徐州市科技局社会发展基金(XM09B073)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：宫海滨陈礼斌单雨苏景力魏翠更多>>
- 相关机构：徐州市中心医院东南大学更多>>
- 发文基金：徐州市科技局社会发展基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SERCA2a基因转导治疗心力衰竭的研究进展被引量：6
- 2010年
- 随着社会人口老龄化进程的不断加快,各种类型的心血管疾病导致的慢性心力衰竭逐渐增多。20世纪发展起来的转基因技术为心力衰竭的治疗寻找到了一个新的突破口。本文就SERCA2a(sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase)及其基因的结构、功能以及SERCA2a基因在心力衰竭治疗方面的研究进展作一综述。
- 陈礼斌宫海滨
- 关键词：慢性心力衰竭基因治疗
- 应用Ad Easy腺病毒载体系统构建人肌浆网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)被引量：1
- 2010年
- 目的:利用Adeasy腺病毒表达系统构建含人肌浆网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组腺病毒。方法:将人SERCA2a基因全长cDNA(3700bp)插入到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,成功构建pAd-TrackCMVSERCA2a重组质粒,经PmeI酶切线性化,采用电击法转入到已含Adeasy质粒的电感受态菌BJ5183进行重组。挑选同源重组质粒,PacI酶切线性化转染HEK293细胞包装成重组腺病毒颗粒,荧光检测有绿色荧光蛋白表达。将重组病毒和SD大鼠心肌细胞共培养,western-blot检测SERCA2a可以在大鼠心肌细胞过表达且影响了胞内SERCA2a的活性。结果:成功包装含人SERCA2a基因的重组腺病毒,并可以有效感染SD大鼠心肌细胞。结论:利用新型腺病毒载体在短时间内成功构建了携带有人SERCA2a基因的腺病毒,为以后进一步研究人SERCA2a基因治疗提供了新途径。
- 吕茜魏翠张清林王洁宫海滨
- 关键词：转染
- β_2-肾上腺素能受体过表达后成年犬心肌细胞收缩功能的改变及机制被引量：2
- 2010年
- 背景:在转基因小鼠、大鼠等小动物实验中发现,心肌细胞特异性过表达β-肾上腺素受体可以改善其收缩功能,但目前尚缺乏在大型哺乳动物进行的有关实验报道。目的:探讨犬心肌细胞过表达β2-肾上腺素受体后心肌细胞收缩功能的改变及其可能机制。方法:采用胶原酶消化法分离培养犬心肌细胞,用携带β2-肾上腺素受体目的基因的重组腺病毒转染心肌细胞。转染48h后观察心肌细胞β2-肾上腺素受体蛋白表达及在基础状态和最大收缩状态下(以异丙肾上腺素10-6mol/L刺激)心肌细胞cAMP水平及收缩功能的变化。结果与结论:转染β2-肾上腺素受体的心肌细胞β2-肾上腺素受体蛋白表达及胞内cAMP水平明显增多(P<0.05),基础状态下收缩功能明显增强,但不改变最大收缩幅度百分比。说明β2-肾上腺素受体的过表达可能通过增加心肌细胞内cAMP水平改善心肌细胞的收缩功能。
- 单雨宫海滨王雷王秀力吕茜张清林刘颖王洁庞慧苏景力王振全
- 关键词：Β2-肾上腺素能受体基因转染心肌细胞
