中国博士后科学基金(2005038224) 作品数:16 被引量:92 H指数:7 相关作者: 唐涛 邢之华 罗杰坤 刘小娟 齐勇 更多>> 相关机构: 中南大学 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 湖南省重点学科建设项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
益气活血法对脑出血大鼠脑内TSP-1、TSP-2及其受体CD36表达的影响 被引量:10 2007年 目的观察益气活血法对脑出血大鼠脑内损伤区血管新生和凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)、凝血酶敏感蛋白-2(TSP-2)及其受体CD36表达的影响。方法胶原酶诱导建立大鼠脑出血模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、益气组、活血组、益气活血组,不同时间点灌注取脑,采用脑微血管银染法观察血管新生情况、免疫组化法观察各指标的表达情况。结果银染法益气活血组14~28d血肿周围及内部新生血管较其他各组多,35d可见血肿完全吸收,其他各组仍有较小血肿。TSP-1与TSP-2分别在造模后4、28d达高峰,CD36在造模后4、28d呈双峰表达。益气活血组4dTSP-1的表达高于模型组(P<0·01),4~7d下降明显,21dTSP-2的表达低于模型组(P<0·05),28d表达高于模型组(P<0·05)。结论益气活血法可能通过调整脑出血大鼠脑内TSP-1、TSP-2及其受体CD36的表达,降低其对血管新生的抑制作用,加快血肿吸收,促进脑组织修复。 齐勇 唐涛 罗杰坤 邢之华 张宗棨 虢灿杰 王玲 刘小娟关键词:益气活血 脑出血 凝血酶敏感蛋白 益气活血法对脑出血大鼠脑内血管内皮生长因子蛋白表达的影响 被引量:7 2008年 目的观察脑出血大鼠脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达,探讨益气活血法治疗脑出血的分子生物学机制。方法Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,分别以补阳还五汤及该方的拆方益气方和活血方灌胃,Western印迹法观察出血后1、4、7、14、21、28d鼠脑VEGF蛋白表达。结果模型组、益气组、活血组和益气活血组造模后1d均可检测到VEGF蛋白阳性信号,益气活血组于14d达高峰(P<0.01),早于其他3组(21d);益气活血组第7~28天均高于模型组、益气组、活血组水平(P<0.01)。结论脑出血大鼠脑VEGF蛋白表达上调;益气活血法能增强脑出血大鼠脑VEGF蛋白表达,促进VEGF峰值提前,并维持在较高水平,以促进脑出血损伤修复。 刘宜峰 邢之华 唐涛 阳鹤鹏 陈柏林关键词:益气活血法 脑出血 血管内皮生长因子 益气活血中药对脑出血大鼠脑组织促血管生成素-1蛋白表达的影响 被引量:6 2009年 目的:通过研究益气活血中药方剂对脑出血大鼠脑损伤区组织促血管生成素-1(Ang-1)表达的影响,探讨益气活血法治疗脑出血的作用机制。方法:155只SD大鼠被随机分为正常组5只,假手术组、模型组、益气活血组、益气组和活血组各30只。用Ⅶ型胶原酶诱导脑出血大鼠模型。各组相应灌服益气活血法代表方补阳还五汤全方及其益气组分、活血组分药物。各组于术后1、4、7、14、21和28d各取5只大鼠,采用Western blotting方法检测Ang-1的表达,结果进行光密度扫描半定量分析。结果:正常组及假手术组不同时间点Ang-1表达未见明显阳性信号;模型组、益气组、活血组及益气活血组脑出血后1d即有Ang-1表达,模型组至21d达到高峰,随后开始下降,益气组、活血组及益气活血组表达高峰时间提前至14d,活血组及益气活血组至21d仍维持一定的表达水平;各个时间点益气活血组表达均高于其他组。结论:益气活血中药可能通过使脑出血血肿周围脑组织Ang-1的表达增强,而促进脑出血损伤区血管新生和成熟,并促进脑出血大鼠神经功能的恢复。 