国家自然科学基金(30801182)
- 作品数：8 被引量：42H指数：5
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- 促红细胞生成素预处理对氧糖剥夺后星形胶质细胞水肿及AQP4表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinanthuman erythropoietin,rhEPO)预处理对氧糖剥夺并复氧培养后星形胶质细胞水肿及其水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达的影响。方法星形胶质细胞分成:正常组、模型组和rhEPO预处理组。星形胶质细胞在5 h时长的氧糖剥夺后复氧培养至0.5 h、2 h、8 h、24 h四个时间点时,用光镜观察细胞形态变化,用乳酸脱氢酶(LDH)漏出率测定反应细胞的损伤程度,用RT-PCR法及Western blot法测定AQP4的表达变化。结果光镜观察到rhEPO预处理能明显减轻氧糖剥夺后星形胶质细胞水肿的程度。氧糖剥夺后24 h时,LDH漏出率有明显增高(F=80.45,P<0.01),rhEPO预处理能明显降低(P<0.01)氧糖剥夺后LDH漏出率增高(P<0.01)的程度。AQP4的mRNA和蛋白在氧糖剥夺后的表达,各组间有明显差异(8 h时:mRNA:F=49.26,P<0.01,蛋白:F=43.13,P<0.01);与正常组相比,模型组AQP4在氧糖剥夺后短暂下降后呈上升趋势,至8 h时达峰值(均P<0.01),至24 h时未恢复正常水平;与模型组相比,rhEPO预处理组AQP4 mRNA和蛋白在氧糖剥夺后的表达变化趋势与模型组相似,但在各个时间点时的表达均明显降低(8 h时:mRNA:P<0.01,蛋白:P<0.01)。结论rhEPO预处理能明显减轻5 h氧糖剥夺后的星形胶质细胞水肿,机制可能是其通过降低氧糖剥夺后AQP4的表达水平而实现。
- 唐兆华廖正步支兴刚谢延风石全红何朝晖詹彦
- 关键词：促红细胞生成素水通道蛋白4细胞水肿氧糖剥夺
- 水通道蛋白4在缺氧缺糖后水肿星形胶质细胞中的作用被引量：5
- 2010年
- 目的探讨水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)在缺氧缺糖培养后水肿星形胶质细胞中的表达变化与作用。方法星形胶质细胞分为正常组和缺氧缺糖组,缺氧缺糖组细胞经过5h缺氧缺糖后恢复正常条件培养至0.5、2、8、24h和48h5个时间点时,用光镜观察细胞形态变化,RT-PCR及免疫荧光法测定AQP4的mRNA及蛋白的表达变化。结果①在缺氧缺糖后0.5h,细胞肿胀逐渐形成并继续加重,2h肿胀达到高峰,至8h和24h时肿胀逐渐消退,48h细胞基本恢复正常形态。②RT-PCR和免疫荧光检测:在缺氧缺糖后0.5h,AQP4mRNA和蛋白的表达均较正常组明显下降(P<0.05),2h回升,8h明显超过正常水平,达最高值(P<0.05),24h有所下降,但仍明显高于正常水平(P<0.05),至48h时mRNA和蛋白的表达均基本恢复正常水平。结论缺氧缺糖后星形胶质细胞水肿形成及消退期AQP4的不同表达变化可能都是细胞的一种自身保护机制,从而尽量维持细胞的正常形态和功能。
- 唐兆华廖正步蒋光元支兴刚石全红何朝晖詹彦
- 关键词：水通道蛋白4细胞水肿星形胶质细胞缺氧缺糖
- 氧糖剥夺、复氧后损伤星形胶质细胞中MMP-9的表达变化与意义被引量：2
- 2012年
- 目的通过观察金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在氧糖剥夺、复氧培养后损伤星形胶质细胞中基质的表达变化并抑制其活性,探讨其在氧糖剥夺、复氧后细胞损伤中的意义。方法将星形胶质细胞分为正常组、模型组和GM6001组。模型组细胞在无糖DMEM培养基,1%O2的培养条件下行3、5、7 h时长的氧糖剥夺后复氧至24 h。GM6001组细胞在5 h氧糖剥夺、复氧的过程中加入外源性基质金属蛋白酶抑制剂(GM6001,10μmol/ml),复氧至24 h。用RT-PCR测定不同时长氧糖剥夺后星形胶质细胞MMP-9 mRNA表达变化,ELISA法测定细胞培养上清液中MMP-9蛋白的浓度变化;用光学显微镜观察各组的细胞形态变化,LDH漏出率、CCK-8法检测细胞的损伤情况及存活率。