辽宁省自然科学基金(20072202)
- 作品数：16 被引量：85H指数：5
- 相关作者：杨菁白剑王洪新樊淼宋扬更多>>
- 相关机构：辽宁医学院中国医科大学辽宁中医药大学更多>>
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- 地黄寡糖对谷氨酸诱导的海马神经元损伤及葡萄糖摄入的影响被引量：10
- 2009年
- 目的观察地黄寡糖(ROS)对谷氨酸(Glu)诱导海马神经元损伤及葡萄糖摄入的影响。方法将培养7d的SD大鼠海马细胞随机分为对照组、活性ROS用药组(4,20及100mg.L-1)、Glu损伤组(Glu0.1mmol.L-1)及Glu损伤前ROS预处理组(ROS+Glu)。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,比色法测定培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)活性,[3H]葡萄糖掺入法测定神经元葡萄糖的摄取。结果单纯ROS4,20及100mg.L-1组与对照组间各指标差异没有显著性(P>0.05)。ROS4,20及100mg.L-1预处理可使Glu损伤的细胞存活率由70.4%分别上升为77.8%,85.2%,92.6%,同时也改善了神经细胞形态并减少LDH的漏出;[3H]葡萄糖掺入量也由Glu损伤组的(1547±120)分别下降为(1384±181),(1303±123),(1134±123)cpm。结论ROS对Glu引起的神经元损伤具有保护作用,这种保护作用可能与其抑制神经细胞对葡萄糖的过度摄入有关。
- 杨菁史佳琳白剑徐新力王洪新刘春娜
- 关键词：地黄寡糖谷氨酸海马神经元葡萄糖摄取
- 肌肽对ECV304细胞缺氧损伤的保护作用被引量：4
- 2009年
- 目的研究肌肽对缺氧所致人体内皮细胞系ECV304细胞损伤的影响。方法建立缺氧条件下ECV304细胞损伤模型,用MTT法观察肌肽对缺氧损伤的ECV304细胞活性的影响,测定细胞培养基中乳酸脱氨酶(LDH)活力,并对细胞骨架进行考马斯亮蓝R-250染色观测其细胞结构。结果浓度为10～20 mmol/L肌肽孵育ECV304细胞6 h后,可以抑制缺氧12 h和24 h引起的ECV304细胞活性下降,同时减少LDH的释放,保持细胞骨架完整。结论肌肽对缺氧所致的ECV304细胞伤具有保护作用。
- 白剑张俊迟戈刘丽娜樊淼刘海东李伟伟杨菁
- 关键词：肌肽细胞骨架ECV304细胞缺氧
- 梓醇对谷氨酸诱导SD大鼠海马神经元损伤的保护作用被引量：4
- 2011年
- 目的梓醇对谷氨酸诱导SD大鼠海马神经元损伤的影响。方法将培养7～9d的SD大鼠海马细胞进行NSE鉴定,然后随机分为:正常对照组;谷氨酸损伤组(Glu);谷氨酸损伤前予梓醇组(CAT+Glu)。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果与正常对照组比较,0.1mmol·L-1谷氨酸作用于海马神经元24h,出现明显细胞损伤,细胞存活率下降,培养液中LDH含量明显增加,细胞凋亡率增高(<0.01);0.2、1.0、5.0mg·L-1的梓醇可不同程度的改善谷氨酸损伤引起的神经细胞形态的改变,提高细胞存活力,减少LDH的漏出,降低细胞凋亡率,并呈一定的剂量依赖性。结论梓醇对谷氨酸诱导的海马神经细胞损伤有保护作用。
- 王佐周岳春丽杨菁
- 关键词：梓醇谷氨酸海马神经元SD大鼠
- 低氧条件下大鼠血管内皮细胞的形态观察被引量：4
- 2011年
- 原代培养大鼠血管内皮细胞,将培养箱内通入5%CO2-95%N2混合气体(氧分压为18.3 mmHg)并培养大鼠血管内皮细胞12、24h,使用MTT法、LDH活力测定及细胞骨架染色对低氧细胞模型鉴定,研究大鼠血管内皮细胞低氧模型的建立条件及其形态学特点。在低氧12h条件下,血管内皮细胞存活率降低、LDH释放增加,但细胞骨架保持完整;在低氧24h条件下,血管内皮细胞存活率降低、LDH释放增加,细胞骨架破碎。结果表明在低氧(氧分压为18.3 mmHg)24h条件下,可以建立大鼠血管内皮细胞低氧模型。
- 苗兰英林大勇白剑杨葳张伯阳王良君杨菁刘书林
- 关键词：血管内皮细胞低氧细胞骨架
- 邻苯二甲醛柱前衍生化高效液相色谱法测定组织中肌肽含量被引量：13
- 2009年
- 目的建立测定小鼠各组织肌肽含量的高效液相色谱法。方法采用c18色谱柱，以甲醇和0．05mol／L磷酸盐缓冲液（pH3．5）为流动相，用邻苯二甲醛为柱前衍生剂，在柱温38℃下采用二元梯度洗脱，对小鼠各组织中的肌肽含量进行了测定。结果肌肽在0．63—10．00μg／mL时峰面积与进样质量浓度有良好的线性关系，其相关系数为0．9996。回收率在98．2％～99．7％之间。检测限为0．05pg／mL（S／N=10）。结论该法灵敏可靠、专属性强、重现性好。小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑皮层和海马中肌肽含量分别为123．67，22．86，158．86，76．57，81．86mg／g。
