福建省教育厅科技项目(JA10101)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：袁军沈榕强李国良庄振宏杨燕凌更多>>
- 相关机构：福建农林大学教育部更多>>
- 发文基金：福建省教育厅科技项目福建省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 豆豉溶栓酶产生菌Bacillus subtilis LD-8547的诱变选育被引量：5
- 2012年
- 为了通过诱变筛选获得豆豉溶栓酶高酶活菌株。研究以豆豉溶栓酶产生菌株Bacillus subtilis LD-8547为出发菌株,分别通过紫外线诱变和硫酸二乙酯的复合诱变,根据奶粉平板和血粉平板上菌落透明圈的大小进行初筛和复筛。并采用四肽底物测定法进行了溶栓酶的酶活力测定。结果表明,通过实验获得了产豆豉溶栓酶酶活力达18 228 U/mL的LD-8547-25菌株,比诱变出发菌株的酶活力提高了107%。为豆豉溶栓酶高酶活菌株的诱变筛选提供了有益的试验数据。
- 袁军李国良沈榕强庄振宏杨燕凌
- 关键词：紫外诱变硫酸二乙酯
- 副溶血弧菌VopS效应子基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2012年
- 副溶血弧菌可通过Ⅲ型分泌系统分泌效应毒力蛋白导致真核靶细胞的细胞溶解及细胞凋亡.VopS是Ⅲ型分泌系统中的一个效应毒力因子,能通过抑制NF-κB的活性介导巨噬细胞死亡.实验将效应因子VopS的编码基因克隆到pET28a(+)载体上,成功构建了pET28a(+)-vopS重组质粒,将该质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE分析,发现在分子量约为43kDa处有一明显蛋白表达条带.用Ni 2+-NTA柱亲和层析获得纯化蛋白,浓度为175mg/L.为进一步研究副溶血弧菌Ⅲ型分泌系统致病机制提供了材料.
- 袁军袁军方遂王荣智
- 关键词：副溶血弧菌基因克隆蛋白表达
- 乳酸脱氢酶A(ldha)基因的克隆与原核表达被引量：2
- 2012年
- 乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶,在厌氧条件下能催化丙酮酸生成乳酸;当动物体内缺乏葡萄糖时,还可氧化乳酸生成丙酮酸并经葡萄糖异生途径转变为葡萄糖。通过反转录PCR获得了Hela细胞中的ldha基因,并将它克隆到pET28a(+)载体上,获得重组表达载体pET28a(+)-ldha。重组质粒通过转化法转入宿主E.coli BL21(DE3)溶源菌中。SDS-PAGE分析表明,在1.0 mmol·L-1异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)的诱导下,重组子成功表达了一条分子质量约为36 kDa的目标蛋白。
- 袁军许香雅沈榕强
- 关键词：HELA细胞克隆原核表达
