国家自然科学基金(30070661)
- 作品数：10 被引量：14H指数：2
- 相关作者：杨毅王卫平周小建魏东吴冰冰更多>>
- 相关机构：复旦大学上海市第一人民医院更多>>
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- 视黄酸对幼儿淋巴结B细胞发育的影响被引量：2
- 2004年
- 目的:研究视黄酸在B细胞分化发育中的作用,探讨维生素A增加抗体产生的机制。方法:取幼儿正常淋巴结细胞体外培养,加入视黄酸或视黄酸受体拮抗剂干预前后,采用流式细胞术检测分析细胞表面标志的变化,观察B细胞的成熟分化。结果:体外培养的幼儿淋巴结B细胞在无刺激剂存在时,CD19+IgM+的成熟B细胞百分比随培养时间逐渐增加,而相对不成熟的CD19+IgM-B细胞百分比逐渐减少,以48h明显(P<0.05);体外培养加入视黄酸可使CD19+IgM+B细胞百分比进一步升高,在培养24h和48h均显著高于对照组(P均<0.05);同时加入视黄酸拮抗剂则能完全拮抗该促进作用。结论:视黄酸通过视黄酸受体介导促进体外培养的淋巴结B细胞的分化发育。
- 魏东杨毅王卫平
- 关键词：视黄酸视黄酸受体B淋巴细胞细胞分化
- 视黄酸受体拮抗剂对脐血淋巴细胞免疫球蛋白M生成的作用被引量：1
- 2006年
- 目的通过采用视黄酸受体(RARα)选择性拮抗剂Ro41-5253(Ro)进行阻抑实验,以进一步明确视黄酸(RA)对脐血淋巴细胞IgM生成的促进作用是否通过RARα途径调节。方法分离脐血淋巴细胞进行体外培养,在丝裂原SAC活化的同时,加入RARα激活剂RA或(和)受体拮抗剂Ro。检测培养24 h和48 h的细胞RARα,IL-4I、L-6的基因转录水平及培养d5上清中IgM的质量浓度。结果Ro能拮抗视黄酸对脐血淋巴细胞IgM生成的促进作用;同时视黄酸对RARα基因转录水平的上调也被拮抗剂Ro抑制;Ro拮抗视黄酸对两种细胞因子基因转录水平的上调。结论视黄酸对脐血淋巴细胞IgM生成的促进作用是通过RARα受体途径来调控的。
- 吴冰冰王卫平杨毅
- 关键词：视黄酸视黄酸受体脐血淋巴细胞免疫球蛋白M
- 视黄酸对小儿淋巴结B细胞发育的作用及其途径被引量：5
- 2005年
- 目的探讨视黄酸(RA)对儿童淋巴结B细胞成熟分化的影响,及其与视黄酸受体基因表达水平变化的关系。方法本组24例,按年龄分为<1岁组、1～3岁组和～5岁组,每组8例。取患儿正常淋巴结分离细胞进行体外培养,分为RA组,RA+视黄酸受体α(RARα)拮抗剂(Ro415253)组(RA+Ro),脂多糖组(LPS),(LPS+RA)组和对照组。分别加入atRA、Ro415253、LPS。培养24、48h收集细胞。采用流式细胞术分析细胞表面标志,观察B细胞的成熟分化;RT荧光定量PCR测定视黄酸受体基因mRNA。结果<1岁组,RA组成熟B细胞的百分比明显高于对照组(24h:23%±5%vs17%±3%;48h:28%±6%vs22%±4%)(P均<0.05);LPS+RA组活化B细胞数明显高于LPS组(24h:82%±10%vs76%±8%;48h:83%±8%vs78%±10%)(P均<0.05)。同时,RARα基因表达水平也显著上调,而该受体拮抗剂可抑制RA的调节作用。1～3岁组淋巴结B细胞的成熟和活化呈现完全相同的调节变化,而～5岁组RA的这些调节作用不明显。结论RA能促进体外培养的淋巴结B细胞的分化发育和活化,该作用在3岁以下小儿明显。RARα基因的表达调节可能是介导RA作用的主要途径。
- 魏东杨毅王卫平
- 关键词：淋巴结荧光定量PCR测定细胞表面标志成熟分化分化发育
