四川省应用基础研究计划项目(045Y029-002)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- EB病毒GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的制备和鉴定
- 2006年
- 目的制备EB病毒GST-Rta150融合蛋白的单克隆抗体并鉴定其特性。方法取经GST-Rta150融合蛋白免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行阳性杂交瘤细胞株的筛选及亚克隆,接种杂交瘤细胞至小鼠腹腔,收集腹水并纯化。制备的单克隆抗体以琼脂双向扩散法鉴定抗体类及亚类。间接ELISA法测定抗体的效价,Western-blot检测抗体的特异性。结果获得一株稳定分泌抗GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1A9,细胞培养上清效价为10-3,腹水效价为10-5,纯化的抗体效价为10-6。经鉴定GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的亚类为IgG1。Western-blot结果显示此单克隆抗体能特异结合GST-Rta150融合蛋白。将杂交瘤细胞株在液氮中冻存3个月后复苏,其分泌的单克隆抗体效价不变。结论通过上述方法制备出来的单克隆抗体特异性强,稳定性好,为研究EB病毒立即早期基因产物Rta蛋白以及EB病毒相关疾病的诊断和治疗奠定了基础。
- 朱银华梁伟波吕梅励徐永春贾静张林
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤EBVEB病毒
