国际科技合作与交流专项项目(2008DFA31380)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：卓慧钦刘祖国姚琴赵永祥赵涣阁更多>>
- 相关机构：广西医科大学厦门大学海南医学院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 异源基因α1,3半乳糖转移酶与增强型绿色荧光蛋白融合对荧光蛋白表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究异源(猪)基因α1,3半乳糖转移酶(α1,3GT)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因形成的融合蛋白对其荧光表达量的影响。方法 BamHI,EcoRI酶切pcDNA3.1-α1,3GT重组载体后,回收含α1,3GT的片段,与BamHI、EcoRI酶切回收的pEGFP-N1载体连接,并酶切、测序鉴定重组真核表达载体pEGFP/α1,3GT。将该表达载体转染人肺癌细胞A549、人胚肾细胞293FT,EGFP的表达用荧光显微镜观察和流式细胞仪进行荧光定量分析。结果 pEGFP-N1载体转染A549和293FT后48h的转染阳性率分别80.5﹪和86.5﹪;pEGFP/α1,3GT载体转染A549和293FT细胞后48h的转染效率则为75.8﹪和81.2﹪。A549细胞空白对照,转染pEGFP-N1和pEGFP/α1,3GT载体的A549细胞平均荧光强度分别为1.21、0.956;293FT细胞空白对照,pEGFP-N1和pEGFP/α1,3GT载体的293FT细胞平均荧光表达量分别为7.66、1.00。结论 pEGFP/α1,3GT融合蛋白的生成抑制了绿色荧光蛋白的表达强度。
- 唐晶谢柏臻李鹏飞姚琴赵涣阁卓慧钦刘祖国赵永祥
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白融合蛋白荧光强度
