国家自然科学基金(30801260)
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 相关作者：胡维琨陆小霞李贵刚张虹熊盛道更多>>
- 相关机构：华中科技大学湖北省医学会武汉市妇女儿童医疗保健中心更多>>
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- 氯离子通道-3反义寡核苷酸对内皮素-1促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的观察氯离子通道-3(chloride channel3,ClC-3)反义寡核苷酸(antisense oli-gonucleotides,AS-ODN)对内皮素1(endothelin-1,ET-1)促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞(bovine corneal endothelial cells,BCECs)的抑制作用。方法 BCECs细胞悬液接种培养12h后,通过脂质体介导转染不同浓度的ClC-3寡核苷酸。体外培养BCECs24h后加入200pmol.L-1ET-1,继续培养48h。通过倒置荧光显微镜观察BCECs寡核苷酸的摄取。采用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法检测ClC-3mRNA和蛋白的表达。采用MTT法观察BCECs增殖状况,计算细胞存活率,同时应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数。结果寡核苷酸可被培养的BCECs摄取。ClC-3mRNA与蛋白的表达变化呈平行关系。与不加时相比,ClC-3AS-ODN浓度依赖性地减少BCECsClC-3mRNA和蛋白的表达,同样也浓度依赖性地降低BCECs MTT吸光度值(OD值)和细胞存活率。经100mg·mL-1ClC-3AS-ODN处理后,与对照组相比,细胞G0/G1期细胞比例明显增高,S期及G2期细胞比例则明显降低,出现明显的凋亡峰,增殖指数明显下降。结论 ClC-3AS-ODN可能通过减少ClC-3mRNA和蛋白的表达,浓度依赖性抑制ET-1对体外培养BCECs的增殖作用,并使细胞周期停滞在G1期。
- 胡维琨谢二娟张虹李贵刚刘荣
- 关键词：反义寡核苷酸内皮素-1增殖角膜内皮细胞
- Tim-3中和抗体对哮喘小鼠T淋巴细胞功能的影响
- 2009年
- 目的探讨Tim-3中和抗体对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠外周血及支气管肺泡灌洗液（BALF）中T淋巴细胞体：外增殖功能和细胞因子合成功能的影响。方法分别采集实验组和对照组外周血和BALF，并分离出T淋巴细胞进行体外分组培养，各组分别以不同浓度的Tim-3中和抗体进行干预，并在不同的时间进行检测。用MTT法分别测定各组细胞的增殖情况，用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定T淋巴细胞白细胞介素4（IL-4）、干扰素γ（IFN-γ）的水平。结果与对照组比较，Tim-3中和抗体对体外培养的实验组小鼠外周血和BALFT淋巴细胞的增殖均有抑制作用，其作用强度（在-定范围内）随剂量的增加和时间的延长而加强（均P〈0．05）；而且对实验组小鼠的抑制作用明显强于对照组小鼠（P〈0．05）；同时实验组小鼠外周血和BALFT淋巴细胞经抗体干预后，IL-4的表达水平较正常组明显下降，IFN-γ明显增加（P〈0．05）。结论 Tim-3中和抗体能抑制实验组小鼠T淋巴细胞的增殖和IL-4的合成，增加IFN-γ的分泌。Tim-3可能作为哮喘治疗新的分子靶点。
- 陆小霞胡维琨熊盛道熊维宁徐国鹏兰芬
- 关键词：哮喘TIM-3抗体T淋巴细胞
- 窄房角合并虹膜睫状体囊肿的解剖因素分析被引量：1
- 2012年
- 目的探讨窄房角患者合并虹膜睫状体囊肿的解剖因素。方法回顾性病例系列研究。收集223例（402只眼）窄房角患者的超声活体显微镜（UBM）检查资料，进行回顾性分析。所有窄房角患者就诊时眼部常规检查均未发现虹膜睫状体囊肿体征，但眼部UBM检查显示有19例（23只眼）合并存在虹膜睫状体囊肿。根据UBM图像显示的囊肿部位、大小、数量，分析窄房角合并虹膜睫状体囊肿与未合并虹膜睫状体囊肿患者间年龄、中央前房深度、前房角等解剖特征差异。年龄、中央前房深度比较采用独立样本t检验，前房角比较采用独立样本秩和检验。结果223例（402只眼）窄房角患者中，UBM检查发现19例（23只眼）合并虹膜睫状体囊肿，UBM检测阳性率为5．7％。其中单眼囊肿15例，双眼囊肿4例；囊肿位于睫状突部2只眼（8．7％），虹膜根部18只眼（78．3％），同时位于虹膜根部及虹膜后表面3只眼（13．0％）；单发性囊肿21只眼（91．3％），多发性囊肿2只眼（8．7％）；囊肿直径0．5～3．1mm，平均（0．71±0．53）mm。窄房角合并虹膜睫状体囊肿患者平均年龄（55．32±10．74）岁，中央前房深度（2．25±0．39）mm；未合并虹膜睫状体囊肿患者年龄（57．46±10．52）岁，中央前房深度（2．14±0．34）mm，两者差异无统计学意义（t=0．534，0．783；P〉0．05）。合并虹膜睫状体囊肿患者前房角开放度中位数（最大值，最小值）为8．2°（21．0°，0．0°），未合并虹膜睫状体囊肿患者前房角开放度中位数（最大值，最小值）为8．9°（21．4°，0．0。°），两者差异无统计学意义（Z=-0．062，P〉0．05）。结论窄房角患者的中央前房深度及前房角开放度并非发生虹膜睫状体囊肿的解剖因素。
