山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2006BS06012)
- 作品数：15 被引量：98H指数：5
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- 相关机构：山东农业大学山东中医药大学泰安市农业局更多>>
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- 烟草根际铁载体产生菌G-229-21T的筛选、鉴定及拮抗机理被引量：29
- 2008年
- 【目的】从烟草根际筛选烟草疫霉[Phytophthora parasitica var.nicotianae(Breda de Hann)Tucker]拮抗菌,探索其拮抗机理。【方法】限铁(2.0μmol/LFeCl3)蔗糖-天冬酰胺平板对峙法筛选烟草疫霉拮抗菌;刃天青(CAS)法检测其铁载体的产生及其对铁离子的亲和能力。结合形态、生理生化、16SrRNA序列同源性和系统发育分析及种特异性分子法对其进行鉴定。XAD-2吸附层析法提取其铁载体,分光光度法检测其铁载体类型。不同铁离子浓度下,比较其铁载体对烟草疫霉的抑制作用。【结果】我们筛选到一株限铁条件下烟草疫霉拮抗菌G-229-21T,该菌产生高亲和力铁载体,被初步鉴定为Pseudomonas mediterranea。该菌产生的羧酸型铁载体,在低铁条件下(0.16μmol/L～10μmol/LFeCl3)对烟草疫霉的抑制率达92.3%以上,而在富铁条件下(100μmol/LFeCl3)抑制率仅为2.0%。【结论】首次报道P.mediterranea G-229-21T产生高亲和力羧酸型铁载体,该铁载体在低铁条件下对烟草疫霉有显著的抑制作用。
- 田方丁延芹朱辉姚良同靳奉理杜秉海
- 关键词：PSEUDOMONAS铁载体拮抗机理
- 辣椒根腐病拮抗细菌的筛选及其生物学特性研究被引量：10
- 2008年
- 以辣椒根腐病原菌(Fusarium solani)为指示菌,从贵州辣椒根际筛选到5株具有明显拮抗效果的细菌,编号分别为:SC2、SC2-4、SC2-4-1、SC2-4-2、SC2-4X。上述菌株抗菌谱较广,对黄瓜枯萎病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、黄瓜霜霉病原菌(Pseudoperonospora cubensis)、芹菜灰霉病原菌(Botrytis cinerea Pers)以及西红柿灰霉病原菌(Botrytis cinerea)也具有良好的拮抗性能。经形态学测定、生理生化分析和16S rDNA序列分析,将SC2、SC2-4-2、SC2-4X鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),SC2-4、SC2-4-1鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。SC2菌株产生的抗菌物质可能为蛋白类或抗菌肽类物质。
- 朱辉姚良同田方杜秉海丁延芹
- 关键词：拮抗菌
- Pseudomonas pseudoalcaligenes B50铁载体合成相关基因pyrD的克隆与功能分析被引量：4
- 2010年
- 从棉花根际分离的一株细菌B50在低铁条件下可以产生铁载体。通过形态学特征、生理生化特征及其16SrDNA序列分析,将其鉴定为Pseudomonas pseudoalcaligenes。采用三亲本杂交的方法将转座子Tn5-1063a(含luxAB)导入B50中,进行转座子插入诱变,获得突变株。用TAIL-PCR方法得到与铁吸收有关的pyrD基因序列。通过互补实验验证pyrD与铁载体的合成有关。Pseudomonas pseudoalcaligenes能够产生铁载体属于首次报道。
- 丁延芹黄伟红姚良同于素芳杜秉海
- 关键词：PSEUDOMONAS铁载体合成
- 土壤中难培养微生物培养方法初探被引量：3
- 2009年
- 通过在培养基中加入适量的过氧化氢酶、丙酮酸钠和适当的稀释培养基,以及采用土壤浸出液直接培养的方法,将从土壤中筛选出的处于不可培养(VBNC)状态的微生物进行培养,结果部分难培养微生物恢复分裂能力形成菌落,这为进一步开发土壤中微生物资源奠定了基础。
- 李正华张冬梅张晓峰杜秉海丁延芹
- 关键词：土壤微生物
- 两株棉花立枯病拮抗菌MH1和MH25的筛选与鉴定被引量：9
- 2008年
- 从棉花根际分离了1277个细菌分离物,以棉花立枯病病原真菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn)为靶标菌,通过平板对峙法获得25个具有拮抗性能的分离物,其中MH1和MH25具有较强的拮抗性能,且拮抗性能稳定,具有较好的生防潜力。经过形态观察、生理生化特征分析及16SrDNA序列分析,MH1为短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis),MH25为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。MH1和MH25的16SrDNA序列在GenBank中注册号分别为:EF488102,EF488103。