- 视黄酸对人胸腺细胞分化作用及其机理的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 :研究视黄酸调节胸腺细胞分化的作用及其机理。方法 :采用体外胸腺器官培养体系 ,在培养体系中加入视黄酸或受体拮抗剂。在培养的不同时间收集胸腺细胞 ,用荧光标记的抗 CD3、CD4、CD8抗体染色 ,并进行流式细胞仪分析 ,观察胸腺细胞成熟分化的变化。胸腺细胞抽提的 RNA采用实时定量 PCR法检测视黄酸受体 α( RARα) m RNA的表达。结果 :体外胸腺器官培养体系能支持胸腺细胞的发育成熟。 RA在培养的 2 4h促进胸腺细胞向 CD4+分化发育 ,并且该作用可被 RARα特异性拮抗剂 Ro41- 5 2 5 3所拮抗。实时定量 PCR结果显示 ,胸腺细胞表达 RARα m RNA,RA能促进 RARα m RNA的表达 ,并且 RARα m RNA表达水平与 CD4+ CD8+ 胸腺细胞百分数之间存在正相关 ( r=0 .5 93 ,P=0 .0 42 )。结论 :RA对胸腺细胞分化发育具有重要的调节作用 ,RA可能通过影响 RARαm
- 周小建王卫平杨毅
- 关键词：视黄酸受体胸腺细胞细胞分化
- 视黄酸对人胸腺细胞成熟分化的影响及其作用机制
- 2004年
- 目的研究视黄酸调节胸腺细胞发育的作用及其机制。方法采用体外胸腺组织培养体系,在培养中加入视黄酸或视黄酸受体拮抗剂。在培养的不同时间收集胸腺细胞,用荧光标记的抗 CD3、CD4、CD8抗体染色,并进行流式细胞仪分析,观察胸腺细胞表面标志随成熟分化的变化。胸腺细胞抽提的 RNA 采用实时定量 PCR 法检测视黄酸受体α(RARα)mRNA 的表达。结果体外胸腺组织培养体系能支持胸腺细胞的发育成熟。在培养24h 视黄酸促进未成熟的CD4^+CD8^+胸腺细胞向 CD4^+成熟细胞分化发育作用明显,并且该作用可被 RARα特异性拮抗剂 Ro41-5253所拮抗。另一方面,视黄酸能显著抑制 CD4^+CD8^+胸腺细胞向CD8^+细胞分化,这种作用也在培养24h 出现。实时定量 PCR 结果显示,视黄酸能促进 RARα mRNA 的表达,并且 RARα mRNA 表达水平与 CD4^+CD8^+胸腺细胞百分数之间存在正相关(r=0.593,P=0.042),与 CD8^+胸腺细胞百分数之间存在负相关(r=-0.654,P=0.021)。结论视黄酸影响胸腺细胞的成熟分化,可能通过影响其受体 RARα表达的途径而发挥调节作用。
- 周小建王卫平杨毅
- 关键词：视黄醇视黄酸受体胸腺细胞
- 视黄酸受体与T淋巴细胞发育被引量：1
- 2004年
- 视黄酸 (retinoicacid)受体属于核受体超家族 ,通过与其配体结合调节靶基因转录 ,从而发挥各种生物学效应。视黄酸受体的表达分布具有时间与空间的特异性 ,不同的视黄酸受体亚型的表达在T淋巴细胞发育过程中起不同作用。视黄酸受体可通过对T淋巴细胞增殖。
- 周小建杨毅王卫平
- 关键词：受体视黄酸T淋巴细胞发育
- 视黄酸对人胸腺细胞成熟分化影响及其作用机制被引量：6
- 2004年
- 目的:研究视黄酸调节胸腺细胞发育的作用及其机制。方法:采用体外胸腺组织培养体系,在培养体系中加入视黄酸或视黄酸受体拮抗剂。在培养的不同时间收集胸腺细胞,用荧光标记的抗CD3、CD4、CD8抗体染色,并进行流式细胞仪分析,观察胸腺细胞表面标志随成熟分化的变化。胸腺细胞抽提的RNA采用实时定量PCR法检测视黄酸受体α(RARα) mRNA的表达。结果:体外胸腺组织培养体系能支持胸腺细胞的发育成熟。在培养24 h促进未成熟的CD4+CD8+胸腺细胞向CD4+成熟细胞分化发育作用明显,并且该作用可被RARα特异性拮抗剂Ro41-5253所拮抗。视黄酸也能显著抑制CD4+CD8+胸腺细胞向CD8+细胞分化,该作用也在培养24 h出现。实时定量PCR显示,视黄酸能促进RARα mRNA表达,并且 RARαmRNA表达水平与CD4+CD8+胸腺细胞百分数之间存在正相关,与CD8+胸腺细胞百分数之间存在负相关。结论:视黄酸可能通过影响其受体RARα表达而影响胸腺细胞的成熟分化。
