河南教育厅自然科学研究计划项目(2011B180019)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 禽多杀性巴氏杆菌基因组表达文库的构建及其免疫效果被引量：1
- 2013年
- 以限制性内切酶Sau3AⅠ酶切禽多杀性巴氏杆菌基因组DNA,回收500～3000bp的DNA片段,连接真核表达载体pcDNA3.1(+),电转化于大肠杆菌感受态细胞TG1中,构建禽多杀性巴氏杆菌的基因组表达文库。将文库随机分为5个子文库(子文库Ⅰ-子文库Ⅴ),分别提取各子文库重组质粒,以pcDNA3.1(+)和PBS为对照进行动物试验,每组16只BALB/c小鼠,各子文库组和pcDNA3.1(+)组以100μg/只的剂量肌注免疫,PBS组每只小鼠肌注100μL 1×PBS,各组均免疫3次,每次间隔2周。间接ELISA检测免疫小鼠的血清抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,三免2周后检测脾淋巴细胞IFN-γ的分泌情况。强毒攻击,计算小鼠的相对保护率。结果显示,动物免疫后子文库Ⅰ组质粒免疫的小鼠血清抗体水平及淋巴细胞增殖水平和IFN-γ分泌水平均持续上升,明显高于其他各组(P<0.05)。动物攻毒试验表明,各子文库组的重组质粒均可为免疫小鼠提供一定的保护,其中第Ⅰ组的保护效果最好,说明子文库Ⅰ组中含有较好的保护性抗原基因,这为进一步筛选相关的免疫原基因和研制新型疫苗奠定了的基础。
- 宫强程茗牛明福秦翠丽孙晓菲
- 关键词：禽多杀性巴氏杆菌免疫效果
