首都医学发展科研基金(2002-3068)
- 作品数：5 被引量：26H指数：3
- 相关作者：谢立黄德庄贺立香靳海英贺丽香更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京佑安医院首都医科大学中国预防医学科学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丙型肝炎病毒单克隆抗体的制备及其鉴定被引量：3
- 2005年
- 目的押以基因工程表达的丙型肝炎病毒抗原蛋白(HCAg)为抗原,建立分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的McAb进行鉴定。方法:用纯化HCV基因工程表达抗原(HCAg)免疫Balb/c小鼠,取脾细胞及骨髓瘤细胞按常规方法融合、筛选、克隆化及腹水注射制备McAb。采用ELISA及分片断鉴定技术进行鉴定。结果押筛选出5株能稳定分泌特异性抗-HC的McAb杂交瘤细胞株,经多次复苏传代仍能稳定分泌抗体,特异性强,效价高。与不同抗原蛋白的ELISA反应呈特异性阳性反应。分片断鉴定结果显示,所获5株McAb主要为抗HCV核心蛋白和非结构蛋白NS3。结论:此5株丙肝杂交瘤细胞株分泌的抗体对丙肝抗原具有特异亲和性,为丙型肝炎病毒抗原诊断试剂的研制提供了关键技术基础。
- 谢立陈万荣张明程黄德庄贺立香
- 关键词：丙型肝炎病毒病毒感染单克隆抗体结构蛋白
- 血清丙型肝炎病毒抗原的免疫酶斑点法检测被引量：2
- 2006年
- 目的建立一种可筛查早期HCV感染者的简单快捷方法。方法制备特异性的抗HCV核心蛋白和抗HCVNS3的单克隆抗体(mAb)酶标记物,应用免疫酶斑点法检测各种类型肝炎患者和正常人血清中的HCV-Ag,并与双抗体夹心ELISA检测HCV-Ag及RT-PCR检测HCVRNA的结果进行比较。结果免疫酶斑点法检测表明,HCV-Ag的检出率在抗HCV抗体阳性、乙肝和非甲非戊肝炎患者中,分别为15.4%(8/52)、1.73%(19/1099)和1.03%(1/97);在81例甲肝和67例戊肝患者及50例正常人中均未检出。免疫酶斑点法与双抗体夹心ELISA及RT-PCR的检测的结果没有显著性差异,但其与RT-PCR检测结果有一定的相关性。结论免疫酶斑点法特异性强,操作简便快捷,不需要特殊仪器设备,为HCV的早期诊断和常规筛查提供了有效的方法。
- 时红波谢立黄德庄贺立香
- 关键词：丙型肝炎病毒免疫酶斑点法抗原单克隆抗体
- HCV RNA检测与血清病毒学的关系及临床意义分析被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)RNA检测在HCV单独感染和HCV、乙型肝炎病毒(HBV)合并感染中的临床意义。方法:对129例HCV感染者检测抗-HCV、HCVRNA和总胆红素(TBiL)、谷丙转氨酶(ALT),并对其中的HCV、HBV合并感染(HBV+HCV组,27例)和HBV单独感染患者(HBV组,50例)检测HBVDNA。结果:129例HCV感染患者中,抗-HCV和HCVRNA同时阳性者占68.2%,抗-HCV阳性而HCVRNA阴性者占27.9%,抗-HCV阴性而HCVRNA阳性者占3.9%。肝硬化和肝癌组的HCVRNA阳性率84.2%(32/38)较慢性肝炎组的67.0%(61/91)升高(P<0.05)。ALT和(或)TBiL均异常的HCV患者HCVRNA阳性率79.8%(71/89)较ALT和TBiL均正常者的55.0%(22/40)升高(χ2=8.42,P<0.01)。在HCV和HBV合并感染组,HCVRNA阳性率55.6%(15/27)低于单纯HCV感染组的76.5%(78/102),差异有统计学意义(P<0.05),HBVDNA的阳性率29.6%(8/27)低于单纯HBV感染组的76.0%(38/50),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在HCVRNA检测的同时,结合多项血清病毒学和一些生化相关指标分析,对HCV感染的临床诊治有重要的指导意义。
- 靳海英谢立林尊慧郭向华谢放
- 关键词：肝炎丙型肝炎乙型RNA病毒
- 用酶联免疫夹心法测定肝炎患者血清丙型肝炎抗原被引量：15
- 2005年
- 目的建立血清中丙肝病毒NS3抗原(HCAgNS3)的酶免检测方法。方法以特异性强、敏感度高、识别不同HCAgNS3抗原表位的HCAgNS3单克隆抗体和高效价的纯化抗HCV分别作为包被抗体和酶标记抗体,采用夹心ELISA法测定血清中HCAgNS3抗原。结果优化了酶免疫反应条件;该方法对HCAgNS3的最低检测限为1～2ng/ml;批内(n=13)及批间(n=3)变异系数(CV)分别为4.51%和5.64%;对52例抗HCV阳性血清测定HCAgNS3抗原的检出率为21.2%,对15例HCAgNS3阳性标本测定HCVRNA的检出率为60%,1350例抗HCV阴性的其他类型肝炎患者血清标本中,HCAgNS3检出率为1.7%,50例正常人血清标本的HCAgNS3抗原测定结果均为阴性。结论该方法敏感性较高,特异性、重复性和稳定性均良好,可以作为早期诊断HCV感染的有效方法。
- 谢立黄德庄时洪波贺丽香靳海英
- 关键词：C型肝炎样病毒属酶联免疫吸附测定
- 血清中丙型肝炎NS3抗原ELISA检测方法的建立和初步应用被引量：2
- 2009年
- 目的评价血清中丙型肝炎病毒（HCV）游离Ns，抗原的酶联免疫吸附（ELISA）检测方法的特异性和灵敏度，初步探讨该方法在临床应用中的意义。方法对77例正常人血清标本，173例抗-HCV阳性标本和3708例抗-HCV阴性的其他类型肝炎血清标本检测HCV游离NS，抗原；对部分HCVNS，抗原阳性标本进行验证，包括HCVRNA测定、中和试验和免疫斑点试验；对11例患者的25份系列血清标本进行rHCV游离Ns，抗原、HCVRNA和HCV抗体的联合检测，并结合临床资料综合分析。结果3708例抗-HCV阴性的其他类型肝炎血清标本中有48例为HCVNS，抗原阳性，其中3030例单纯乙型肝炎和445例其他类型肝炎血清标本中分别有44例和4例为HCVNS，抗原阳性；173例HCV抗体阳性标本中有42例为HCVNS，抗原阳性；77例正常人血清标本的HCVNS，抗原检测结果均为阴性；15例HCVNS，抗原阳性标本中有9例为HCVRNA阳性；23例HCVNS，抗原阳性标本的中和率和免疫斑点试验的阳性率分别为87．0％和69．6％；25份系列血清标本的检测结果显示其HCVNS，抗原的吸光度值与时间呈负相关，并有2例HCVNS，抗原阳性标本随着血清中HCVNS，抗原的吸光度值下降，其HCV抗体转阳。结论血清中HCV游离NS，抗原的ELISA检测方法有较好的特异性和敏感度，在发展中国家应用此方法进行HCV感染的早期诊断有-定的临床意义和推广价值。
- 谢立黄德庄陈海伦贺立香王键韩大康
- 关键词：丙型肝炎病毒抗原丙型肝炎病毒RNA丙型肝炎病毒抗体酶联免疫吸附试验
