福建省自然科学基金(2013J06003)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：陈敬华蔡淑贤陈梅陈秋香刘景荣更多>>
- 相关机构：福建医科大学福州市第一医院莆田学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省科技计划重点项目福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：理学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 基于靶序列循环及DNA长距自组装的电化学传感器用于乳腺癌相关序列c-erbB2的检测被引量：4
- 2013年
- 基于"核酸外切酶(ExoⅢ)辅助靶序列循环"和"DNA长距自组装"两种信号放大技术研制了一种DNA电化学生物传感器,并将其用于乳腺癌相关靶序列的高灵敏、高特异性检测。通过将发卡型探针固定在金电极表面,当靶序列存在时,在ExoⅢ的辅助下,发生杂交、酶降解、再杂交的第一重信号放大过程。接着在电极表面加入两条辅助探针,即可发生级联式杂交,形成长距超级"三明治"DNA结构。该结构可吸附大量的电活性分子六氨合钌配合物(RuHex),产生很强的电化学信号,从而实现信号的第二重放大。实验结果表明,在最佳条件下,该传感器的线性范围为10 amol/L^10 pmol/L,检出限达到8 amol/L,而且能较好地识别完全互补和错配序列,有望用于临床实际样本中超低含量靶序列的检测。
- 张静章溪汪世华杨桂娣陈敬华
- 关键词：电化学传感器乳腺癌
- 免标记电化学免疫传感器用于微囊藻毒素-LR的灵敏检测被引量：4
- 2015年
- 采用纳米金作为抗体的固定基质,同时以硫堇为电活性指示剂,构建了一种免标记的电化学免疫传感器用于微囊藻毒素-LR（MC-LR）的灵敏检测。将萘酚修饰到金电极表面,通过静电作用将硫堇捕获。加入纳米金与硫堇的氨基结合,抗体将通过与纳米金作用而固定到电极表面。通过MC-LR与其相应抗体的特异性结合作用阻碍硫堇的电子传递,实现MC-LR的电化学检测。在最优实验条件下,MC-LR的质量浓度与电信号在5~100μg/L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.71μg/L,可满足饮用水检测需求,能够用于实际水样中M C-LR的测定。
- 唐淑榕张兰童萍李光文游秀华陈敬华
- 关键词：免疫传感器微囊藻毒素电化学检测
- 基于酶辅助循环放大和银纳米簇技术构建荧光传感器用于MicroRNA的检测
- 2016年
- 基于双链特异性核酸酶(Duplex-specific nuclease,DSN)选择性切割DNA单链和DNA保护的银纳米簇的特性,建立了一种新型的荧光传感器用于MicroRNA(MiR-21)的高灵敏检测。当MiR-21存在时,与Cp杂交形成DNA/RNA双链结构,此时在DSN的水解下,释放出探针DNA部分片段和完整的MiR-21。释放出来的MiR-21可再次发生与Cp杂交、DSN酶切等反应,如此反复,可实现一条MiR-21分子与多条探针杂交、酶切的循环过程。经磁分离,上清液中的探针DNA部分片段与Ag+结合并在硼氢化钠(Na BH4)的还原下产生银簇,检测到较强的荧光信号。相反,当MiR-21不存在时,DSN对单链探针无酶切作用,不能水解Cp,经磁分离,上清液中检测不到荧光信号。在最佳条件下,该传感器检测MiR-21的线性范围为50 fmol/L^10 pmol/L,检测限达6 fmol/L,而且具有较好的选择性,有望用于临床实际样本中微量MiR-21的检测。
- 刘景荣潘云苓赵燕苹陈梅夏垚坤兰建明韩志钟吴芳陈敬华李春艳
- 关键词：磁珠MIR-21
- 基于磁珠和双链特异性核酸酶辅助目标循环技术构建荧光传感器用于MicroRNA的检测被引量：2
- 2015年
