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浙江省科技厅资助项目(2003C33009)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：常惠玉张行陈嘉曹江杨蓓蓓更多>>
相关机构：浙江大学医学院附属第二医院浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
发文基金：浙江省科技厅资助项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇定量聚合酶链...
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇荧光定量聚合...
  • 1篇质粒
  • 1篇实时荧光
  • 1篇实时荧光定量
  • 1篇实时荧光定量...
  • 1篇肿瘤
  • 1篇细胞
  • 1篇鳞状
  • 1篇鳞状细胞
  • 1篇酶链反应
  • 1篇聚合酶
  • 1篇聚合酶链反应
  • 1篇合酶
  • 1篇喉肿瘤
  • 1篇表皮
  • 1篇表皮生长因子

机构

  • 1篇浙江大学医学...
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 1篇杨蓓蓓
  • 1篇曹江
  • 1篇陈嘉
  • 1篇张行
  • 1篇常惠玉

传媒

  • 1篇中华耳鼻咽喉...

年份

  • 1篇2008
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
实时荧光定量聚合酶链反应测定表皮生长因子Ⅲ突变体表达的方法构建及其应用
2008年
目的构建含有表皮生长因子受体Ⅲ型突变体（epidermal growth factor receptor variant Ⅲ，EGFRvⅢ）的重组质粒，建立实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术测定EGFRvⅢ的标准曲线，以定量检测喉鳞癌组织中EGFRvⅢ的表达水平。方法以重叠延伸PCR法构建含EGFR第1外显子及第8至部分第9外显子的融合序列。再以融合序列为模板，以高特异性的引物扩增EGFRvⅢ的目的片段，构建含有EGFRvⅢ的重组质粒，进行测序鉴定。将此质粒作为标准品进行梯度稀释，以TaqMan探针实时荧光定量PCR进行检测，建立标准曲线。并以此技术对32例喉鳞癌组织中EGFRvⅢ mRNA表达水平进行测定。结果经测序鉴定，含EGFRvⅢ的重组质粒标准品构建成功，以不同稀释水平的标准品质粒进行荧光定量PCR扩增所得的标准曲线，可用于EGFRvⅢ定量分析。32例喉鳞癌组织中共有5例检测到EGFRvⅢ的表达，阳性率为15．6％。除1例癌旁组织中存在极少量的EGFRvⅢ表达外，EGFRvⅢ均在肿瘤组织中表达。结论用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术定量研究EGFRvⅢ的方法已构建成功，在喉癌组织中的成功运用已证明该方法切实可行，并且较为准确可靠。EGFRvⅢ在喉癌组织中有表达，但是阳性率及含量不高，是否能成为喉癌生物治疗的特异性攻击靶点尚待进一步探索。
杨蓓蓓张行陈嘉曹江常惠玉
关键词：表皮生长因子质粒聚合酶链反应喉肿瘤鳞状细胞
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