广东省自然科学基金(10251008901000013)
- 作品数：8 被引量：50H指数：2
- 相关作者：黄曦张萍吴思宇何莉何军芳更多>>
- 相关机构：中山大学中山医学院广东省结核病控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 血管内皮细胞生长因子在抗结核免疫中的作用及机制被引量：2
- 2012年
- 【目的】探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)对巨噬细胞抗结核免疫作用的影响。【方法】为了研究VEGF与结核病(TB)之间的相关性,分离健康人和肺结核病人的外周血单核细胞(PBMC),Real-time PCR检测VEGF的表达水平;体外实验中,用卡介苗(BCG)感染佛波酯(PMA)诱导分化的THP-1细胞,PCR检测VEGF的表达水平。进一步探讨VEGF在抗结核免疫中的作用,分别用BCG单独处理或BCG与VEGF共同处理THP-1诱导分化的细胞,Real-time PCR检测促炎因子TNF-α,IL-6,IFN-γ,MIP-2的表达水平;Griess法检测培养上清中一氧化氮(NO)的产生。【结果】肺结核病人的PBMC中VEGF表达水平相对于健康人明显升高。BCG感染THP-1诱导分化的巨噬细胞后,VEGF表达水平上调;VEGF显著增强BCG感染的巨噬细胞中TNF-α,IL-6,IFN-γ,MIP-2的表达和NO的产生。【结论】肺结核病人的PBMC和BCG感染的巨噬细胞中VEGF表达均显著上调,并可能通过影响促炎因子和NO的产生调节巨噬细胞的抗菌活性,提示VEGF可能是治疗结核病的一个靶点。
- 黄春宇尹琳何军芳陈涛周琳钟球张萍黄曦
- 关键词：血管内皮细胞生长因子结核分枝杆菌巨噬细胞促炎因子一氧化氮
- TREM-1在细菌性化脓性角膜炎中的作用及其分子机制被引量：5
- 2012年
- 【目的】探讨髓样细胞诱发受体1(TREM-1)在铜绿假单胞菌(PA)感染角膜炎中的作用及其分子机制。【方法】为了揭示TREM-1在细菌性角膜炎中的作用,我们建立了PA角膜炎小鼠模型和PA感染的腹腔巨噬细胞模型,real-timePCR和免疫荧光法检测感染前后TREM-1的表达水平;用丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的抑制剂或磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂预处理巨噬细胞,再用脂多糖(LPS)和TREM-1活化抗体刺激,real-time PCR检测IL-1β、MIP-2、TNF-α和IL-6等促炎因子的表达水平,进一步探讨TREM-1调控PA角膜炎的分子机制;用Th1细胞因子IFN-γ或者Th2细胞因子IL-4、IL-10刺激巨噬细胞,real-time PCR检测Th1/Th2细胞因子对TREM-1表达的调控。【结果】PA感染的C57BL/6小鼠角膜中TREM-1表达高于BALB/c小鼠;体外研究显示PA感染和LPS刺激均诱导TREM-1高表达;TREM-1通过MAPK和PI3K-Akt通路调节促炎因子生成;Th1细胞因子促进TREM-1表达,而Th2细胞因子不影响TREM-1的表达。【结论】PA感染上调TREM-1的表达,TREM-1通过调控Th1/Th2细胞因子的表达进一步放大炎症,导致角膜溃疡穿孔,这一发现可能为化脓性角膜炎的防治提供了新的理论依据。
- 聂鑫鑫朱敏李美玉苏家豪李海波刘畅吴敏昊黄曦
- 关键词：铜绿假单胞菌角膜炎TREM-1TH1/TH2
- 甘草属植物中三萜类化合物的抗病毒作用研究进展被引量：38
- 2013年
- 甘草为豆科甘草属植物,是我国重要的传统中草药,三萜类化合物是其主要活性成分之一。近年来,多种甘草属植物中的三萜类化合物被证明具有显著而广谱的抗病毒活性,成为抗病毒免疫研究的热点,并有望作为新型广谱抗病毒药物而被广泛应用于临床治疗中。本文综述了近年来国内外关于甘草酸、甘草甜素、甘草次酸及其衍生物等甘草属三萜类化合物的抗病毒作用研究进展,主要对该类化合物抗疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)、肝炎病毒、严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)冠状病毒、流感病毒等的作用进行简要综述。
- 蒲洁莹何莉吴思宇张萍黄曦
- 关键词：甘草三萜类化合物甘草酸甘草甜素甘草次酸抗病毒作用
- 登革病毒非结构蛋白NS4A的克隆表达及与其相互作用蛋白质的亲和纯化被引量：2
- 2013年
- 目的克隆表达登革病毒非结构蛋白NS4A，分离纯化与其相互作用的细胞蛋白。方法用特异性引物PCR扩增出FLAG—NS4A-HA基因片段，克隆至真核表达载体pSG5中，将重组质粒通过脂质体法瞬时转染入A549细胞，并通过Western blot检测NS4A融合蛋白的表达情况。利用串联亲和纯化系统（TAP）纯化分离与NS4A相互作用的蛋白，Western blot技术及银染SDS．PAGE验证NS4A蛋白复合物的纯化和分离情况。结果成功构建NS4A蛋白融合表达载体和FLAG、HA串联亲和纯化系统，SDS·PAGE和银染结果显示TAP系统分离得到了NS4A蛋白带和2条可能与NS4A相互作用的蛋白质片段。结论成功分离纯化与NS4A相互作用的细胞蛋白，为进一步研究机体抗登革病毒感染的机制奠定了基础。
