河南省杰出青年科学基金(04120001800)
- 作品数：15 被引量：101H指数：7
- 相关作者：曹健王育军王红军王月囡于海东更多>>
- 相关机构：河南工业大学郑州工程学院郑州职业技术学院更多>>
- 发文基金：河南省杰出青年科学基金河南省高校杰出科研人才创新工程基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 两种乳酸杆菌超声破碎提取亚油酸异构酶条件的研究被引量：2
- 2006年
- 本文利用超声波对两种乳酸杆菌细胞进行破碎,以提取细胞中的亚油酸异构酶,并就超声波破碎条件对亚油酸异构酶释放的影响进行了研究。通过单因素试验和正交试验得出嗜酸乳杆菌的最佳超声破碎条件为:间歇破碎次数80次(每次破碎3s,中间间隔4s),破碎菌液体积50ml,菌悬液浓度20g/60ml,破碎时的抽提缓冲液最佳pH值4.0,NaCl浓度0.2mol/L;保加利亚乳杆菌的最佳超声破碎条件为:间歇破碎次数80次(每次破碎3s,中间间隔4s),破碎菌液体积60ml,菌悬液浓度15g/50ml,破碎时的抽提缓冲液最佳pH值4.8,NaCl浓度0.3mol/L。
- 曹健张浩于海东王月囡王红军王育军相丽新
- 关键词：嗜酸乳杆菌保加利亚乳杆菌亚油酸异构酶
- 嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因的克隆与表达被引量：5
- 2007年
- 利用分子生物学方法对嗜酸乳杆菌AS1.1854菌株的亚油酸异构酶基因进行克隆与表达.培养菌体后提取总DNA,用PCR法扩增其亚油酸异构酶基因,再将其克隆到pET30a载体上,转入到大肠杆菌BL21株中表达,在低温下诱导表达出重组蛋白,并用Ni2+金属鳌合层析对重组蛋白进行分离和纯化.通过实验,得到了亚油酸异构酶的基因,成功转入到载体中,表达出了可溶性的重组蛋白,并对其进行了纯化.实验表明,在原核细胞中可以表达出可溶性重组亚油酸异构酶,以200mmol/L的咪唑洗脱液进行洗脱可以获得目标蛋白.
- 曹健董理王育军
- 关键词：嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因克隆重组蛋白纯化
- 亚油酸异构酶研究进展被引量：16
- 2004年
- 亚油酸异构酶可催化亚油酸异构化为共轭亚油酸。随着共轭亚油酸的应用日益广泛 ,人们对亚油酸异构酶的研究也日益深入。在查阅大量文献的基础上 。
- 张浩曹健常共宇王月囡王育军
- 关键词：亚油酸异构酶催化异构化共轭亚油酸
- 共轭亚油酸生物合成的研究被引量：6
- 2006年
- 共轭亚油酸是80年代末才被发现的一种具有多种生理功能的天然不饱和脂肪酸,具有抗癌、抗动脉粥样硬化、减肥、促进生长、缓和免疫反应副作用等许多重要生理功能,在医药、食品、保健品、化妆品等中具有广阔的应用前景。目前,工业化生产共轭亚油酸的方法是碱异构化法,但共轭亚油酸的生物合成法是未来的发展趋势。本文对近年来共轭亚油酸生物合成方面的研究进展进行了综述。
- 王月囡曹健曾实于海东王育军王红军
- 关键词：共轭亚油酸生物合成亚油酸异构酶
- 嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力测定的研究被引量：15
- 2007年
- 亚油酸异构酶能催化亚油酸转化为具有生理活性的共轭亚油酸。有关该酶活力的测定方法在国内外不同的文献中差别较大,尚没有统一的方法。本文对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力的测定方法进行了研究,以期为该酶分离纯化过程中酶活力的测定提供参考。通过单因素试验和正交试验,确定了该酶的最佳酶反应条件为:粗酶液添加量0.10ml,亚油酸0.70ml,Tween-802.00ml,反应温度37℃,反应时间3h。
- 曹健王月囡王红军王育军于海东