阳鹤鹏 邢之华 唐涛 刘宜峰 陈柏林 刘清娥 吴汉军关键词:脑出血 促血管生成素-1 BLOTTING 益气活血法 补阳还五汤对脑出血大鼠脑内促血管生成素-1及其受体mRNA表达的影响 被引量:16 2008年 目的通过观察补阳还五汤对脑出血大鼠脑内损伤区促血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)及其内皮特异性受体(endothelial-specific receptor tyrosine kinase,Tie-2)mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤的作用机制。方法160只SD大鼠随机分为正常组(10只)、假手术组(60只)、模型组(60只)、补阳还五汤(BYHWD)组(30只),通过立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U建立脑出血模型。其中正常组自由饮水,假手术组和模型组灌服蒸馏水,BYHWD组灌服补阳还五汤。采用免疫组化方法检测假手术组和模型组1、4、7、14、21、28天各时间点Ang-1及其受体表达位置变化。运用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测正常组及其它各组造模术后1、4、7、14、21、28天各时间点Ang-1和Tie-2mRNA的动态变化。结果正常组和假手术组不同时间点Ang-1和Tie-2未见明显表达;模型组1-4天即有Ang-1/Tie-2阳性微血管段在血肿边缘表达,且从7天开始阳性微血管段逐渐伸入血肿区。模型组在脑出血术后1天Ang-1和Tie-2mRNA即有表达,到4天其表达仍然很微弱,与1天比较无明显的差异,随后两者表达逐渐增多,到28天时达到高峰(P〈0.05);补阳还五汤组在术后第7天开始两者的表达即显著高于模型组同-时间点水平(P〈0.05),且补阳还五汤组在术后21天即达到高峰(P〈0.01)。结论补阳还五汤能促进脑出血大鼠脑内Ang-1和Tie-2mRNA表达的上调,可能在脑出血后微血管系统重建过程中促进血管生成,从而促进损伤组织的修复。 周华军 唐涛 钟建华 罗杰坤 刘小娟 虢灿杰 杨期东 张海男关键词:脑出血 促血管生成素-1 受体 补阳还五汤 逆转录聚合酶链式反应 补阳还五汤对脑出血大鼠凝血酶敏感蛋白及受体mRNA表达的影响 被引量:5 2008年 目的观察补阳还五汤对凝血酶敏感蛋白(Thrombospondin,TSP)1和2及其受体CD36 mRNA在实验性脑出血大鼠脑内表达的影响,以探讨补阳还五汤治疗脑出血的机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组,采用胶原酶诱导建立大鼠脑出血模型,运用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcrip—tion—polymerase chain reaction,RT—PCR)观察脑出血后TSP-1、TSP-2和CD36 mRNA表达变化。结果在脑出血第4天,TSP-1表达达高峰;TSP-2在第14天表达达高峰;CD36在脑出血后第4天、第21天呈双峰表达。补阳还五汤组TSP—1 mRNA表达在第1~4天明显高于模型组(P<0.01);TSP-2 mRNA在第14天达高峰且第1~21天均高于模型组(P<0.05);CD36 mRNA第1~4天表达低于模型组(P<0.05),第14~21天明显高于模型组(P<0.01)。结论补阳还五汤能调节TSP-1、TSP-2和CD36 mRNA在脑出血后的表达而促进新生血管成形、成熟,有益于脑出血后损伤组织的修复。 钟建华 唐涛 张海男 周华军 齐勇 刘维 刘小娟 杨期东关键词:补阳还五汤 脑出血 凝血酶敏感蛋白 CD36 逆转录-聚合酶链反应 益气活血法对脑出血大鼠脑内凝血酶敏感蛋白-2表达的影响 被引量:1 2008年 目的观察益气活血法对脑出血大鼠脑内损伤区凝血酶敏感蛋白-2(TSP-2)的影响,探讨益气活血法治疗脑出血的机制。方法SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、益气活血组、益气组和活血组;采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,再对相应的组分别灌服补阳还五汤及该方的益气药和活血药,在不同的时间点取脑组织并用免疫印迹分析鼠脑TSP-2的表达。