- 李贵刚纪彩霓李新宇胡维琨胡军王军明李涛李斌张虹
- 关键词：前房虹膜疾病囊肿
- 哮喘儿童外周血单个核细胞Tim-3 mRNA的表达及其与CD4^+CD25^+调节性T细胞的关系被引量：5
- 2011年
- 目的观察哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3 mRNA的表达及其与CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的关系,探讨Tim-3在哮喘发生发展中的作用。方法收集哮喘门诊或住院患儿73例,其中哮喘缓解期38例(缓解组),轻至中度急性发作期35例(发作组)。利用RT-PCR检测哮喘患儿PBMC中Tim-3 mRNA的表达并做半定量分析,流式细胞术检测PBMC中的CD4+CD25+Treg的水平(CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的百分比)。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β)的水平,并分析Tim-3 mRNA与CD4+CD25+TregI、L-6水平的相关性。结果哮喘发作组PBMC中Tim-3 mRNA吸光度值为(0.86±0.17),与缓解组(0.39±0.11)和正常对照组(0.06±0.03)比较,差异具有统计学意义(均P<0.05),并且缓解组与正常对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05)。哮喘发作组外周血CD4+CD25+Treg百分率为(8.35±1.67)%,与缓解组[(10.21±2.04)%]和正常对照组[(12.43±2.58)%]比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),并且缓解组与正常对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05);哮喘发作组血浆中IL-6水平为(78.35±14.59)pg/mL,与缓解组[(36.48±9.18)pg/mL]和正常对照组[(10.24±3.57)pg/mL]比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),缓解组与正常对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。3组血浆中TGF-β水平没有明显差异;哮喘发作组和缓解组PBMC中Tim-3 mRNA的表达水平与CD4+CD25+Treg百分率均呈负相关(r=-0.81,-0.79,均P<0.05),与IL-6的水平呈正相关(r=0.87,0.83,均P<0.01)。结论哮喘患儿PBMC中Tim-3 mRNA表达增高参与哮喘的发生与发展,其机制可能与升高血浆IL-6,抑制CD4+CD25+Treg的生成有关。
- 陆小霞
- 关键词：哮喘TIM-3调节性T细胞转化生长因子Β
- 氯通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸在内皮素-1对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的影响
- 2010年
- 目的观察氯通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)在内皮素-1(ET-1)对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的作用。方法实验设7组,对照组、1g·L-1二甲基亚砜(DMSO)组、200pmol·L-1ET-1组、200pmol·L-1ET-1+1g·L-1DMSO组和200pmol·L-1ET-1+50、100、200μmol·L-1NPPB3个实验组。采用倒置光学显微镜观察牛角膜内皮细胞形态。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法观察细胞增殖,计算细胞存活率。