山东省自然科学基金(Y2008C82)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：张翠生刘小方于绍平周先亭王在秋更多>>
- 相关机构：烟台毓璜顶医院青岛大学中国医科大学附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- p53-Bax线粒体凋亡通路DNA甲基化与胆管癌病理生物学的关系被引量：1
- 2010年
- 目的探讨p53-Bax线粒体凋亡通路抑癌基因启动子区的甲基化状态与胆管癌病理生物学行为的关系。方法采用甲基化PCR检测36例胆管癌患者癌组织和癌旁组织中抑癌基因甲基化诱导静止基因（TMS1／ASC）、死亡相关蛋白激酶（DAPK）和p14启动子区甲基化状态，并对p53基因外显子5～8进行DNA测序，分析以上基因的突变与胆管癌生物学行为的关系。结果24例（66．7％）胆管癌患者癌组织中至少有1个抑癌基因启动子区存在甲基化，p14、DAPK和TMS1／ASC的甲基化率分别为25％、30．6％和36．1％。5例（13．9％）患者的癌旁组织中存在抑癌基因启动子区甲基化，其中TMS1／ASC启动子区甲基化3例（8．3％），DAPK启动子区甲基化2例（5．6％）。DNA测序显示，22例（61．1％）胆管癌患者癌组织中p53基因外显子5～8存在突变。其中14例（38．9％）p53基因外显子突变伴1个以上抑癌基因启动子区甲基化，与胆管癌的病理类型、浸润深度、分化程度显著相关（P〈0．05）。抑癌基因非甲基化及p53突变阴性组（4例）术后1、2、3年的生存率分别为70％、43％、28％，抑癌基因甲基化及p53突变阳性组（14例）术后1、2、3年的生存率分别为28％、5％、0％，前者的生存率显著高于后者（X^2=9．060，P=0．03）。结论p53-Bax线粒体凋亡通路中抑癌基因启动子过甲基化是胆管癌组织中常见的分子事件，癌旁组织中TMS1／ASC和DAPK基因甲基化程度虽然较低，但可能对胆管癌有早期诊断意义。p53突变伴抑癌基因甲基化与胆管癌的病理生物学行为有关，趋向于较高的恶性程度和较低的生存率。
- 刘小方孙宪春于绍平孔凡民张翠生周先亭
- 关键词：胆管癌
- 5-氮-2-脱氧胞苷调控胆管癌p53-Bax线粒体凋亡通路DNA甲基化诱导化疗敏感性的研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷(DAC)对胆管癌细胞QBC939生长的影响及其机制。方法应用MTT法检测DAC对QBC939细胞存活率的影响,流式细胞仪观察细胞生长周期及凋亡率的变化,光镜及透射电镜观察细胞形态学改变;甲基化聚合酶链式反应检测DAC作用前后p53-Bax凋亡通路DNA甲基化变化;观察经DAC作用后5-氟尿嘧啶(5-Fu)对胆管癌细胞体内、外生长的影响。结果 DAC对QBC939细胞生长有抑制作用,经DAC处理后,电镜下细胞退变,有较多凋亡小体形成;DAC处理后胆管癌细胞凋亡率约43.04%,而未经DAC处理胆管癌细胞凋亡率仅为4.31%;未经DAC作用前p53-Bax凋亡通路中p14、DAPK抑癌基因甲基化,经DAC作用后p14、DAPK抑癌基因脱甲基化;DAC处理后增强了5-Fu对胆管癌细胞的凋亡率,裸鼠体内成瘤率下降,肿瘤体积减小。结论 DAC对胆管癌QBC939细胞的生长具有抑制作用,DAC对胆管癌QBC939细胞p53-Bax线粒体凋亡通路DNA甲基化的影响使细胞凋亡功能得以恢复,增强5-Fu对胆管癌化疗的敏感性并抑制肿瘤生长。
- 刘小方于绍平张翠生王在秋苏海龙周先亭
- 关键词：胆管肿瘤脱氧胞苷
- 5-氮-2-脱氧胞苷调控p53-bax凋亡通路DNA甲基化对胆管癌细胞生长的影响被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷（DAC或5-aza-dc）对胆管癌细胞QBC939生长的影响及其机制.方法 应用噻唑蓝（MTT）比色法检测DAC在不同浓度（0.1、0.5、1.0、5.0、25.0、100.0μmol/L）及不同时间（24、48、72 h）下对胆管癌细胞QBC939存活率的影响,透射电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪观察细胞生长周期及凋亡率的变化；甲基化聚合酶链反应检测DAC作用前后p53-bax凋亡通路DNA甲基化变化.结果 DAC对QBC939细胞生长的抑制有浓度和时间依赖性,其半数抑制率（IC50）为72h 5μmol/L 经DAC作用后电镜下胆管癌细胞凋亡增加 胆管癌细胞凋亡发生率由DAC处理前的4.31%上升至处理后的43.04% DAC作用前p53-bax凋亡通路中p14、DAPK抑癌基因甲基化,DAC作用后p14、DAPK抑癌基因脱甲基化.结论 DAC对胆管癌QBC939细胞的生长具有抑制作用,这一抑制作用是由于DAC脱甲基化造成的,DAC对胆管癌QBC939细胞p53-bax线粒体凋亡通路DNA甲基化的影响使细胞凋亡功能得以恢复.
- 刘小方姜宏张翠生于绍平王在秋苏海龙
- 关键词：胆管癌5-氮-2-脱氧胞苷脱噬作用
- DNA修复基因MGMT启动子区过甲基化在胆管癌中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨胆管癌组织中6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因的甲基化状态及其在胆管癌中的临床意义。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)和免疫组织化学法分析胆管癌组织中MGMT基因启动子甲基化状态及MGMT蛋白表达情况,并分析MGMT基因甲基化状态与临床病理特征的关系。结果 36例胆管癌组织中MGMT基因17例(47.2%)为甲基化阳性;MGMT蛋白阳性表达15例,阴性表达21例,21例MGMT蛋白阴性表达的胆管癌中MGMT甲基化阳性14例;15例MGMT蛋白阳性表达中MGMT甲基化阳性仅3例。MGMT蛋白表达与MGMT甲基化状态呈负相关(rs=-0.816,P<0.05)。MGMT基因的甲基化状态与胆管癌患者的肿瘤浸润深度、分化程度及TNM分期有关(P<0.05),但与患者的年龄、性别、病理学类型、淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论 MGMT基因启动子过甲基化是胆管癌组织中常见的分子事件,并可能与胆管癌发生有关,MGMT甲基化状态可以作为评价胆管癌恶性程度的一项指标。
- 刘小方孙宪春张翠生许政李绍军周先亭孙世杰
- 关键词：胆管癌甲基化特异性聚合酶链反应过甲基化
