宁夏回族自治区自然科学基金(NZ21196)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：银川市第一人民医院宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
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- 结核分支杆菌CFP10/pET32a重组质粒的构建、原核表达及纯化被引量：1
- 2013年
- 目的构建结核分支杆菌重组CFP10/pET32a表达质粒,原核表达及纯化重组蛋白。方法将目的基因CFP10亚克隆到pET32a表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3)plysS,鉴定后以IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE检测其表达水平,经含Ni2+的His-bind树脂柱纯化CFP10。结果菌落PCR鉴定及测序分析表明,成功构建CFP10/pET32a重组质粒;IPTG诱导表达后,融合蛋白占菌体总蛋白的40%,占裂解物上清总蛋白的72.4%,表明重组的CFP10基因能在BL21中高效表达,表达的蛋白大部分以可溶性状态存在。结论成功构建结核分支杆菌CFP10/pET32a重组质粒,CFP10获得高效表达。
- 丁淑琴杨园园杨风琴朱佳佳
- 关键词：结核分支杆菌CFP10重组质粒纯化