结果正常组和假手术组不同时间点TSP-2表达无明显变化;模型组TSP-2在脑出血后1d即开始表达,1~7d各时间点表达无明显差异,7~28d表达呈逐渐上升趋势,并在28d达高峰;益气活血组TSP-2表达14~21d时上升趋势较其它三组缓慢,在21d表达较其它三组弱,在28d表达较其它三组强。结论益气活血法有可能通过影响脑出血后损伤区TSP-2的表达,在受损脑组织进行血管重建的阶段,抑制TSP-2的表达,降低其对血管新生的抑制作用,延长血管新生的时间,并在血管重建后期上调TSP-2表达,抑制血管过度增殖,以保证整个血管新生过程的顺利和效率。 陈柏林 邢之华 唐涛 刘宜峰 阳鹤鹏 刘清娥 吴汉军关键词:脑出血 益气活血法 免疫印迹 益气活血法对脑出血大鼠脑内VEGF及其受体Flt-1和Flk-1 mRNA表达的影响 被引量:8 2007年 目的观察益气活血对脑出血大鼠脑内损伤区血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及其受体Flt-1mR-NA和Flk-1mRNA表达的影响,探讨益气活血法的作用机制。方法通过立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U建立脑出血模型。SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、益气活血组、益气组、活血组,分别灌服益气活血法代表方补阳还五汤全方及其益气组分、活血组分药物(剂量为临床70kg成人用量的3倍),运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测正常组及其它各组于造模术后1、4、7、14、21、28d各时间点VEGFmRNA、Flt-1mRNA和Flk-1mRNA的动态变化。结果正常组及假手术组不同时间点VEGFmR-NA、Flt-1mRNA和Flk-1mRNA均未见明显表达;模型组VEGFmRNA、Flt-1mRNA和Flk-1mRNA在脑出血后1d即开始表达,21d达到高峰,然后逐渐减弱;益气活血组VEGFmRNA、Flt-1mRNA和Flk-1mR-NA表达在7~21d明显高于其他各组,VEGFmRNA和Flk-1mRNA表达在术后14d达高峰,Flt-1mRNA在术后21d达高峰。结论益气活血法能促进脑出血大鼠脑内VEGFmRNA、Flt-1mRNA和Flk-1mRNA的表达而调整血管新生过程,可能是其促进组织修复的机制之一。 刘小娟 唐涛 罗杰坤 黄菊芳关键词:脑出血 益气活血 受体 逆转录聚合酶链式反应 脑出血大鼠脑组织膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达及益气活血中药的干预效应 被引量:3 2007年 目的:观察益气活血中药对脑出血大鼠脑组织中膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达量的影响,从脑出血损伤区微血管系统重建的角度,探讨益气活血中药治疗脑出血的作用机制。方法:实验于2006-03/10在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室完成。实验材料:补阳还五汤全方(黄芪,当归,赤芍,红花,川芎,地龙,桃仁按20∶3∶3∶3∶2∶3∶3的比例);补阳还五汤益气成分(黄芪按上述比例);补阳还五汤活血成分(当归,赤芍,地龙,川芎,桃仁,红花按3∶3∶3∶2∶3∶3的比例)。用蒸馏水两次水煎,分别浓缩为1.54,0.81和0.73g/mL。实验分组:155只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、益气活血组、益气组、活血组。正常对照组5只大鼠,其余每组30只,再随机分为术后灌胃2,4,7,14,21,28d6个观察时间点,各个时间点5只大鼠。实验干预:造模:采用立体定位技术将胶原酶Ⅶ注入大鼠大脑右苍白球制成脑出血大鼠模型。假手术组大鼠仅注入2μL生理盐水,其余手术过程相同。