- 夏君谢炯张佩芬李玉叶刘超黄曦张萍
- 关键词：登革病毒NS4A串联亲和纯化相互作用
- miR-146a对登革病毒诱导的炎性因子的负调控及机制研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨miR-146a对登革病毒感染过程中炎性因子产生的影响及其调控机制。方法建立过表达miR-146a的THP-1细胞模型,以Real-time PCR检测登革病毒诱导的炎性因子TNFα、IL-6、IL-12和IL-8的mRNA表达水平;采用Western blot方法检测细胞丝裂原蛋白激酶(MAPK)信号通路在登革病毒感染后不同时间点的激活情况;通过免疫荧光检测登革病毒感染后核因子κΒ(NF-κB)的核转位情况。结果 miR-146a过表达细胞在登革病毒感染后所表达的TNFα、IL-6、IL-12和IL-8等炎性因子mRNA水平明显下调;miR-146a过表达可明显抑制MAPK、NF-κB信号通路的激活。结论 miR-146a通过抑制登革病毒诱导的MAPK、NF-κB信号通路激活从而调控炎性因子产生。
- 王廷龙吴思宇李玉叶张萍黄曦
- 关键词：MIR-146A登革病毒炎性因子MAPKNF-ΚB
- MiR-146a在免疫反应中的调节作用被引量：1
- 2011年
- microRNA是一类非编码的小分子RNA,通过在转录后水平抑制蛋白的表达,在许多生理和病理进程中发挥重要作用。MiR-146a在固有免疫调节、炎症反应以及抗病毒中发挥重要作用。本文就最近对miR-146a在固有免疫、炎症应答、病毒感染和人类疾病等方面的研究进行了综述。研究显示,可能可以通过对miR-146a表达的调控来治疗一些人类疾病。
- 吴思宇何莉黄曦
- 关键词：MIR-146A固有免疫炎症应答病毒感染
- 登革病毒诱导人单核细胞VEGF的表达及机制
- 2012年
- 研究登革病毒(Dengue virus,DENV)感染对人单核细胞中血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelialgrowth factor,VEGF)表达的影响,并检测分析可影响VEGF表达的天然免疫信号通路。通过Real-time PCR检测,发现不同型DENV(DENV1、DENV2、DENV3)感染THP-1细胞均可诱导VEGF mRNA表达水平呈时间依赖性增加;而DENV2感染也可上调VEGF在原代单核细胞中的表达。通过RNAi技术沉默Toll样受体3(TLR3)及接头蛋白IPS-1,发现DENV感染诱导的VEGF表达明显下调;而ERK、JNK及NF-κB等信号通路的抑制也可下调VEGF的表达水平。本研究证明,DENV感染可诱导人单核细胞中的VEGF高表达,而VEGF高表达依赖于TLR3及IPS-1信号通路的激活,提示VEGF可能是治疗登革出血热的一个靶点。
- 何莉吴思宇王廷龙张萍黄曦
- 关键词：VEGF单核细胞天然免疫
- Toll样受体在慢性化脓性中耳炎和中耳胆脂瘤中的差异表达及其意义被引量：1
- 2012年
- 目的检测Toll样受体2（toll—likereceptor2，TLR2）和Toll样受体4（toll—likereceptor4，TLR4）在慢性化脓性中耳炎、中耳胆脂瘤中的表达，探讨其在慢性化脓性中耳炎和中耳胆脂瘤发病中的作用。方法选取耳硬化症患者（对照组）、慢性化脓性中耳炎患者（化脓性中耳炎组）、中耳胆脂瘤患者（中耳胆脂瘤组）各30例，应用实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）、蛋白质印迹法（Westernblot）、免疫组化检测TLR2／TLR4在正常外耳道皮肤，慢性化脓性中耳炎黏膜、肉芽组织，中耳胆脂瘤患者黏膜、肉芽组织及胆脂瘤囊壁中的表达，并比较表达程度的差异。结果@TLR2／TLR4mRNA及蛋白质在正常外耳道皮肤，慢性化脓性中耳炎中耳黏膜、肉芽组织，胆脂瘤的中耳黏膜、肉芽组织及胆脂瘤囊壁均有表达。@TLR2／TLR4mRNA及其蛋白质在慢性化脓性中耳炎及胆脂瘤黏膜中的表达均高于正常外耳道皮肤（P值均〈0．05），在胆脂瘤囊壁中的表达低于正常外耳道皮肤（P值均〈0．05），两组黏膜中TLR2／TLR4的表达差异无统计学意义（P值均〉0．05）。③TLR2／TLR4mRNA及蛋白质在两组中耳炎肉芽组织中的表达均高于正常外耳道皮肤（P值均〈0．01），且TLR2mRNA在中耳胆脂瘤肉芽组织中的表达高于慢性化脓性中耳炎（P〈0．05）。④TLR2／TLR4阳性细胞主要分布在肉芽组织中，且明显多于正常外耳道皮肤，但胆脂瘤囊壁中的阳性细胞少于正常外耳道皮肤。结论TLR2和TLR4在正常外耳道皮肤、慢性化脓中耳炎及中耳胆脂瘤中均有表达，提示中耳具有TLR2、TLR4参与调节的固有免疫系统，但二者的差异性表达也提示其在慢性化脓性中耳炎和中耳胆脂瘤的发病中所起的作用不同。
- 司瑜张志钢黄春宇何军芳冯炼强陈愈彬陈涛黄曦
- 关键词：TOLL样受体2TOLL样受体4
