国家自然科学基金(30770640)
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
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- RNA干涉治疗脑胶质瘤的研究进展
- 2007年
- RNA干涉（RNAi）是由双链RNA引发序列特异性的转录后基因沉默。RNA干涉（RNAi）技术的出现为胶质瘤基因治疗的研究提供了新的策略。在研究过程中，不断有新的可能用于RNAi治疗脑胶质瘤的靶标基因被发现，其治疗脑胶质瘤作用主要通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、导致肿瘤细胞周期阻滞或增加肿瘤细胞化疗敏感性的机制来实现。
- 李峰生陈肖华
- 关键词：脑胶质瘤细胞增殖细胞周期辐射耐受性RNA干涉
- ErbB2 RNAi对脑胶质瘤U251细胞活性氧含量和DNA损伤的影响
- 2011年
- 目的探讨ErbB2 RNAi对脑胶质瘤U251细胞活性氧含量、DNA损伤以及细胞周期的影响。方法利用构建好的ErbB2 RNAi载体(pSilencer2.1-ErbB2)转染U251细胞后,检测不同时间点细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平;同时利用单细胞凝胶电泳(SCGE)方法,检测不同时间点细胞内DNA损伤;利用PI单染检测不同时间点细胞周期分布情况。结果 U251细胞转染pSilencer2.1-ErbB2后,对细胞内ROS水平无显著性影响;U251细胞在转染psilencer2.1-ErbB2后24h时,MDA水平无显著变化,而在48h时显著性升高,72h时又恢复到正常水平;同时,U251细胞转染pSilencer2.1-ErbB2后发生DNA损伤并很快修复;ErbB2的表达抑制可引发细胞周期各时相发生紊乱。结论 U251细胞ErbB2 RNAi后,细胞内氧化还原状态发生改变,同时伴有DNA的损伤与修复以及细胞周期阻滞。
- 高玲李峰生董波陈肖华
- 关键词：ERBB2MDA单细胞凝胶电泳
- STAT3 RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3（STAT3）的小干扰RNA（siRNA）表达载体并检测联合^60Coγ射线照射对U251细胞STAT3表达及细胞增殖的抑制作用。方法设计、合成STAT3特异性的19bD短链寡核苷酸，经退火形成双链DNA片段，克隆到pSilence2．1-U6-H1载体中，构建STAT3特异siRNA的表达载体，HindⅢ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体。并转染U251细胞，免疫印迹法（Western blot）检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平，四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测细胞增殖活性，克隆形成率及MTT实验确定放疗剂量。结果经双酶切与测序鉴定成功构建pSilence2．1-STAT3表达载体，转染星形胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞中STAT3蛋白的表达水平；确定2Gy为放疗剂量。转染pSilence2．1-STAT3。细胞增殖活性较未转染U251细胞显著降低（P〈0．05），联合^60Coγ射线照射U251细胞增殖活性单独转染进一步显著降低（P〈0．05）。结论运用pSilence2．1-U6-H1载体构建的pSilence2．1-STAT3表达载体可有效抑制STAT3的表达及星形胶质瘤细胞的增殖；联合2Gy ^60Coγ射线照射可增加抑制效果。
- 高玲李峰生董波张军权饶亚岚王治东丛悦毛秉智陈肖华
- 关键词：小干扰RNA转录激活因子3U251细胞
- 脑胶质瘤治疗新策略——STAT3 RNA干扰结合传统放疗
- 2008年
- STAT3基因是近年来发现的凋亡抑制基因,具有抑制凋亡和参与细胞周期调控的双重功能。研究报道证明,在基础和临床实验中STAT3基因与放、化疗的敏感性有着密切的关系。因而目前研究关注于以STAT3基因为靶点的基因治疗,尤其是RNA干扰技术抑制STAT3基因的表达,增加肿瘤的自发性凋亡和放、化疗诱导的凋亡,抑制肿瘤生长,提高肿瘤对放、化疗的敏感性。
- 高玲陈肖华毛秉智
- 关键词：胶质母细胞瘤STAT3基因RNA干扰细胞周期阻滞基因疗法
- ErbB2 RNA干扰联合^(60)Co γ照射对U251细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2007年
- 构建特异性抑制白血病病毒致癌基因同源体2(ErbB2)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并检测联合^(60)Coγ照射对U251细胞增殖抑制及促进凋亡作用。设计、合成ErbB2特异性的19bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到Psflence2.1-U6-H1载体中,构建ErbB2特异siRNA的表达载体,HindⅢ和BamHI双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,四甲基偶氮唑盐法(Methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT)检测细胞增殖活性,Hoechst 33258染色,Annexin-(?)检测细胞凋亡情况。经双酶切与测序鉴定成功构建ErbB2-siRNA表达载体,转染星型胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞增殖活性(p<0.05),并诱导细胞产生时间依赖性凋亡,24h凋亡细胞百分比增加10.52%,48h凋亡细胞百分比增加50.65%。联合^(60)Coγ照射U251细胞增殖活性较单独转染进一步显著降低(p<0.05)。运用Psilence2.1-U6-H1载体构建的ErbB2-siRNA表达载体可有效抑制U251细胞增殖并促进时间依赖性细胞凋亡;联合^(60)Coγ照射可增加增殖抑制效果。
- 高玲李峰生陈肖华董波张军权饶亚岚丛悦毛秉智
- 关键词：小干扰RNAU251细胞
