国家高技术研究发展计划(2006AA02Z241)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 相关作者：沈寅初郑裕国吴玉峰王宝峰更多>>
- 相关机构：浙江工业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 产S-酰胺酶培养基统计学筛选与响应面优化被引量：3
- 2008年
- 利用Design Expert软件中的两水平实验设计和响应面法,对发酵生产S-酰胺酶(可用于拆分2,2-二甲基环丙甲酰胺外消旋体)的培养基进行了优化。采用Plackett-Burman(PB)设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价并筛选出了有显著效应的葡萄糖、酵母粉及2,2-二甲基环丙甲酰胺浓度,其他因素对酰胺酶产量的影响不显著。然后用旋转中心组和实验设计及响应面分析确定了主要影响因素的最佳条件,在优化的培养基中,酰胺酶产量达到168 U/L,比优化前的80 U/L提高了110.0%。
- 王宝峰郑裕国沈寅初
- 关键词：PLACKETT-BURMAN设计
- 2,2-二甲基环丙腈水合酶产生菌的氮离子注入选育及突变株产酶条件研究被引量：8
- 2007年
- 离子注入技术被广泛应用于微生物的品种改良。利用N+离子注入法对本实验室筛选并保藏的产2,2-二甲基环丙腈水合酶菌种Pseudomonas sp.ZJUT0509进行选育,以提高2,2-二甲基环丙甲酰胺的产量,为进一步的手性拆分提供更多的原料。结果表明,氮离子注入诱变Pseudomonas sp.ZJUT0509的存活率曲线符合离子注入诱变的"马鞍型"特征曲线。通过离子注入获得的突变株的腈水合酶活性有显著提高,其中突变株F60-4的酶活达30.1 U·mL-1,约为原始菌株的9倍。对突变株F60-4进行产酶条件的优化考察,获得了培养条件。F60-4菌株产酶的最佳碳源是葡萄糖(2g·L-1),最佳氮源是酵母粉(10g·L-1),最适初始pH值为6.5,最适发酵温度为20℃,最佳诱导剂为1.0g·L-1的己内酰胺。与原始菌株Pseudomonas sp.ZJUT0509相比,突变株F60-4对有机氮源的利用率更高。最佳诱导剂由己内酰胺代替了原来的2,2-二甲基环丙甲腈,使实验操作简便。突变株F60-4的发酵周期为36h,比原始菌株缩短了12h。
- 吴玉峰郑裕国沈寅初
- 关键词：氮离子注入腈水合酶