结果①RT-PCR及ELISA法检测示:与正常组相比,氧糖剥夺、复氧后,模型组细胞MMP-9 mRNA表达量和细胞培养上清液中MMP-9蛋白的浓度均有所增加(P<0.05),随着氧糖剥夺时间的延长,均呈现不断上升趋势;②与正常组相比,氧糖剥夺、复氧后,模型组细胞明显损伤,随着氧糖剥夺时间的延长,细胞损伤加重,光镜下细胞出现明显肿胀,并有部分细胞呈凝固性坏死,LDH漏出率不断增高(P<0.01)、存活率则逐渐下降(P<0.05,P<0.01),且培养上清MMP-9蛋白浓度与细胞LDH漏出率的增高程度呈正相关(r=0.693,P<0.05);与模型组相比,5 h氧糖剥夺、复氧后,GM6001组细胞形态学损伤表现明显减轻,LDH漏出率水平也有明显下降(P<0.01),细胞存活率则显著上升(P<0.05)。结论 MMP-9过表达可能是氧糖剥夺、复氧后引起细胞损伤的重要因素之一。
- 唐兆华廖正步谢延风石全红何朝晖詹彦
- 关键词：基质金属蛋白酶-9星形胶质细胞
- rhEPO对预处理低氧损伤胶质细胞MMP-9表达的影响被引量：2
- 2010年
- 探讨人促红细胞生成素(rhEPO)对低氧损伤胶质细胞的影响及对金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。通过体外纯化培养第3代星形胶质细胞,将其分为正常组、低氧组、rhEPO预处理组;以四唑蓝(MTT)比色法测定低氧培养12、24、36h细胞的存活率,倒置显微镜和透射电镜观察低氧对胶质细胞形态的影响;免疫荧光和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法研究低氧对星形胶质细胞MMP-9表达的影响。结果显示:低氧组星形胶质细胞在低氧培养下出现细胞肿胀,且随时间的延长而加重,rhEPO预处理组在各时间点细胞肿胀明显轻于低氧组。rhEPO能减轻细胞超微结构的改变及降低MTT比值。RT-PCR及免疫荧光检测表明:低氧组MMP-9mRNA及蛋白的表达在低氧各时间点均高于正常组,在24h达到最高,在36h开始降低(P<0.05);rhEPO预处理组MMP-9mRNA及蛋白的表达变化在12、24、36h较低氧组低(P<0.05)。由此得出结论:rhEPO通过抑制MMP-9的表达促进低氧条件下星形胶质细胞的存活。
- 蒋光元廖正步唐兆华支兴刚石全红詹彦
- 关键词：促红细胞生成素胶质细胞低氧损伤基质金属蛋白酶-9
- P38信号通路在星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后水通道蛋白4表达及细胞水肿形成中的作用被引量：7
- 2012年
- 目的探讨P38信号通路在星形胶质细胞氧糖剥夺,复氧后水通道蛋白4表达及细胞水肿形成中发挥的作用。方法原代培养的星形胶质细胞分为正常组,模型组和P38抑制剂组。模型组:细胞接受5 h氧糖剥夺/复氧处理;P38抑制剂组:细胞在5 h氧糖剥夺后的复氧过程中加入P38抑制剂(SB203580,10μmol/L)处理。在5 h氧糖剥夺/复氧后的不同时间点,用RT-PCR及Westem blotting法测定P38、磷酸化P38及水通道蛋白4(AQP4)的表达变化,光镜观察细胞形态变化,乳酸脱氢酶测定反应细胞损伤程度。结果与正常组相比,星形胶质细胞在5 h氧糖剥夺/复氧后,其磷酸化P38的水平明显上升,并在复氧lh时达到峰值(P<0.01),AQP4 mRNA和蛋白的表达也明显升高(P<0.01),同时细胞水肿在氧糖剥夺/复氧后2 h时达到高峰,LDH漏出率也明显升高(P<0.01)。与模型组相比,加入P38抑制剂可明显降低5 h氧糖剥夺/复氧后P38磷酸化的水平(P<0.01),以及复氧后各时间点AQP4增高的水平(P<0.01),并可明显缓解氧糖剥夺/复氧后细胞水肿及LDH上升的程度(P<0.01)。结论 P38信号通路的激活参与了星形胶质细胞5 h氧糖剥夺/复氧后AQP4上调及细胞水肿形成,抑制p38的激活可降低AQP4表达的上调,减轻细胞水肿。
- 唐兆华廖正步谢延风石全红何朝晖詹彦
- 关键词：细胞水肿星形胶质细胞
- 血必净对大鼠创伤性脑损伤保护作用的初步研究被引量：8
- 2012年