- 基于磁珠（MBs）的分离富集和双链特异性核酸酶（DSN）选择性切割DNA单链的特性,建立了信号增强型荧光生物传感器用于microRNA-21（miR-21）的检测。荧光素（FAM）修饰的捕获探针（Cps）,通过亲和素-生物素的特异识别作用固定在磁珠表面。当miR-21存在时,Cps与其杂交形成DNA/RNA双螺旋结构,DSN能特异性水解杂合双链中的DNA,同时释放出荧光标记片段和完整的miR-21。被释放出来的miR-21与另一Cp再次杂交并被DSN酶切,如此循环,从而实现恒温条件下一个miR-21与多个Cp杂交、酶切,释放出大量的荧光标记片段的循环过程,最终使体系的荧光强度明显变大。相反,当miRNA-21不存在时,Cps无法形成双螺旋结构,DSN对单链DNA无酶切作用,不能水解Cps,经磁分离,上清液没有荧光标记片段,所以检测不到荧光信号。最佳条件下,miR-21浓度在100~5×104fmol/L范围内,荧光强度与其浓度呈良好的线性关系,检测限达80 fmol/L。该传感器可以识别单碱基错配序列,有望为肿瘤早期诊断提供新思路。
- 陈秋香赵燕苹吴冬枝蔡淑贤夏垚坤陈梅陈敬华
- 关键词：磁珠MIR-21
- 基于适配体亲吻复合物构建电化学阻抗传感器用于腺苷的检测被引量：1
- 2015年
- 基于适体探针（Aptamer probes,AP）和发卡探针（Hairpin probes,HP）在腺苷（Adenosine,AD）存在时的新型结合模式,构建了一种非标记型电化学阻抗传感器用于腺苷的检测。固定在电极表面的AP在腺苷存在时会折叠成发夹结构,其发夹的环部与HP的环部部分互补杂交,二者通过环-环相互作用（类似人类“亲吻”行为）形成一个“亲吻型适配体复合物”,由于复合物的空间位阻作用,使得电极的阻抗信号明显变大。相反,腺苷不存在时,AP呈舒展状态,无法与HP结合成稳定的“亲吻”结构,电极的阻抗信号无明显变化。以电子传递电阻值作为响应信号来检测腺苷,最佳实验条件下,在5~1 000 nmol/L浓度范围内,电阻值与腺苷浓度的对数呈良好的线性关系,检出限达0.6 nmol/L。另外,该传感器具有良好的选择性,有望应用于临床实际样本中腺苷的检测。
- 陈秋香赵燕苹吴冬枝蔡淑贤夏垚坤陈梅陈敬华
- 关键词：适体亲吻腺苷
- 基于DNA银铂双金属纳米簇的电化学传感器用于Hg^(2+)的检测被引量：8
- 2016年
- 以DNA为模板,通过一步法合成了一种银铂双金属纳米簇(DNA-Ag/Pt NCs),其粒径为2~4 nm,并表现出较强的过氧化物模拟酶活性,能催化H2O2氧化TMB使溶液变蓝色。基于此特性,结合Hg2+可与胸腺嘧啶碱基形成T-Hg2+-T结构,设计研制了一种非标记的电化学传感器,用于Hg2+的灵敏特异性检测。实验结果表明,在最佳条件下,该传感器的检测范围为0.65~3.5 nmol/L,检出限达0.17 nmol/L,能较好地识别Hg2+。该传感器有望用于实际水样中痕量汞的检测。
- 傅贤明刘智晶蔡淑贤李萍李云腾陈敬华
- 关键词：DNA模板模拟酶汞离子电化学传感器
- 基于核酸适体的比色技术检测肿瘤标志物血管内皮生长因子被引量：2
- 2017年
- 目的基于核酸适体和磁珠,提出一种检测肿瘤标志物血管内皮生长因子(VEGF)的比色方法。方法核酸适体与标记脲酶的单链结合,通过生物素-亲和素的特殊识别作用固定在链霉亲和素修饰的磁珠上;待检测的肿瘤VEGF标志物与适体结合形成茎环结构,使标记脲酶的单链脱落下来;经磁分离,转移上清液,加入到含一定量尿素和酚红试剂的溶液中。利用上清液中的脲酶水解尿素产生氨,使得溶液的p H值升高,导致溶液的颜色变化,通过肉眼或紫外分光光度计分析显色结果。结果该检测体系在最佳条件下,检测VEGF的线性范围为0.1~10 pmol/L,检测限达0.06 pmol/L。并利用此体系,检测人肺癌患者血清中的VEGF浓度,其结果与ELISA方法检测出的结果基本一致。将本方法与ELISA方法同步盲法测定10例血清样本,结果显示本方法的准确率为90%,表明其具有较高的有效性和敏感性。结论该检测方法操作简单方便,同时具有较高的灵敏度和选择性,在临床VEGF检测中具有潜在的应用前景。
- 刘景荣潘云苓赵燕苹刘美岑陈敬华李春艳
- 关键词：核酸适体磁珠脲酶比色血管内皮生长因子
