国家自然科学基金(30970222)
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 相关作者:亓宝秀李新征刘江孙全喜李雪滢更多>>
- 相关机构:山东农业大学山西省农业科学院棉花研究所山东省花生研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 异源长链多不饱和脂肪酸对拟南芥生理功能的影响
- 二十碳戊烯酸(EPA,20:55,8,11,14,17)和二十二碳六烯酸(DHA,22:64,7,10,13,16,19)是鱼油的主要有效成分,属于ω-3长链多不饱和脂肪酸。EPA和DHA对心脑血管疾病的防治以及胎、婴、...
- 袁晓伟孙全喜李新征亓宝秀
- 关键词:鱼油EPADHA长链多不饱和脂肪酸非生物胁迫
- 超长链多不饱和脂肪酸在棉花中的异源合成被引量:2
- 2014年
- 从球等鞭金藻、眼虫、高山被孢霉和拟南芥中分别克隆到Δ9链延长酶、Δ8去饱和酶、Δ5去饱和酶和Δ15去饱和酶基因,利用我们的多基因聚合方法,将这4个基因聚合到植物表达载体pCambia2300上,其中每个基因都含有独立的CaMV35S启动子和Tnos终止子。利用农杆菌介导法将该表达载体转入棉花,通过卡纳霉素和PCR筛选获得转基因阳性植株,提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸,用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA,20:5Δ5,8,11,14,17)含量分别达1.0%和5.0%。表明通过基因代谢工程在棉花中异源合成EPA是可行的,为进一步在棉籽中生产VLCPUFAs奠定了基础。
- 刘江马燕斌孙全喜吴霞李雪滢孙美红李燕娥李新征亓宝秀
- 关键词:去饱和酶转基因EPA棉花
- 球等鞭金藻中Δ5去饱和酶基因的克隆与功能鉴定被引量:1
- 2012年
- 球等鞭金藻(Isochrysis galbana)是一类单细胞海洋微藻,富含二十二碳六烯酸(DHA,22:6Δ4,7,10,13,16,19)。我们利用RACE的方法从球等鞭金藻cDNA文库中同源克隆到一个大小为1329 bp的cDNA片段,编码442个氨基酸的多肽,分子量约49.9 kD。生物信息学分析表明,其编码产物N端具有细胞色素b5结构域,以及与电子传递有关的三个富含组氨酸的结构域,与Pavlova salinaΔ5去饱和酶同源性最高,达56%,故将该基因命名为IgD5。酿酒酵母功能鉴定实验表明,其编码的蛋白质具有Δ5去饱和酶活性,能够将二高-γ-亚麻酸(DGLA,20:3Δ8,11,14)转化成花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14),转化效率平均为34.6%,最高可达40.3%。
- 孙全喜李雪滢郑德松刘江李新征亓宝秀
- 关键词:球等鞭金藻
- 球等鞭金藻Δ5去饱和酶基因IgD5在拟南芥中的功能鉴定被引量:1
- 2013年
- 从球等鞭金藻中克隆到一个Δ5去饱和酶基因,命名为IgD5。系统发育树分析表明,该基因编码产物与来源于巴夫藻Pavlova salina的Δ5去饱和酶亲缘关系最近。此前通过酿酒酵母表达系统,证明IgD5对ω6脂肪酸具有Δ5去饱和酶活性,但并未鉴定IgD5对ω3脂肪酸的催化活性。我们将IgD5转化能够内源合成二高-γ-亚麻酸(DGLA,20:3Δ8,11,14)和二十碳四烯酸(ETA,20:4Δ8,11,14,17)的已携带2个基因的拟南芥(简称TMA2),通过PCR及RT-PCR筛选阳性植株,提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸,用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA,20:5Δ5,8,11,14,17),含量分别达7.44%和2.07%,转化效率分别为68%和60%,证明IgD5在转基因植物中具有Δ5去饱和酶的活性,对ω3/ω6脂肪酸没有明显偏好性,并且催化活性远高于其在酵母中的活性。在转IgD5的TMA2中除了AA和EPA,没有检测到其他新脂肪酸,表明IgD5底物专一性很强,是一个可用于植物转基因替代生产鱼油的良好基因。
- 刘江孙全喜李新征亓宝秀
- 关键词:球等鞭金藻花生四烯酸二十碳五烯酸拟南芥