- 关键词：嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶
- 产酶培养条件对一株嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力的影响被引量：1
- 2007年
- 本实验用MRS培养基嗜酸乳杆菌,并通过添加亚油酸(LA)诱导其产亚油酸异构酶。单因素试验结果表明,在MRS培养基中添加糖类物质总体上不利于产酶,添加尿素、牛肉膏、酵母膏、酪蛋白等有机氮源后,酶活力比对照组有较大幅度提高,而添加无机氮源酶活力增加幅度不如有机氮源。在培养基中添加一定量的NaCl和卵磷脂也有助于酶活力的提高。由正交试验结果确定的最佳产酶条件为:培养温度37℃,培养时间24h,每100ml培养基中添加10mgLA,接种量3%(V/V)。
- 王月囡曹健张琳王红军王育军于海东
- 关键词：嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶
- 微生物亚油酸异构酶的生物信息学分析被引量：4
- 2007年
- 运用生物信息学方法,对已在GenBank上公开发表的罗伊氏乳杆菌、疮疱丙酸杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和短双岐杆菌等的亚油酸异构酶基因序列进行了分析,并对这些基因序列编码的蛋白质进行了预测.
- 张琳曹健陈金鹏
- 关键词：生物信息学亚油酸异构酶
- 一株嗜酸乳杆菌突变株转化亚油酸为共轭亚油酸条件的研究被引量：23
- 2003年
- 以嗜酸乳杆菌为出发菌株,用紫外诱变方法,得到一株共轭亚油酸转化量较高的突变株,其转化亚油酸为共轭亚油酸的最佳条件为:反应温度35℃,pH值4.0,保温时间48h,亚油酸与培养液的比例为1000mg:100ml,在此条件下共轭亚油酸的产率达38.1%。在1mmol/L浓度下,Na+、Fe2+、Mg2+有助于提高共轭亚油酸的产量,而Hg2+、Co2+、Cu2+、Mn2+、Fe3+不利于共轭亚油酸的合成。用超声波处理细胞后,共轭亚油酸的产率显著提高。
- 曹健魏明曾实陈秀金
- 关键词：亚油酸共轭亚油酸酶法
- 植物乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的克隆、序列分析及重组表达被引量：9
- 2007年
- 利用MRS培养基培养植物乳杆菌AS1.555,收集菌体后提取总DNA,用PCR技术扩增其亚油酸异构酶基因,克隆到pQE30质粒载体上,并进行测序。测序结果表明,扩增DNA全长1710 bp,编码569个氨基酸,分子量为64.7 ku。经同源性比较,此核酸序列与罗伊氏乳杆菌、短双歧杆菌、疮疱丙酸杆菌亚油酸异构酶基因核苷酸序列差别较大,推测此基因的来源与上述菌种不同。
- 相丽新曹健王红军尹艳丽王育军于海东张琳董理
- 关键词：植物乳杆菌克隆
- 一株嗜酸乳杆菌突变株亚油酸异构酶的纯化及性质被引量：31
- 2004年
- 亚油酸异构酶可以把亚油酸转化为共轭亚油酸。用硫酸铵沉淀、透析、凝胶过滤等步骤 ,从 1株嗜酸乳杆菌突变株中分离纯化了该酶。纯化倍数为 5 2 .0倍、比活力达 5 1 3 .0U/mg、活力回收 7.0 %。用SDS PAGE测得该酶亚基的分子量为 40 .7ku ;该酶的最适反应pH值为 4.0左右 ,最适反应温度为 3 0～ 40℃ ,在 pH 2 .0～ 7.0和 60℃以下较稳定。Fe2 + 、Mg2 + 、Zn2 + 、Na+ 能提高酶活性 ,Hg2 + 、Cu2 + 、Mn2 + 、Fe3+ 能抑制酶活性。以亚油酸为底物时该酶的动力学常数为 2 1 .6mmol/L。
- 曹健魏明曾实陈秀金汪晨辉
- 关键词：嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶纯化
