江苏省自然科学基金(BK2009701)
- 作品数:3 被引量:13H指数:2
- 相关作者:陶建平许金俊任春芝毛雪高艳风更多>>
- 相关机构:扬州大学姜堰市畜牧兽医站更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 日本大耳白兔干扰素-γ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 2011年
- 提取经ConA刺激后的日本大耳白兔外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR技术对其IFN-γ基因进行扩增和测序。将去除信号肽的IFN-γ基因片段插入原核表达载体pET-30a并在大肠杆菌中进行表达。结果显示,克隆的IFN-γ基因长为504个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码168个氨基酸,所测序列与GenBank中已登录的安哥拉兔、中国白兔、欧洲兔、新西兰兔IFN-γ同源性为100%,与獭兔同源性高达99.8%。构建的重组菌经过IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳证实,IFN-γ基因片段在大肠杆菌中得到了融合表达,分子质量约为18 ku,表达量为菌体总蛋白的35%左右。以上结果为下一阶段兔IFN-γ重组蛋白生物学特性及其应用的研究奠定了基础。
- 任春芝季燚刘丹丹李建梅王尚尚陶建平王志强许金俊
- 关键词:日本大耳白兔干扰素-Γ克隆
- 高邮麻鸭白细胞介素-2基因的克隆与序列分析被引量:4
- 2010年
- [目的]对高邮麻鸭白细胞介素-2(CIL-2)基因进行克隆和序列分析。[方法]以高邮麻鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,根据已发表的鸭IL-2基因cDNA序列设计并合成1对引物,应用两步RT-PCR技术扩增出IL-2基因的特异性片段。将扩增片段插入pGEM-T-easy载体,并进行测序分析和结果验证。[结果]阳性克隆所含插入片段的DNA序列全长为433bp,与预期大小一致,含有1个423bp大小的开放性阅读框,共编码141个氨基酸的前体蛋白,N端21个氨基酸形成信号肽,成熟蛋白为120个氨基酸,分子量约为13.66kD,含1个糖基化位点。该序列与绿头鸭、绍兴鸭、固始鸭相应序列的同源性均为99.8%,与广州白鸭的同源性为99.3%,存在少量核苷酸差异。[结论]高邮麻鸭IL-2编码区基因相对高度保守,为其用于临床疾病治疗提供了一定参考。
- 陈诚佘步宏任春芝陶建平许金俊
- 关键词:克隆
- 柔嫩艾美球虫常州株对5种抗球虫药的抗药性分析被引量:8
- 2010年
- 将柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)常州分离株感染14日龄苏禽黄羽肉鸡,设立5个用药组、1个感染不用药对照组和1个不感染不用药对照组,以相对卵囊产量、病变记分减少率、最适抗球虫百分数和抗球虫指数为指标对该虫株对球虫宁、地克珠利、马杜霉素、磺胺氯吡嗪、癸氧喹酯5种常用抗球虫药的抗药性进行了综合评定,分析了该地区球虫的抗药性及用药对策。结果表明,该虫株对癸氧喹酯敏感,对球虫宁、地克珠利、马杜霉素、磺胺氯吡嗪具有完全抗药性,提示目前常州地区球虫抗药性非常严重,癸氧喹酯抗球虫疗效最好,其他药物应合理使用、应慎用、减少或暂停使用。
- 高艳风毛雪陶建平许金俊
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫抗球虫药抗药性