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siRNA抑制HPV16E6基因对鼻咽癌细胞生物学特性的影响被引量：4: 2008年; 目的通过RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术干扰E6癌基因的表达,探讨小干扰RNA(small interferirngRNA,siRNA)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HNE-1细胞生物学特性的影响。方法针对人乳头瘤病毒(humanpapilloma vinus,HPV)16 E6基因设计合成4条siRNA,利用lipofectamineTM2000脂质体转染鼻咽癌HNE-1细胞。通过半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western blot检测转染后细胞E6 mRNA和蛋白变化,采用MTT检测转染后癌细胞的生长增殖情况,流式细胞仪PI染色法检测细胞的凋亡率。结果转染有效siRNA后,PT-PCR及Western blot结果显示,HNE-1细胞E6基因mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为66.3%、56.7%。MTT法检测显示,细胞的生长增殖受到明显抑制。流式细胞仪检测细胞凋亡,发现凋亡率增加。结论siRNA可以有效干扰鼻咽癌HNE-1细胞内HPV16E6基因的表达,从而诱导肿瘤细胞的凋亡。; 沈娜张潜英陈鸿雁余晓燕叶琳; 关键词：SIRNA HPV16E6 RNAI 鼻咽癌

抗肿瘤药物与TRAIL联用对喉癌HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响被引量：4: 2008年; 目的探讨化疗药物顺铂(DDP)、5氟尿嘧啶(5-Fu)单独及与TRAIL联合对HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响。方法MTT法检测其增殖抑制作用,FCM法检测细胞凋亡率。结果TRAIL与5-Fu、DDP联合作用于HEP-2细胞株时,其抑制率、凋亡率高于单独作用时的抑制率和凋亡率。结论TRAIL与5-Fu、DDP联合作用有协同抑制HEP-2细胞株增殖、诱导HEP-2细胞株凋亡的作用。; 余晓燕叶琳沈娜张潜英陈鸿雁; 关键词：TRAIL DDP 5-FU HEP-2细胞株喉癌

人乳头瘤病毒16E6基因沉默对鼻咽癌细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响被引量：4: 2009年; 目的观察针对人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16E6基因的RNA干扰(RNA interfering,RNAi)对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HNE-1细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响,探讨HPV16E6基因作为鼻咽癌基因治疗标靶的可行性。方法根据基因库上的HPV16E6mRNA序列,设计合成针对HPV16E6的siRNA,转染HNE-1细胞,采用RT-PCR及Westernblot分析E6基因的表达,利用侵袭实验检测细胞的侵袭能力,MTT法检测细胞的生长增殖,流式细胞术检测细胞周期。结果针对HPV16E6的siRNA下调鼻咽癌HNE-1细胞株E6mRNA和蛋白表达水平,分别下调66.3%、56.7%(P<0.05);侵袭实验结果显示,siRNA转染组的穿膜细胞数为(45.3±4.0),显著低于阴性对照组[(147.7±4.7),P<0.05];转染组细胞的增殖受到抑制,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术显示细胞阻滞于G0/G1期。结论siRNA可以有效干扰鼻咽癌HNE-1细胞内HPV16E6基因的表达,进而影响HNE-1细胞的侵袭转移能力,并抑制肿瘤细胞的生长增殖,使细胞周期重新分布。; 沈娜张潜英余晓燕叶琳陈鸿雁; 关键词：小干扰RNA 人乳头瘤病毒16 E6 细胞周期

TRAIL联合5氟尿嘧啶诱导喉癌细胞株的凋亡: 2009年; 目的探讨TRAIL与化疗药物5氟尿嘧啶(5-FU)单独和联合对喉癌HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响并探讨其可能机制。方法不同浓度的TRAIL、5-FU单独及联合作用于HEP-2细胞株,MTT法检测其增殖抑制作用,FCM法检测细胞凋亡率,荧光显微镜下观察细胞形态,Western blot法检测c-FLIP、NF-κB蛋白的表达。结果TRAIL与5-FU联合作用于HEP-2细胞株时,其抑制率、凋亡率较单独作用时高,c-FLIP、NF-κB蛋白的表达水平低于单独作用时的表达水平。结论TRAIL与5-Fu联合作用有协同诱导HEP-2细胞株凋亡的作用,可能机制为下调c-FLIP、NF-κB蛋白的表达水平。; 余晓燕张潜英沈娜叶琳邓碧陈鸿雁; 关键词：TRAIL 5-FU HEP-2细胞株