- 杜志兵杜秉海姚良同黄伟红丁延芹
- 关键词：棉花根际拮抗立枯病
- 向日葵菌核病根际拮抗菌的筛选与鉴定及其拮抗机理的初步研究被引量：4
- 2010年
- 利用梯度稀释和对峙试验的方法,从向日葵根际土壤筛选到18株对向日葵菌核病病原菌—核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)有拮抗效果的细菌,其中1株具有较强的拮抗效果,命名为XRK4。经过形态观察及16S rDNA序列分析,将XRK4鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。研究表明XRK4具有β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性。设计引物以XRK4的基因组DNA为模板扩增得到长度为732 bp的β-1,3-1,4-葡聚糖酶的完整基因,其开放阅读框架编码243个氨基酸。XRK4可能因产生葡聚糖酶,降解病原菌细胞壁而具有拮抗活性。
- 侯启会丁延芹杜秉海靳奉理路晓萌孙臻鑫周瑞军姚良同
- 关键词：拮抗细菌核盘菌Β-1,3-1,4-葡聚糖酶
- 向日葵菌核病拮抗菌XRK5的筛选与鉴定被引量：3
- 2010年
- 从向日葵根际分离了640个细菌分离物,以向日葵菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)为靶标菌,通过平板对峙法获得了18个具有拮抗性能的细菌,其中XRK5具有较强拮抗能力,且拮抗性能稳定,具有较好的生防应用潜力。经过形态观察、生理生化特征及16SrRNA序列分析,将XRK5鉴定为辣椒溶杆菌(Lysobacter capsici),XRK5的16SrRNA序列在GenBank中的注册号为FJ959348。
- 侯启会杜秉海靳奉理王雪张浩文丁延芹姚良同
- 关键词：向日葵菌核病拮抗细菌
- 西瓜根际枯萎病拮抗放线菌的筛选及鉴定被引量：16
- 2010年
- 从西瓜根际分离获得了32个放线菌分离物,通过离体拮抗试验,筛选出3株对西瓜枯萎病有良好拮抗效果的放线菌,编号为XF9、XF18和XF22。通过对其进行形态学观察、生理生化测定以及16S rDNA序列分析,初步确定XF9为灰色链霉菌(Streptomyces griseus),XF18为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae),XF22为脱叶链霉菌(Streptomyces exfoliates)。XF9、XF18和XF2216S rDNA序列的GenBank登录号分别为EU723881、EU723880和EU723879。
- 赵丽明丁延芹路晓萌姚良同杜秉海
- 关键词：枯萎病拮抗菌
- 三株甜瓜拮抗细菌的筛选与鉴定被引量：3
- 2010年
- 以甜瓜根腐病病原菌(Fusarium solani)为指示菌,从甜瓜根际筛选到两株具有明显拮抗效果的细菌,编号为F22,T5b。以甜瓜霜霉病病原菌(Pseudoperonospora cubensis)为指示菌,从甜瓜健康叶际中筛选出一株具有拮抗效果的细菌,记为B11b。经过形态学观察、生理生化测定,16S rDNA序列及系统发育分析,初步鉴定T5b为芽孢杆菌属(Bacillussp.),F22,B11b为斯式假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)。T5b,F22,B11b的16S rDNA序列的GenBank登录号分别为EU771077,EU771075,EU771074。
- 路晓萌姚良同赵丽明杜秉海丁延芹
- 关键词：根腐病霜霉病拮抗菌根际
- 枯草芽孢杆菌SC2-4-1葡聚糖酶基因gluB的克隆及序列分析被引量：2
- 2008年
- β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性检测结果表明,从辣椒根际筛选的拮抗菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SC2-4-1能产生β-1,3-1,4-葡聚糖酶。以菌株SC2-4-1的基因组DNA为模板,用PCR方法克隆了该菌的葡聚糖酶基因gluB,其开放阅读框为711bp,编码237个氨基酸。Blast分析,该序列与已报道的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)ATCC 842的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因gluB相似性为85%。所得基因序列的系统发育分析显示,该基因属于β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因。DNAMAN软件比对,所得葡聚糖酶氨基酸序列具有催化裂解β-1,3-和β-1,4-糖苷键的葡聚糖酶活性位点。
- 朱辉丁延芹田方姚良同杜秉海
- 关键词：枯草芽孢杆菌葡聚糖酶