给药:正常对照组:普通饲养,自由饮水;假手术组和模型组术后予蒸馏水灌胃2次/d,2mL/次;益气活血组、益气组、活血组分别给予补阳还五汤全方、补阳还五汤益气成分、补阳还五汤活血成分30.80,16.20,14.60g/(kg·d)(按体表面积计算为临床70kg成人剂量的3倍)灌胃,2次/d,2mL/次。各组大鼠分别于灌胃2,4,7,14,21,28d麻醉下取脑,制备切片;正常组动物于28d处死。实验评估:免疫组织化学染色方法检测各组灌胃不同时间脑组织基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9和膜型基质金属蛋白酶的阳性微血管数。结果:155只大鼠均进入结果分析。①正常组、假手术组皮质偶见膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达。②模型组膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2呈双峰表达,4d为最高� 王玲 唐涛 罗杰坤 邢之华 杨期东 黄菊芳 齐勇 刘小娟关键词:益气活血法 脑出血 基质金属蛋白酶 益气活血法对脑出血大鼠脑内凝血酶敏感蛋白-1及其受体CD36表达的影响 被引量:12 2011年 目的通过观察益气活血法对脑出血大鼠脑内损伤区凝血酶敏感蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)及其受体CD36表达的影响,初步探讨益气活血法治疗脑出血的机制。方法将155只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、益气活血组、益气组和活血组;用Ⅶ型胶原酶诱导脑出血大鼠模型,再对相应的组分别灌服补阳还五汤及该方的益气药组和活血药组,在不同的时间点取脑组织并用免疫印迹(Western-blotting)分析鼠脑TSP-1及CD36的表达。结果正常组和假手术组不同时间点TSP-1和CD36表达无明显变化。模型组TSP-1在脑出血后4 d达高峰,CD36分别在脑出血后4、28 d达高峰。益气活血组1 d TSP-1表达低于模型组(P<0.01),4 d TSP-1和CD36表达均低于模型组(P<0.01),28 d CD36表达高于模型组(P<0.01)。结论益气活血法有可能通过影响脑出血后损伤区TSP-1及其受体CD36的表达,降低其对血管新生的抑制作用,促进新生血管成形、成熟和脑组织修复。 陈柏林 邢之华 唐涛 刘宜峰 阳鹤鹏 刘清娥 吴汉军关键词:脑出血 益气活血法 凝血酶敏感蛋白-1 免疫印迹 脑出血大鼠脑内Angiopoietin-1及其受体Tie-2表达的动态变化 被引量:4 2007年 目的:观察与微血管系统重建过程密切相关的促血管生成素(Angiopoietin-1,Ang-1)及其受体含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶-2(tyrosine kinase that contains immunoglobulin-like loops and epidermal growth factor-similar domains-2,Tie-2)在大鼠基底核脑出血后表达的动态变化。方法:用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,采用HE染色观察大鼠脑组织形态学改变,免疫组化法检测第1、2、4、7、14、21和28d血管生成素Ang-1和其受体Tie-2的表达,计数阳性血管作为观察指标。结果:HE染色显示正常组及假手术组各时间点取材未见血肿及局部明显病理学改变,而模型组第4d血肿周围出现微血管段,而后阳性微血管段表达逐渐持续增多,至第21d大量伸入血肿区;免疫组化研究显示正常及假手术组不同时间点Ang-1和Tie-2表达均未见明显变化,模型组大鼠在脑出血后第2d起Ang-1和Tie-2阳性微血管表达明显多于其他两组,而后表达逐渐升高(P<0.01),至21d达到高峰,随后开始下降,28d时仍有表达。结论:在脑出血后,损伤区Ang-1及其受体Tie-2的表达上调,可能通过调节血管生成过程而促进脑出血损伤区微血管系统重建。 虢灿杰 唐涛 罗杰坤 黄菊芳 杨期东 黎杏群 张宗棨 齐勇 张花先 易振佳关键词:脑出血 促血管生成素 受体