国家教育部博士点基金(20120131110039)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：李贵宝吴金涛朱德晓孙晋浩刘海莉更多>>
- 相关机构：山东大学山东省精神卫生中心更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甲基苯丙胺对中脑边缘投射多巴胺神经元自发动作电位频率和I_h电流的影响被引量：2
- 2014年
- 目的检测高浓度甲基苯丙胺(MA)对中脑边缘多巴胺神经元自发动作电位频率和超极化激活阳离子电流(Ih)的影响。方法应用立体定位仪将逆行示踪剂注入伏隔核区(NAc),标记投射到该区域的中脑边缘多巴胺神经元,并进行酪氨酸羟化酶(TH)染色鉴定;制备中脑脑片,应用膜片钳技术在全细胞模式下检测MA(10μmol/L)对标记神经元自发动作电位频率及Ih的作用。结果中脑边缘投射多巴胺神经元可被准确示踪标记,呈TH阳性,位于腹侧被盖区(VTA);MA可明显降低其自发动作电位频率(P<0.05),并抑制Ih电流(P<0.05)。结论甲基苯丙胺可抑制中脑边缘多巴胺神经元的自发动作电位频率和Ih电流。
- 岳庆伟朱德晓吴金涛刘海莉张静李贵宝丁兆习孙晋浩
- 关键词：甲基苯丙胺多巴胺神经元
- 细胞外信号调节激酶/miR-133b在甲基苯丙胺致PC12细胞神经毒性的作用及机制被引量：4
- 2014年
- 目的探讨甲基苯丙胺(MA)致神经细胞毒性过程中细胞外信号调节激酶(ERK)和miR-133b的表达变化及调控机制。方法用MA建立PC12神经细胞损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活性及镜下形态观察确定MA最佳损伤浓度;应用流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;通过Western blotting技术测定总ERK1/2和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达变化;并应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定miR-133b的表达变化。为进一步分析ERK/miR133b分子通路的作用关系,经U0126特异阻断ERK通路,检测miR-133b的表达变化。结果给予不同浓度的MA,均可导致PC12细胞损伤,其中800μmol/L MA处理后,大部分胞体变圆,神经突起退缩,神经网络消失。MTT结果显示细胞活性明显下降。进一步的细胞毒性机制分析显示,MA处理后,细胞内ROS水平升高,p-ERK表达增高,miR-133b表达降低;并且给予ERK通路抑制剂U0126(10μmol/L)后,miR-133b表达升高,细胞活性增强,胞内ROS水平降低,镜下细胞损伤改善。结论 MA可通过上调ERK磷酸化抑制miR-133b表达,介导神经元毒性损伤。
- 刘海莉朱德晓吴金涛岳庆伟王辉李泽岩李贵宝刘增训张静孙晋浩
- 关键词：甲基苯丙胺细胞外信号调节激酶神经毒性PC12细胞免疫印迹法实时定量聚合酶链反应