- 周小建王卫平杨毅
- 关键词：视黄酸胸腺细胞成熟分化
- 视黄酸受体基因在儿童胸腺中的表达被引量：2
- 2003年
- 目的 观察视黄酸受体基因在儿童胸腺中的表达与分布,探讨其在儿童免疫系统发育中的意义。方法 用地高辛素标记的反义RNA探针原位杂交法,测定5岁以下儿童胸腺中视黄酸受体RAR α、RAR β、RAR γ,RXR α、RXR β、RXR γ6种亚型基因的表达与分布。同期的连续冰冻切片还用免疫组织化学法测定CD1a、CD3的表达,分析视黄酸受体基因表达及分布与T淋巴细胞成熟的关系,并采用实时定量RT-PCR法对基因表达水平进行定量分析。结果 原位杂交结果显示,胸腺皮质及髓质均表达RAR α、RARγmRNA,而RXRα、RXR βmRNA主要在胸腺髓质表达,尤其在哈氏小体外周成熟的胸腺细胞表达较高。胸腺中不表达 RAR β、RXR γmRNA。实时定量 RT-PCR分析结果显示 RAR α、RXR α mRNA在出生后第一年高表达,1岁后表达下降,但在1～5岁之间变化无显著差异。RAR γmRNA则随年龄增长表达增高,RXR β mRNA在5岁以内变化不明显。结论 视黄酸受体基因在胸腺的表达随儿童免疫系统的发育而变化,不同受体亚型基因表达水平的调节在T淋巴细胞的分化发育中可能具有重要意义。
- 周小建杨毅王卫平
- 关键词：基因表达水平胸腺视黄酸受体基因儿童髓质
- Notch信号通路与T淋巴细胞发育被引量：2
- 2004年
- Notch信号通路在器官、细胞发育及肿瘤发生等病理生理过程中起重要作用。近年研究表明 ,Notch信号通路尤其是Notch1对T淋巴细胞发育的各个阶段均有作用。Notch1能促进进入胸腺的淋巴样前体细胞向T淋巴细胞分化 ,抑制其向B淋巴细胞分化 ,并使T淋巴细胞表达TCRαβ ,促进前T细胞向αβT细胞发育。此外 ,Notch1信号的活化可促进CD4 + CD8+ 双阳性胸腺细胞向CD8+ 单阳性细胞分化。本文综述了Notch信号通路的组成、活化 ,及其在T淋巴细胞发育中的作用。
- 周小建王卫平杨毅
- 关键词：NOTCH受体T淋巴细胞发育
- 视黄酸对脐血树突状细胞的作用及其途径被引量：1
- 2006年
- 目的:研究视黄酸(RA)对脐血树突状细胞(dendriticcell,DC)分化、成熟和功能的影响,探讨视黄酸受体(retinoicacidreceptorα,RARα)在RA对脐血DC调节中的作用。方法:收集脐血9份,分离单个核细胞后,均匀分为4组:对照组、RA组、RARα特异性拮抗剂组(RO组)、RA+RO组。在体外进行DC的诱导培养,流式细胞仪检测细胞表面标记及其荧光强度,观察RA及RARα对DC分化、成熟的影响;培养DC与T细胞进行混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)后,观察RA及RARα对DC刺激异体T细胞增殖能力的作用;采用ELISA法和RT-PCR法研究RA和RARα在DC对Th细胞极向分化调节中的作用。结果:RA使DC的分化、成熟明显受抑,但当RO同时加入时,则可逆转该影响;MLR后发现RO可逆转RA对T细胞增殖的抑制作用;在DC对T细胞极向分化的研究中,无论在蛋白水平还是基因水平,RO均可明显阻止RA对Th1(IFN-γ)的下调和对Th2(IL-4、IL-10)的上调作用。结论:RA抑制体外培养的脐血单个核细胞向DC的分化和成熟,降低其MLR能力,使免疫反应向Th2方向偏移。RARα从多个环节上参与了RA对脐血DC的调节作用。
- 陶月红杨毅王卫平
- 关键词：全反式视黄酸脐血树突状细胞