siRNA抑制鼻咽癌HNE-1细胞株HPV16 E6的表达和细胞增殖被引量：2: 2008年; 目的:探讨小干扰RNA(Small interferirng RNA,siRNA)对鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)HNE-1细胞株HPV16E6基因表达的抑制作用,观察HPV16E6基因沉默对鼻咽癌细胞生长的影响。方法:体外合成4条针对HPV16E6基因的siRNA,通过脂质体转染导入鼻咽癌HNE-1细胞。用MTT检测转染后癌细胞的生长增殖情况,用半定量逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测转染后HPV16 E6 mRNA的表达水平,用免疫组化技术检测鼻咽癌细胞中HPV16 E6蛋白的表达水平。结果:导入有效siRNA后,MTT实验显示细胞的生长增殖受到明显抑制,抑制率可达32%;PT-PCR及免疫组化结果显示RNA干扰(RNA interfering,RNAi)可使HNE-1细胞中HPV16 E6 mRNA水平及蛋白表达水平下降。结论:siRNA可以有效抑制HNE-1细胞株中HPV16 E6的表达,降低鼻咽癌细胞的增殖能力。RNAi技术作为一种新的基因治疗技术在鼻咽癌治疗方面有着巨大的应用潜力。; 沈娜张潜英余晓燕叶琳陈鸿雁; 关键词：SIRNA HPV16 E6 鼻咽癌基因沉默逆转录聚合酶链反应

靶向FAK的siRNA对喉癌细胞增殖及侵袭能力的抑制作用被引量：5: 2009年; 目的运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断喉癌Hep-2细胞株中FAK基因的表达,探讨FAK基因沉默后对Hep-2细胞株产生的影响。方法针对FAK基因,构建2条干扰重组质粒FAK-pGenesil-CH1和FAK-pGen-esil-CH2,1条阴性对照重组质粒FAK-pGenesil-HK;在脂质体的介导下转染喉癌Hep-2细胞株,用RT-PCR和Western blot分析FAK mRNA及蛋白的表达;MTT法、流式细胞技术及体外侵袭实验测定干扰重组质粒对Hep-2细胞株的增殖、侵袭能力的影响。结果重组质粒能有效地阻断Hep-2细胞株中FAK基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P<0.05);重组质粒转染Hep-2细胞后,细胞增殖抑制率分别为58.34%、52.78%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);干扰组G0～G1期细胞增多,S期细胞数量明显减少(P<0.05);FAK-pGenesil-CH1、FAK-pGenesil-CH2作用Hep-2细胞株48h后,Hep-2细胞穿过Matrigel膜的个数分别为(56.0±6.7)、(51.0±5.1),与阴性对照组(152.0±9.4)、正常对照组(139.0±8.1)比较有统计学差异(P<0.05)。结论干扰重组质粒能有效地抑制转染Hep-2细胞株的FAKmRNA及蛋白的表达,并能抑制Hep-2细胞株的增殖及侵袭能力。; 张潜英叶琳余晓燕沈娜邓碧吴晓松陈鸿雁; 关键词：FAK SIRNA HEP-2细胞株增殖

化疗药物联合TRAIL对鼻咽癌细胞株增殖抑制的实验研究被引量：1: 2009年; 目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis indncing ligmard,TRAIL)联合化疗药物顺铂(Cisplatin,DDP)、5氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)作用于鼻咽癌HNE-1细胞株后对其细胞毒作用及凋亡影响的研究。方法:MTT法检测其增殖抑制率,FCM法检测细胞凋亡率。结果:TRAIL与DDP、5-FU联合作用于HNE-1细胞株时,其抑制率、凋亡率高于单独作用时的抑制率和凋亡率。结论:TRAIL与5-FU、DDP联合作用有协同抑制HNE-1细胞株增殖、诱导HNE-1细胞株凋亡的作用。; 余晓燕邓碧沈娜叶琳张潜英陈鸿雁; 关键词：TRAIL DDP 5-FU

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重庆市卫生局科研项目(07-1-021)