- 目的探讨血必净对颅脑损伤的保护作用及机制。方法选取SD雄性大鼠108只,按随机数字表法分成假手术组、对照组、治疗组,每组36只,采用自由落体撞击伤方法制作创伤性脑损伤模型。治疗组大鼠伤后立即腹腔注射血必净4 mg/kg,每12小时重复1次。伤后24、72 h处死大鼠,用干、湿质量法测定脑含水量,测定MDA含量、SOD、GSH-Px活性及观察脑组织形态学改变。结果与假手术组比较,对照组、治疗组大鼠脑含水量、MDA含量均显著增高(P<0.01),SOD、GSH-Px活性显著下降(P<0.01);与对照组相比,治疗组大鼠脑含水量、MDA含量均显著下降(P<0.05),SOD活性显著增高(P<0.05)。结论血必净对大鼠创伤性脑损伤脑组织具有保护作用,其机制可能与减轻创伤后脑水肿、抑制氧自由基反应有关。
- 蒋涛廖正步但炜孙晓川谢延风王超周元国刘萍
- 关键词：血必净创伤性脑损伤丙二醛超氧化物歧化酶含水量
- 临床护理路径在慢性硬膜下血肿患者中的实施及效果评价被引量：1
- 2014年
- 目的探讨临床护理路径在慢性硬膜下血肿患者中的实施情况,并评价其临床效果。方法选择2012年3月至2013年9月重庆医科大学附属第一医院神经外科收治的49例慢性硬膜下血肿患者,随机分为路径组(24例)及对照组(25例)。路径组患者采用临床护理路径进行护理,对照组患者采用传统方法进行护理。比较两组患者的住院时间、住院费用、术后引流管拔管时间、术后拆线时间、术后并发症发生率及患者满意度等指标。结果路径组患者的住院时间、住院费用、术后引流管拔管时间、术后拆线时间[(7.68±1.35)d、(8 636.95±479.25)元、(2.08±1.54)d、(6.07±1.07)d]较对照组[(8.46±2.01)d、(9 318.19±390.84)元、(2.73±1.40)d、(7.38±1.62)d]明显减少,患者并发症发生率[12.5%(3/24)]明显低于对照组[20.0%(5/25)],患者满意度[95.8%(23/24)]显著高于对照组[88.0%(22/25)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论对慢性硬膜下血肿患者实施临床护理路径,不仅有助于降低平均住院费用和平均住院时间,而且可提高患者满意度,降低术后并发症发生率,值得临床推广应用。
- 严彩琼廖正步
- 关键词：护理工作
- p38信号通路对大鼠脑创伤后MMP-9的表达及脑水肿形成的影响被引量：14
- 2012年
- 目的观察并探讨阻断p38通路激活对大鼠脑创伤后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化及脑水肿形成的影响及意义。方法健康成年雄性SD大鼠130只,随机分为正常组10只,对照组40只:假手术处理;脑创伤组40只:制作改进式Feeney's脑创伤模型;p38抑制组40只:脑创伤前15 min股静脉注射p38抑制剂(SB203580,400μg/kg)。分别在脑创伤后2 h、2 d时断头取脑,采用RT-PCR法和Western blotting法检测脑组织P38磷酸化水平及MMP-9 mRNA及蛋白表达水平,Evans Blue法测定血脑屏障通透性变化;干湿比重法测定脑组织含水量。结果(1)与对照组相比,脑创伤组磷酸化p38的水平在伤后2 h明显上升;MMP-9 mRNA和蛋白在脑创伤后2 h未见明显差异(P>0.05),但2 d时表达均显著增高(P<0.01)。与脑创伤组相比,p38抑制组伤后2 h时p38磷酸化水平明显降低(P<0.01),MMP-9 mRNA和蛋白在创伤后2 d时的高表达也均有明显下降(P<0.05);(2)与对照组比较,脑创伤组血脑屏障通透性在创伤后2 h明显增加(P<0.05),2 d时出现继续升高(P<0.01);脑含水量在创伤后2 h无明显变化(P>0.05),在2 d时显著增加(P<0.01)。与脑创伤组相比,p38抑制组血脑屏障通透性及脑含水量在创伤后均有明显降低(P<0.05)。结论阻断p38通路激活可下调大鼠脑创伤后MMP-9高表达,减轻血脑屏障破坏及创伤性脑水肿,提示p38信号通路可通过调节MMP-9的表达变化在创伤性脑水肿中发挥重要作用。
- 唐兆华廖正步石全红谢延风何朝晖詹彦
- 关键词：脑水肿P38基质金属蛋白酶9创伤性脑损伤
