广东省科技计划工业攻关项目(2007A0300007-7)
- 作品数：6 被引量：73H指数：6
- 相关作者：李晖周晓红杨杏芬陈传德柯昌文更多>>
- 相关机构：广东省疾病预防控制中心暨南大学深圳市罗湖区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金深圳市罗湖区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 荧光定量RT-PCR定量检测诺如病毒方法的建立及其评价被引量：12
- 2010年
- 目的：建立荧光定量RT-PCR快速检测诺如病毒GⅠ、GⅡ的方法,以用于患者标本的检测、分型及绝对定量。方法：经过优化筛选出最佳反应体系及反应条件,建立荧光定量RT-PCR快速检测诺如病毒的方法;制作两种不同型号的荧光定量PCR仪的绝对定量标准曲线,并从灵敏度、特异性、重复性、对患者标本检测能力等方面对建立的方法进行综合评价。结果：该方法在两种不同型号的仪器上对108-101copy/μl范围内的病毒,具有良好的线性关系,最低灵敏度为101copy/μl。与容易引起腹泻症状的轮状病毒、腺病毒、星状病毒、肠道病毒均无交叉反应;诺如病毒GⅠ、GⅡ两种常见感染人类的亚型之间无交叉反应。批内及批间重复性实验的标准差在0.10～0.59、变异系数在0.43%-2.84%之间,显示该方法重复性较好。用该方法共检测腹泻患者粪便标本181份,其中33份诺如病毒阳性,随机抽取10份阳性标本测序分析,结果证实均为诺如病毒。结论：本研究建立的诺如病毒荧光定量RT-PCR检测方法,灵敏度、特异性、重复性、对患者标本的检测能力等均显示较好的结果,且能快速区分GⅠ、GⅡ两种感染人类的重要亚型,在诺如病毒的快速检测中有着实际推广意义。
- 陈传德周晓红莫艳玲李晖杨贵清卓菲
- 关键词：荧光定量RT-PCR诺如病毒灵敏度特异性
- 水中诺如病毒富集及定量检测研究被引量：8
- 2010年
- 目的评估MCE-PEG富集法(混合硝酸纤维素膜第一次富集和PEG沉淀第二次富集)对水中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供有效的实验室检测方法。方法把含有诺如病毒的粪便加入纯净水中,用MCE-PEG方法富集后,荧光PCR绝对定量检测富集前后水的病毒浓度,评估该方法的病毒回收率。同时梯度稀释粪便悬液,分别加入纯净水中,评估该方法的灵敏度。结果经过混合硝酸纤维素膜第一次富集后待滤水被浓缩100倍,病毒平均回收率为56.12%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为10拷贝/μl。PEG沉淀第二次富集后,浓缩倍数为1000倍,病毒平均回收率为42.47%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为1拷贝/μl。结论MCE-PEG富集法操作简单、材料价格实惠、易于购买、病毒回收率及灵敏度较高,可望进一步优化后广泛应用于不同水中病毒富集浓缩检测,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供了有效的实验室检测方法。
- 周晓红李晖杨杏芬柯昌文陈传德郑焕英周惠琼陈秋霞邹丽容
- 关键词：诺如病毒灵敏度
- 贝类中诺如病毒检测方法的研究进展被引量：10
- 2012年
- 诺如病毒(norovirus,NVs)是非细菌性胃肠炎的首要致病原因,世界上50%以上的胃肠炎暴发都由它引起。诺如病毒主要通过食物、水以及人与人之间接触传播,被污染的食物中以贝类中富集的诺如病毒最难检测,但贝类在2000—2007年的世界食源性诺如病毒感染中占了17.5%。本文就世界各国对贝类中诺如病毒检测方法的研究进展进行综述。
- 袁巧王晨李晖邓小玲
- 关键词：诺如病毒贝类
- 食品中诺如病毒RT-PCR检测技术研究进展被引量：10
- 2009年
- 诺如病毒(Norovirus,NoV)是急性胃肠炎暴发的重要病原,其特殊的生物学特性容易引起食品的污染。对食品中NoV的准确检测能为诺如病毒胃肠炎防控提供科学依据。反转录(RT)-PCR技术是目前食品NoV检测的主要方法,检测过程包括病毒富集、RNA提取、引物设计、RT-PCR反应、扩增产物鉴定共5个步骤,其中病毒富集是检测的关键及难点。影响食品中NoV的RT-PCR检测结果的因素较多,目前尚无一种标准的检验方法,因此有必要加快相关检验方法研究,建立高风险食品的病毒检测方法以指导实际工作。
- 周晓红李晖杨杏芬
- 关键词：诺如病毒食品RT-PCR检测
- 诺如病毒胃肠炎暴发后环境中病毒检测情况分析被引量：8
- 2010年
- 目的了解诺如病毒胃肠炎暴发后，病例临床症状消失、末例病例发病日期经过最长潜伏期（72h）且无续发病例的情况下，病例家庭环境及外环境水标本中病毒存在情况。方法在末例病例发病日期经过最长潜伏期（72h）后，采集病例肛拭标本、家庭环境标本、外环境水标本，采用RT-PCR方法检测病毒，阳性标本测序分析。结果9份病例肛拭标本中3份呈阳性；46份家庭环境拭子中2份呈阳性，分别是来自两户已无现症病例的家庭厕所马桶表面；5份外环境水标本中1份呈阳性，即村民粪便直接排入的河涌。病例肛拭、家庭环境拭子及河涌水三者检出的病毒株核苷酸序列一致，提示病毒同源。结论诺如病毒胃肠炎暴发后期，病例肛拭、病例家庭环境及外环境水标本中仍能检出病毒，因此有必要加强病例的粪便管理及疫情后期的环境消毒，以防粪便污染引起二代病例：
- 周晓红李晖杨杏芬柯昌文钟豪杰孙立梅郭汝宁
- 关键词：诺如病毒胃肠炎
- 食源性及水源性诺如病毒研究进展被引量：35
- 2010年
- 周晓红李晖杨杏芬
- 关键词：食源性水源性诺如病毒
