关基因的干预作用及对狼疮抗核抗体(ANA)产生的影响。方法采集并分离系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞,分为实验组、阳性对照组、阴性对照组和空白对照组进行细胞培养。实验组和阳性对照组分别用OAZ和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)小干扰RNA(siRNA)在体外对培养细胞进行干扰,阴性对照组采用无关RNA序列,空白对照组为培养基对照。72h后分离细胞和上清液,从细胞中提取RNA,逆转录为cDNA,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析不同分组OAZ信号通路相关基因OAZ、分化抑制因子(Id)1、Id2、Id3、Id4mRNA表达水平的变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定上清液中干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-12、IL-21、CC趋化因子配体(CCL)2、抗核抗体(ANA)浓度,并分析这些因子分泌水平与OAZ基因表达的相关性。结果实验组OAZ、Id1、Id2、Id3基因的mRNA表达水平(△Ct分别为12.5±1.4、8.9±1.5、4.3±0.8、8.0±1.1)较阴性对照组(△Ct分别为10,2±1.1、6.5±1.2、2.4±1.3、6.2±1.2)显著降低(P〈0.05);Id4表达水平虽较阴性对照组有低表达趋势,但差异无统计学意义。实验组IFN-1、IL-10、IL-12、IL-21、ANA的水平明显低于阴性对照组;而CCL2高于阴性对照组(P〈0.05)。实验组与阴性对照组OAZmRNA表达水平△△Ct值与ANA的A比值、IL-21浓度比值呈负相关;与Th1/Th2、CCL2比值呈正相关。结论OAZsiRNA可有效降低狼疮外周血单个核细胞中OAZ信号通路相关基因表达,同时减低多种细胞因子及抗核抗体水平,推测OAZ可能通过Id基因影响细胞因子的水平并导致ANA异常表达。
李荣良
黄静
周涛
孙凌云
冯学兵
系统性红斑狼疮患者I型干扰素诱导基因的表达
被引量:2
2010年
目的通过观察系统性红斑狼疮(SLE)患者I型IFN诱导基因[黏液病毒抗性蛋白1(MX1)、2’,5’-寡腺苷酸样合成酶(OASL)、2’,5’-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)、α-干扰素诱导蛋白15(ISG15)、淋巴细胞抗原6复合体E(LY6E)]mRNA表达,探讨其对SLE活动或感染鉴别诊断的作用。方法收集48例SLE患者、16例类风湿关节炎(RA)患者、26例健康人外周血细胞,提取RNA,用实时荧光定量PCR检测所有受试者MX1、OASL、OAS1、ISG15、LY6EmRNA表达。单因素和多因素1ogistic回归分析上述5个基因表达水平与狼疮感染或活动的关联性。结果(1)与健康人相比,SLE患者MX1、OASL、OAS1、ISG15、LY6EmRNA表达水平显著增高,差异有统计学意义(P值均小于0.01);SLE患者OASL、OAS1、ISG15、LY6EmRNA表达水平较RA者显著增高,差异有统计学意义(P值均小于0.01)。(2)男性SLE患者MX1、OASL、OAS1、ISG15、LY6EmRNA表达水平与女性患者相比,差异均无统计学意义。(3)1ogistic回归分析显示,ISG15、LY6E是SLE活动的独立危险因素(P〈0.01),OASL是SLE合并感染的独立危险因素(P=0.003)。结论MX1、OASL、OAS1、ISG15、LY6EmRNA在SLE患者中旱高表达,ISG15、LY6E与狼疮活动密切相关,而OASLmRNA定量水平的升高可能对狼疮合并感染的临床判断具有参考价值。
黄静
李荣良
朱丽娜
孙凌云
冯学兵
关键词:
红斑狼疮
基因表达
间充质干细胞移植对系统性红斑狼疮患者Olf-1/EBF相关锌指蛋白信号通路的影响
被引量:4
2010年
目的探讨同种异体间充质干细胞(MSC)移植治疗对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血Olf-1/EBF相关锌指蛋白(OAZ)信号通路相关基因表达水平及抗核抗体(ANA)产生的影响。方法从脐带血中分离培养MSC移植治疗10例SLE患者,采集并分离移植前、移植后1、4周患者外周血有核细胞,从细胞中提取RNA,反转录为cDNA,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术分析不同组OAZ信号通路相关基因OAZ、分化抑制因子(Id)1、Id2、Id3 mRNA表达水平的变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定移植前后患者血清中白细胞介素(IL)-10、IL-12、IL-21、CC趋化因子配体(CCL)2、抗核抗体(ANA)浓度,并分析这些因子分泌水平与OAZ基因表达的相关性。对患者SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分与基因表达水平进行回归分析,并以方差分析进行显著性检验。2组均数间的比较用Wilcoxon秩和检验,变量间的相关关系用Pearson相关分析。结果移植后1、4周OAZ、Id1、Id3基因的mRNA表达水平[△Ct(1周)分别为12.4±1.1、9.7±1.9、9.7±1.9、2.1±1.0;△Ct(4周)分别为13.3±1.2、10.4±1.5、10.8±1.2、2.1±1.2]较移植前(△Ct分别为11.0±0.9、7.4±2.1、7.8±2.1、0.1±1.5)均显著降低(P〈0.05);Id2表达水平虽较移植前有低表达趋势,但差异无统计学意义。移植4周后IL-10、IL-21、ANA的水平明显低于移植前,IL-12/IL-10、CCL2高于移植前(P〈0.05),但移植后1周的水平较移植前没有差异。移植前与移植后4周OAZ mRNA表达水平变化与ANA的吸光度值和IL-21浓度比值呈负相关;与IL-12/IL-10、CCL2比值呈正相关。结论同种异体MSC移植治疗SLE可降低患者外周血中OAZ信号通路相关基因表达,同时减低多种细胞因子及ANA水平,推测OAZ信号通路可能是MSC移植治疗SLE的有效机制之一。
李荣良
黄静
王丹丹
孙凌云
冯学兵
关键词:
间质干细胞移植
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