江西省教育厅资助项目(200307)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：熊丽霞李文林张际青石小玉熊建军更多>>
- 相关机构：江西省医学生物高技术重点实验室南昌大学更多>>
- 发文基金：江西省卫生厅资助项目江西省科技厅资助项目江西省自然科学基金更多>>
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- 黏附素5胞外区克隆、转染及抗人乳腺癌细胞生长的研究
- 2007年
- 目的:克隆和转染黏附素5胞外区,并研究其对人乳腺癌MDA-MB435细胞株生长的影响。方法:RT-PCR技术克隆黏附素5胞外区(称为CED1-4),将其插入pMSCV质粒载体,在大肠杆菌XL-blue扩增,提取和纯化pMSCV-CED1-4,酶切、电泳和测序检测CED1-4序列。CED1-4基因转染MDA-MB435细胞株,RT-PCR和Western blotting检测MDA-MB435细胞表达CED1-4。细胞增殖实验和乳腺癌裸小鼠致瘤实验检测CED1-4对MDA-MB435细胞体内外生长的影响。结果:构建了重组体pMSCV-CED1-4,电泳显示CED1-4条带在1636bp-1018bp区间,测序显示CED1-4基因长1452bp,编码484氨基酸。经PCR和Western blotting证实,CED1-4基因转染的MDA-MB435细胞在mRNA和蛋白质水平表达CED1-4。细胞增殖实验结果表明,实验组MDA-MB435细胞增殖低于实验对照组和空白对照组(P<0.05)。乳腺癌裸小鼠致瘤实验显示,实验组移植瘤平均体积和重量低于实验对照组和空白对照组(P<0.05)。结论:黏附素5胞外区CED1-4能在体内外抑制人乳腺癌MDA-MB435细胞株的生长。
- 石小玉李文林熊丽霞张际青熊建军李红
- 关键词：钙粘着糖蛋白类克隆基因转染
