国家杰出青年科学基金(30100057)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- DVL-1 cDNA重组质粒在N2a细胞中的瞬时表达
- 目的将鼠dishevelled-1(DVL-1)cDNA重组质粒转染到培养的鼠成神经瘤细胞N2a,建立瞬时表达系统,为研究Wnt信号途径在阿尔茨海默病(AD)发病中的作用提供实验基础。方法用常规分子生物学方法扩增、纯化D...
- 王海红曲忠森张迎春王建枝
- 关键词：阿尔茨海默病WNT信号途径
- 文献传递
- β-连环素融合绿色荧光蛋白真核表达质粒的构建及表达
- 2006年
- 目的构建β-连环素融合绿色荧光蛋白真核表达质粒,为进一步研究-βcaten in在神经细胞内与其它蛋白质如tau、PS1的相互作用以及在阿尔茨海默病发病机制中的作用提供一种有用的工具。方法用亚克隆的方法将β-连环素基因插入到真核表达载体pEGFP-C1,重组质粒pEGFP-cat瞬时转染野生型鼠成神经瘤细胞株,并在荧光倒置显微镜下观察转染效率。结果酶切鉴定和测序结果证实编码-βcaten in的重组质粒构建成功,免疫荧光技术和免疫印记结果显示-βcaten in-GFP融合蛋白在真核细胞中获得表达。结论成功构建β-连环素融合绿色荧光蛋白真核表达质粒,并在鼠成神经瘤细胞中表达了-βcaten in-GFP融合蛋白。
- 张爱红徐雅飞王建枝
- 关键词：Β-CATENIN基因绿色荧光蛋白融合蛋白
- DVL-1 cDNA重组质粒在N2a细胞中的瞬时表达被引量：2
- 2004年
- 目的 将鼠dishevelled 1(DVL 1)cDNA重组质粒转染到培养的鼠成神经瘤细胞N2a ,建立瞬时表达系统 ,为研究Wnt信号途径在阿尔茨海默病 (AD)发病中的作用提供实验基础。方法 用常规分子生物学方法扩增、纯化DVL 1cDNA重组质粒 ,用紫外分光技术检测纯化质粒的纯度 ;用脂质体介导法将重组质粒转染入培养的鼠成神经瘤细胞N2a,用免疫印迹、免疫荧光法从蛋白质水平检测转染和表达效果。结果 质粒酶切电泳结果显示 :鼠DVL 1cD NA重组质粒PCS2 +MT MDVL1扩增和纯化成功 ,纯度达到要求 ;免疫印迹、免疫荧光结果显示外源鼠DVL 1cDNA重组质粒在鼠成神经瘤细胞N2a中获得表达 ,基因转染和表达率为 5 7 6 %。结论 成功将鼠DVL 1cDNA重组质粒转染到培养的鼠成神经瘤细胞N2a中 ,并获得瞬时表达。
- 王海红曲忠森张迎春王建枝
- 关键词：CDNA重组质粒N2A细胞肿瘤阿尔茨海默病