采用免疫细胞化学检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达,并采用计算机图像分析测定平均光吸收值。应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数。结果 NPPB能够使细胞形态发生异常,细胞内分裂相减少。50、100μmol·L-1NPPB使培养牛角膜内皮细胞MTT光吸收值、细胞存活率和PCNA阳性细胞的平均光吸收值较200pmol·L-1ET-1组均显著降低,并具有浓度依赖性。而NPPB浓度达到200μmol·L-1时,细胞趋于死亡。经100μmol·L-1的NPPB处理后,与对照组和200pmol·L-1ET-1组相比,出现明显的凋亡峰,G1期细胞比例明显增高,S期及G2/M期细胞比例则明显降低,增殖指数明显下降。结论 NPPB浓度依赖性抑制ET-1对培养BCECs的增殖作用,使细胞周期停滞在G1期。
- 胡维琨谢二娟张虹李贵刚刘荣
- 关键词：内皮素-1氯通道
- 哮喘患者诱导痰炎性细胞中Tim-3 mRNA表达的研究被引量：4
- 2009年
- 目的检测哮喘患者诱导痰炎性细胞中Tim-3 mRNA的表达,并分析其与上清液中IL-4、IFN-γ的水平及肺功能的相关性,探讨Tim-3 mRNA在哮喘发生发展中的作用。方法2007年10月至2008年5月在华中科技大学同济医院哮喘门诊或住院患者中收集哮喘缓解期患者25例,轻至中度急性发作期患者28例,利用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测哮喘患者诱导痰炎性细胞中Tim-3 mRNA的表达并做半定量分析,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中IL-4、IFN-γ的水平,并测定所有患者的肺功能,分析Tim-3 mRNA与IL-4、IFN-γ的水平及肺功能的相关性。结果哮喘发作期诱导痰炎性细胞中Tim-3 mRNA吸光度值为(0.48±0.07),与缓解期的(0.21±0.04)和对照组(0.09±0.03)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),缓解期与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);哮喘发作期诱导痰上清液中IL-4的水平为(39.71±8.37)pg/ml,与缓解期的(21.63±9.18)pg/ml,和对照组(16.24±7.56)pg/ml比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),缓解期与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);哮喘发作期诱导痰上清液中IFN-γ的水平为(32.64±6.45)pg/ml,与缓解期的(78.51±8.62)pg/ml和对照组(86.47±9.31)pg/ml比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),缓解期与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。哮喘发作组诱导痰炎性细胞中Tim-3 mRNA的表达水平与IL-4呈正相关(r=0.65,P<0.05),与IFN-γ和肺功能分别呈负相关(r=-0.89,r=-0.78,均P<0.01)。结论诱导痰炎性细胞中Tim-3 mRNA表达增高可能参与哮喘的发生与发展。
- 陆小霞胡维琨熊盛道熊维宁徐国鹏
- 关键词：哮喘气道炎症诱导痰TIM-3
- 单眼视网膜色素变性一例
- 2017年
- 原发性视网膜色素变性(primary pigmentary degeneration of retina)亦称为色素性视网膜炎(retinitis pigmentosa, RP),是一组以进行性感光细胞及色素上皮功能丧失为共同表现的遗传性视网膜变性疾病,是一种比较常见的毯层-视网膜变性(tapetoretinal degeneration),以夜盲、进行性视野损害、眼底色素沉着和视网膜电图异常或无波为其主要临床特征,也是世界范围内常见的致盲性眼病。临床上“双眼视网膜色素变性”较为常见,“单眼视网膜色素变性”较为罕见,国内外杂志上也有报道。本篇病例报道介绍一例“典型的单眼视网膜色素变性”,从眼底照等临床上的检查结果以及基因检测分析此病例,提高“单眼视网膜色素变性”的诊断率,降低漏诊率。
- 元佳佳马思琪李斌
- 关键词：病例报道
- Leber病两家系分析
- 2013年
- 目的探讨Leber病的临床特征和基因诊断方法。方法采用聚合酶链反应,对两家系2例先证者目的DNA进行扩增,并基因测序,明确突变类型。结果 2例先证者均为Leber病患者,基因突变类型为G11778A。结论基因检测明确两家系2例Leber病患者诊断。
- 郑露胡可成进魁杨亚利胡维琨
- 关键词：LEBER病基因突变
