国家重点基础研究发展计划(001CB510103)
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 相关作者：王兴兵黄士昂刘隽郑金娥孙自敏更多>>
- 相关机构：华中科技大学安徽省立医院美国犹他大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 急性髓细胞性白血病细胞培养上清对树突细胞分化、成熟、凋亡及功能的影响被引量：10
- 2007年
- 背景与目的:树突细胞(dendritic cell,DC)在机体抗瘤免疫中起重要作用。研究已表明肿瘤患者和荷瘤动物体内DC功能受损并伴有DC数量的降低。最近的研究提示这种DC功能的受损可能是肿瘤细胞分泌的可溶性因子介导的免疫抑制所致。本研究拟观察急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞分泌的可溶性因子对单核细胞来源DC的分化、成熟、凋亡及其功能的影响。方法:原代AML细胞培养24h后收集上清。在含有或不含有AML细胞培养上清的培养液中,利用IL-4和GM-CSF刺激单核细胞分化成不成熟DC(immature DC,iDC),IL-1β、IL-6、TNF-α和PGE-2促进DC成熟。流式细胞仪检测DC表型和凋亡率的变化。计算前体细胞频率(precursor frequency,PF),观察DC对异基因CD4+T细胞和CD8+T细胞的刺激功能。结果:AML细胞培养上清可显著抑制DC表面协同刺激分子CD80和CD86的表达,并可降低促成熟细胞因子对DC的促成熟作用。同时,与对照组相比,AML细胞培养上清可显著诱导DC的凋亡,凋亡率分别为(15.1±4.2)%和(29.4±9.5)%(P<0.01)。相对于正常成熟DC,AML细胞培养上清诱生的DC对异基因CD4+T细胞和CD8+T细胞的刺激功能显著降低(P<0.01),其中CD4+T细胞的前体细胞频率分别为(5.2±1.6)%和(1.8±0.5)%,CD8+T细胞的前体细胞频率分别为(6.5±2.0)%和(2.1±0.6)%。结论:AML细胞分泌的可溶性因子可抑制DC的发育和功能。
- 王兴兵刘隽吴竞生孙自敏黄士昂
- 关键词：CD4^+T细胞CD8^+T细胞凋亡
- 人脐血CD34^+ CD38^-细胞免疫表型和染色体核型特征分析被引量：1
- 2005年
- 目的分离脐血干/祖细胞(CD34+CD38-)进行体外长期培养,观察分析其增殖、细胞表面分子标志和染色体核型的特征。方法用流式细胞仪分选CD34FITC和CD38PE标记的CD34+CD38-脐血原始细胞,在含细胞生长因子IL3、IL6、GMCSF、EPO、SCF和胰岛素样生长因子的干细胞培养基中培养6个月,用流式细胞术检测体外培养30d的干/祖细胞表面标记,并用G显带方法分析其染色体核型。结果在一定培养条件下,经7～12d培养,脐血干/祖细胞(CD34+CD38-)开始增殖。培养6个月后,每孔接种1个细胞,细胞数增殖至250～350个;每孔接种10个细胞,细胞数可增殖至400～500个。每孔接种1个细胞其细胞增殖峰持续时间(8～9代)比接种10个细胞(6～7代)长。经体外长期培养增殖,细胞仍强烈显示干/祖细胞表面分子标记(CD34+CD38-);细胞染色体数目、结构未见异常。结论脐血干/祖细胞(CD34+CD38-)经体外特异性培养增殖,可为大量脐血干/祖细胞移植提供细胞来源。
- 田虹郑金娥龚非力王兴兵黄士昂陈忠
- 关键词：人脐血染色体核型造血干细胞
- 急性髓细胞性白血病细胞培养上清对CD4^+和CD8^+ T细胞增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2006年
- 为了研究不同的急性髓细胞性白血病(AML)细胞株培养上清对CD4+和CD8+T细胞增殖以及凋亡的影响,探讨AML的免疫抑制的形成机制,将3种AML细胞株(HL-60、NB4和U937)培养上清和普通培养液按不同比例混合,用于培养CFSE染色的淋巴细胞。抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激3天后,标记7AAD和相应荧光抗体。利用流式细胞术检测不同T细胞亚群CFSE荧光强度和7AAD表达率的变化,分析其增殖和凋亡变化情况。结果表明:3种AML细胞株中有2种(HL-60和NB4)培养上清可显著抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞的增殖,并随浓度增加而增强。同样,HL-60和NB4细胞株培养上清亦可抑制刺激后的CD4+T细胞的凋亡,但对刺激后的CD8+T细胞的凋亡并无明显影响。相反,HL-60和NB4细胞株培养上清可显著增加增殖的CD8+T细胞的凋亡。结论:AML细胞株培养上清液对CD4+T细胞和CD8+T细胞增殖的抑制以及对增殖的CD8+T细胞凋亡的诱导作用,可能是AML患者免疫功能缺陷的机制之一。
- 王兴兵刘隽贺艳丽谷俊侠郑金娥姚军霞杨晶李小青黄士昂
- 关键词：急性髓细胞性白血病CD4^+T细胞CD8^+T细胞