- 杨菁吴国强白剑樊淼刘春娜王洪新
- 关键词：肌肽高效液相色谱法荧光检测邻苯二甲醛
- 肌肽对低氧所致大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用被引量：11
- 2010年
- 目的:研究肌肽对低氧所致大鼠血管内皮细胞损伤的影响。方法:建立低氧条件下大鼠血管内皮细胞损伤模型,用MTT法观察肌肽对低氧损伤的血管内皮细胞活性的影响,测定细胞培养基中LDH活力,并对细胞骨架进行考马斯亮蓝R-250染色观测其细胞结构。结果:浓度为10mmol/L～20mmol/L肌肽孵育血管内皮细胞6h后,可以抑制缺氧12h和24h引起的血管内皮细胞活性下降,同时减少LDH的释放,保持细胞骨架完整。结论:肌肽对低氧所致的血管内皮细胞损伤具有保护作用。
- 白剑迟戈张俊刘丽娜樊淼刘海东李伟伟杨菁
- 关键词：肌肽细胞骨架血管内皮细胞损伤
- HPLC-ELSD测定地黄寡糖中地黄苷A含量被引量：3
- 2013年
- 目的 建立测定地黄寡糖中地黄苷A的高效液相色谱法。方法 采用Agilent TC C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,柱温35℃,流动相：甲醇-水（10∶90）,流速1.0mL·min1;ELSD参数：漂移管温度110℃,载气流量3.2L·min1。结果 地黄苷A在0.2~1.2mg·mL1（r=0.9993）内线性关系良好,平均回收率为98.8%（RSD=1.6%）。结论 该方法准确、简便、专属性好,可用于地黄寡糖中地黄苷A成分的含量测定,为地黄寡糖的质量控制提供了依据。
- 刘影杨菁王晶刘涛
- 关键词：地黄寡糖高效液相色谱法蒸发光散射检测器
- 人体内皮细胞系细胞株ECV304细胞低氧模型的制备被引量：1
- 2011年
- 目的研究人体内皮细胞系细胞株(ECV304)细胞低氧模型的建立条件及其形态学特点。方法培养ECV304细胞,将培养箱内通入5%CO2-95%N2混合气体(氧分压为18.3mmHg)并培养ECV304细胞12h、24h,使用MTT法、酸脱氢酶试剂盒(LDH)活力测定及细胞骨架染色对低氧细胞模型鉴定。结果与正常对照组相比,在低氧条件下12h,ECV304细胞存活率降低,LDH释放增加,但细胞骨架保持完整;在低氧条件下24h,ECV304细胞存活率进一步降低,LDH释放增加更明显,细胞骨架破碎。结论在低氧(氧分压为18.3mmHg)24h条件下,可以建立ECV304细胞低氧模型,同时可以观察到形态学改变。
- 苗兰英林大勇白剑杨葳张伯阳王良君杨菁刘书林
- 关键词：低氧细胞骨架
- 高效液相色谱法测定地黄寡糖中水苏糖含量被引量：4
- 2009年
- 目的建立高效液相色谱法测定地黄寡糖中水苏糖含量方法。方法采用菲罗门Rezex RPM-Monosaccharide Pb++8%(7.8mm×300mm)色谱柱,以水为流动相,流速0.8 ml/min,示差检测器测定地黄寡糖中水苏糖含量。结果在该色谱条件下,水苏糖在0.20～3.20 mg/ml范围内峰面积和进样质量有良好的线性关系,其相关系数为0.999 5。样品平均回收率为99.9%,RSD为1.2%(n=6)。结论该方法灵敏可靠,专属性强,且具有快速、简便、重复性好的特点。
- 安阳杨菁岳春丽刘影
- 关键词：地黄寡糖水苏糖高效液相色谱
- 地黄寡糖对谷氨酸诱导海马神经元损伤的影响被引量：26
- 2009年
- 目的观察地黄寡糖对谷氨酸诱导海马神经元损伤的影响。方法将培养7～9d的SD大鼠海马细胞进行NSE鉴定,然后随机分为:正常组(control);单纯地黄寡糖用药组(ROS);谷氨酸损伤组(Glu);谷氨酸损伤前地黄寡糖预处理组(ROS+Glu)。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,比色法测定培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)含量,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果0.1mmol·L-1谷氨酸作用于海马神经元24h,出现明显细胞损伤,细胞存活率下降,培养液中LDH含量明显增加,细胞凋亡率增高(P<0.01);4、20、100mg·L-1的地黄寡糖可不同程度的改善谷氨酸损伤引起的神经细胞形态的改变,提高细胞存活力,减少LDH的漏出,降低细胞凋亡率,并呈一定的剂量依赖性。4、20、100mg·L-1单纯地黄寡糖组与正常组间各指标差异没有显著性(P>0.05)。结论谷氨酸能诱导海马原代细胞的凋亡,地黄寡糖能有效保护海马神经细胞免受谷氨酸诱导的细胞损伤。
- 史佳琳杨菁徐新利王洪新金英刘春娜
- 关键词：地黄寡糖谷氨酸海马神经元
